Количественная оценка уровней иммунных медиаторов в слизистой оболочке человека

Аннотация

Источник: Wolsk, H. M. et al., Неинвазивный отбор проб слизистой жидкости слизистой оболочки для количественной оценки иммуномедиаторов верхних дыхательных путей in vivo.J. Vis. Exp. (2017)

Это видео демонстрирует количественную оценку уровней иммунных медиаторов в экстракте жидкости, выстилающей слизистую оболочку носа новорожденного человека. Система мультиплексного анализа на основе электрохемилюминесценции измеряет эти медиаторы, оценивая интенсивность излучаемого света при их возбуждении.

Протокол

Все процедуры, связанные со сбором образцов, были выполнены в соответствии с рекомендациями института IRB.

1. Экспериментальная установка

1. Используйте листы фильтровальной бумаги (волокнистые листы гидроксилированного полиэстера, см. Таблицу материалов).
   1. Вырежьте полоски размером 3 х 15 мм для ребенка 1 месяца и Г-образной формы для детей постарше и взрослых (5 х 20 х 10 мм (короткий кронштейн Л)).
2. Вставьте по одному листу фильтровальной бумаги в каждую ноздрю младенца с помощью щипцов. Поместите фильтровальную бумагу в переднюю часть нижней носовой раковины (п....

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье

Имя	Компания	Каталожный номер	Комментарии
Волокнистые гидроксилированные полиэфирные листы	Аккувик Ультра	SPR0730	фильтровальная бумага
Буфер для миллиплексного анализа	Многородность	Л-АВ	буфер
Пластины для хранения с низким содержанием белка	Термо Сайентиал	CLS8161	Пластины
Ингибитор протеазы	Рош	11873580001	Полный коктейль ингибиторов протеазы без ЭДТА
Считыватель многоточечных пластин	Мезомасштаб	NA	Секторный тепловизор 6000
Анализов	Мезомасштаб		Человеческий 10-плексный анализ цитокинов TH1/TH2 и 9-плексный хемокиновый анализ, а также одинарные IL-17A, TGF-β1 и TSLP. Описание можно найти в Интернете на www.mesoscale.com