Иммунотерапия

Это видео иллюстрирует метод выделения инвариантных естественных киллерных Т-клеток, также известных как клетки iNKT. Процедура начинается с введения мыши синтетического гликолипида для стимуляции активации и пролиферации клеток iNKT в селезенке. Затем из селезенки получают суспензии одиночных клеток и инкубируют с iNKT-клеточными узнавающими комплексами, меченными флуорофорами, с последующим разделением на основе магнитных шариков для выделения клеток iNKT.

Это видео демонстрирует метод производства химерных антигенных рецепторов (CAR) Т-клеток ex vivo. Т-клетки человека инкубируются с магнитными шариками, покрытыми анти-CD3 и анти-CD28 антителами, а также средой с добавлением интерлейкина-2 (IL-2), что приводит к активации и пролиферации Т-клеток. Вводятся трансгенные лентивирусные векторы, позволяющие трансгенной РНК интегрироваться в геном хозяина и экспрессировать трансген. Это приводит к тому, что трансдуцированные Т-клетки экспрессируют...

Это видео демонстрирует анализ катионной полимер-опосредованной вирусной трансдукции в естественных киллерах (NK) клетках. Клетки инкубируются с трансгенными лентивирусными векторами, кодирующими флуоресцентный белок. Добавление катионного полимера позволяет вирусу прикрепляться к клеткам и интегрировать свою РНК в геном хозяина, экспрессируя флуоресцентный белок. Флуоресценцию количественно оценивают для оценки индуцированного полимером усиления трансдукции.

Это видео демонстрирует процесс трансфекции первичных макрофагов модифицированной мРНК, кодирующей зеленый флуоресцентный белок. Эти модифицированные мРНК, предназначенные для снижения иммуногенности и улучшения ее стабильности, обеспечивают успешную трансфекцию и последующую экспрессию зеленых флуоресцентных белков, что подтверждается с помощью флуоресцентной микроскопии.

Это видео демонстрирует технику селективного удаления специфических клеток из смешанной 3D-культуры клеток с помощью фотоиммунотерапии в ближнем инфракрасном диапазоне. В этом методе клетки-мишени точно идентифицируются с помощью антитела, конъюгированного с фотопоглотителем NIR. Последующее облучение инфракрасным светом вызывает гибель клеток, эффективно устраняя целевые клетки из 3D-культуры.

Это видео демонстрирует технику вмешательства в аутофагический поток на основе небольшой интерферирующей РНК (миРНК). МиРНК, нацеленная на мРНК FIP200, вводится в моноцитарные незрелые дендритные клетки (iDCs) с помощью электропорации, вызывая подавление экспрессии FIP200 и приводя к ингибированию разрушения ядерного ламина посредством аутофагии. При добавлении вируса простого герпеса (ВПГ) выход ядра вирусного потомства ингибируется из-за отсутствия разрушения ламина через аутофагический поток.

Видео демонстрирует анализ с использованием CD8+ Т-клеток, полученных из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток человека (iPSC), для ингибирования репликации вируса гепатита B (HBV) у мышей. Эти Т-клетки, сконструированные с помощью HBV-специфических рецепторов, переносятся в трансгенных мышей. Репликационно-компетентные плазмиды генома HBV затем вводятся непосредственно в печень, обеспечивая поглощение вирусной ДНК. После того, как вирусные антигены экспрессируются и представлены...

Это видео демонстрирует технику генерации ex vivo Т-клеток химерного антигенного рецептора (CAR) опухолевого антигена. Ретровирусные векторы, несущие трансгенную РНК, смешивают с клетками селезенки в среде с добавлением интерлейкина-2 для содействия выживанию и пролиферации Т-клеток. Затем смесь переносят на пластину, покрытую рекомбинантными фрагментами фибронектина человека, и центрифугируют, чтобы облегчить слияние вируса с клеткой, что позволяет РНК интегрироваться в геном хозяина и...

В видео описывается процесс создания генетически модифицированных CAR-T-клеток с помощью системы CRISPR-Cas9. Инфицирование Т-клеток лентивирусами CRISPR и CAR приводит к модификации гена-мишени и синтезу химерного антигенного рецептора или CAR, что в конечном итоге приводит к образованию генетически модифицированных CAR-T-клеток.

