Измерение иммуноиндуцированного ингибирования роста рассады

Аннотация

Источник: Bredow, M. et al., Анализы окислительного взрыва и ингибирования роста рассады у Arabidopsis thaliana. J. Vis. Exp. (147),(2019).

Это видео демонстрирует анализ ингибирования роста рассады на растении Arabidopsis thaliana. Определено влияние повышенной концентрации иммунного пептидного элиситора на рост рассады.

Протокол

1. Анализ на ингибирование роста рассады

1. Семена простерилизовать и посеять на тарелки Мурашиге и Скуга (МС).
   1. Приготовьте стерильную среду полуконцентрации (0,5x) MS (2,16 г/л), содержащую 0,8% агара [w/v]. Разлейте фильтрующий материал по пластинам (90 x 15 мм) в колпаке с ламинарным потоком.
   2. Простерилизовать около 100 семян в микроцентрифужной пробирке, промыв 1 мл 70% этанола в течение 2 минут, и удалить с помощью аспирации. Добавьте 1 мл 40% отбеливателя и осторожно покачивайте в течение 17 минут при комнатной температуре. Удалить отбеливатель путем аспирации и трижды промыть в 1 мл стерильной воды в течение 5 мин....

Результаты

Рисунок 1. Анализ на ингибирование роста рассады, индуцированный элициторами, у Arabidopsis. (А) Посеять рассаду на агар МС и выращивать в течение 3-4 дней в стандартных условиях короткого дня. (B) Пересадите рассаду в 48-луночные планшеты, содержащие среду MS или MS, содержащую различные концентрации elf18. (C) Через 8-12 дней визуально оцените размер саженца, а затем измерьте свежий вес с .......

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье

Имя	Компания	Каталожный номер	Комментарии
8-луночные стерильные планшеты с крышкой	Сигма-Олдрич	CLS3548
Аналитические весы с уклонным шейдом	ВВР	ВВР-225АК	Для анализа инициации роста можно использовать любую стандартную аналитическую шкалу, однако оптимальным является прямой компьютерный вывод.
BioHit mLine Механический 12 многоканальный дозатор (30-300 мкл	Сарториус	725240 (Английский	Можно использовать любую многоканальную пипетку, а при необходимости и одну дозатор.
elf18 (AcSKEKFERTKPHVNVGTIG)	ЭЗ Биолаб	КП7211	Храните 10 мМ стокового пептида при температуре -80 °C в пробирках с низким содержанием белка. После размораживания храните 100 мкМ рабочего запаса при температуре -20 градусов С.
Базальные соли Мурисажа и Скуга	Лаборатория Седарлейн	МСП09-100ЛТ	Хранить при температуре 4 градуса С.
Белые полистирольные 96-луночные планшеты	Научный центр Фишера	Тел.: 07-200-589

)