Все процедуры, связанные с животными, были проверены местным институциональным комитетом по уходу за животными и ветеринарным наблюдательным советом JoVE.
1. Визуализация ПЭТ in vivo с 89Zr-DFO-J591
ВНИМАНИЕ: Этот шаг протокола включает в себя обработку и манипулирование радиоактивностью. Прежде чем выполнять эти шаги, исследователи должны проконсультироваться с отделом радиационной безопасности своего учреждения. Следует предпринять все возможные шаги для минимизации воздействия ионизирующего излучения.
- Самцам афтимических голых мышей подкожно имплантируйте 5 x 106 клеток рака предстательной железы (LNCaP) и дайте им вырасти до 100-150 мм 3 ксенотрансплантата (через 3-4 недели после инокуляции).
- Разведите радиоиммуноконъюгат 89Zr-DFO-J591 до концентрации 1,0 мКи/мл в 0,9% стерильном физиологическом растворе.
- Введите 200 мкл раствора 89Zr-DFO-J591 (DFO = десферриоксамин, J591 = антитело-мишень простат-специфического мембранного антигена [ПСМА]) (200 мкКи; 7,4 МБкq) в боковую хвостовую вену мышей-носителей ксенотрансплантатов.
- В желаемый момент времени визуализации (например, через 12, 24, 48, 72, 96 или 120 часов после инъекции) обезболите мышь смесью 2% изофлурана: газообразного кислорода.
- Поместите мышь на кровать ПЭТ-сканера для мелких животных и поддерживайте анестезию во время сканирования, используя 1% смесь изофлурана и газообразного кислорода. Перед тем, как поместить животное на кровать сканера, проверьте анестезию методом «щипки пальца ноги» и нанесите офтальмовизующую мазь на глаза мыши, чтобы предотвратить высыхание во время анестезии.
- Получение данных ПЭТ для мыши с помощью статического сканирования с минимум 40 миллионами совпадающих событий с использованием энергетического окна 350–700 кэВ и временного окна совпадения 6 нсек.
- После завершения получения изображения не оставляйте мышь без присмотра, а также не помещайте ее в клетку с другими мышами до тех пор, пока она не придет в сознание.
