Анализ in vitro для оценки цитотоксичности естественных клеток-киллеров в отношении раковых клеток

Аннотация

Источник: Baik, C. H., et al. Анализ цитотоксичности на основе планшетов для оценки цитолитической функции естественных клеток-киллеров плаценты крысы. J. Vis. Exp. (2019)

Это видео демонстрирует проведение анализа высвобождения лактатдегидрогеназы для определения цитотоксичности естественных киллеров (NK) против раковых клеток-мишеней. Анализ количественно определяет высвобождение фермента цитоплазматической лактатдегидрогеназы из раковых клеток путем измерения абсорбции образовавшегося продукта красного цвета.

Протокол

1. Анализ цитотоксичности: протокол анализа

1. Используйте круглое дно, обработанное культурой 96-луночный планшет для установки планшета, как показано в таблице 1. В этой таблице представлены экспериментальные контрольные и 3 комплекта экспериментальных колонок НК. Это может быть расширено до 10 экспериментальных колонок NK в 96-луночной пластине.
2. Центрифугируйте планшет для анализа при температуре 250 x g в течение 4 минут, чтобы убедиться в том, что эффектор и клетки-мишени находятся в контакте. Инкубируйте 96-луночный планшет в течение 5 часов в инкубаторе с увлажненной камерой при 37 °C, 5%_CO2 для до....

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье

Имя	Компания	Каталожный номер	Комментарии
96-луночный планшет для культивирования тканей	КЛЕТОЧНЫЙ ТРАКТ	No 229190 (Английский	Стерильный, с круглым дном
Скребок для ячеек	рыбак	8100241
Набор для анализа нерадиоактивной цитотоксичности Cytotox 96	Компания Promega	Г1780
РПМИ	Gibco	11875135	1640 Средний
Ячейка YAC-1	АТКС	ТИБ-160

)