Это видео демонстрирует анализ для выполнения редактирования генов в Т-клетках человека с использованием технологии CRISPR-Cas9. Смесь первичных CD4+ и CD8+ Т-клеток сочетается с рибонуклеопротеиновым комплексом CRISPR-Cas9, нацеленным на определенные гены для нокаута. При электропорации sgRNA направляет Cas9 к целевой последовательности ДНК, создавая точные разрезы. Эти порезы затем восстанавливаются с помощью негомологичного механизма соединения концов клетки, что приводит к нокауту гена.

Это видео демонстрирует технику Cas9-рибонуклеопротеин-опосредованной генетической модификации первичных естественных киллеров (NK) клеток. Рибонуклеопротеин Cas9, состоящий из эндонуклеазы Cas9, связанной с направляющей РНК (гРНК), образованной спариванием оснований CRISPR RNA (crRNA) и транс-активирующей crRNA (tracrRNA), вводится в первичные естественные клетки-киллеры посредством электропорации. Рибонуклеопротеин нацеливается на ДНК хозяина и расщепляет ее в целевом участке, что приводит к...

Это видео демонстрирует анализ in vitro, оценивающий цитотоксические эффекты CAR-Т-клеток на трехмерные опухолевые сфероиды, экспрессирующие флуоресцентные белки. Для этой оценки используется красный флуоресцентный зонд Annexin V, который связывается с остатками фосфатидилсерина на наружной створке раковых клеток апоптоза после взаимодействия с CAR-Т-клетками. Красная флуоресценция, излучаемая зондом, помогает отличить эти клетки от здоровых, излучающих зеленую флуоресценцию.

Это видео демонстрирует метод создания трехмерного сфероида опухоли и совместной культуры Т-клеток. Готовится агарозный слепок с микролунками, содержащими опухолевые сфероиды, с последующим добавлением Т-клеток. После инкубации такая установка позволяет изучать взаимодействие Т-клеток с опухолевыми сфероидами в контролируемой трехмерной среде.

Это видео демонстрирует анализ in vitro для проверки активности химерных антигенных рецепторов (CAR) Т-клеток. Клетки В-клеточной лимфомы, экспрессирующие антиген CD19 и цитоплазматическую люциферазу, культивируют совместно с CD19-специфичными CAR-Т-клетками. Связывание CAR с CD19 в опухоли заставляет CAR-T-клетки высвобождать цитокины и токсины, которые вызывают цитотоксичность опухолевых клеток. Активность CAR-Т-клеток оценивают путем количественного определения высвобождаемого цитокина и...

Это видео демонстрирует проведение анализа высвобождения лактатдегидрогеназы для определения цитотоксичности естественных киллеров (NK) против раковых клеток-мишеней. Анализ количественно определяет высвобождение фермента цитоплазматической лактатдегидрогеназы из раковых клеток путем измерения абсорбции образовавшегося продукта красного цвета.

Это видео демонстрирует технику создания антиген-специфичных химерных антигенных рецепторов (CAR) Т-клеток с помощью ретровирусной трансдукции. Активированные мышиные CD8+ Т-клетки добавляют в микролуночный планшет, покрытый фрагментами рекомбинантного фибронектина. Затем вводятся ретровирусные векторы, содержащие трансгенную РНК, кодирующую антиген-специфический химерный антигенный рецептор (CAR), и планшет центрифугируют для облегчения трансдукции. После инкубации трансдуцированные клетки...

Это видео демонстрирует метод создания плазматических мембранных везикул из стволовых клеток костного мозга путем их быстрого пропускания через мембранный фильтр. Эти ПМВ демонстрируют потенциал для заместительной цитоплазменной терапии.

Это видео демонстрирует анализ для создания антиангиогенных нейтрофилов, ассоциированных с опухолью (TANs). При взятии опухоли меланомы мыши, содержащей проангиогенные TANs, отдельные клетки выделяют с помощью флуоресцентно-активируемой сортировки клеток (FACS) и обрабатывают ингибитором никотинамида фосфорибозилтрансферазы (NAMPT) для снижения способности стимулировать ангиогенез.

Это видео демонстрирует анализ in vitro, использующий β-глюканы для активации клеток микроглии для производства супероксидных радикалов, активной формы кислорода. В клетках рака мозга образующиеся реактивные оксиданты активно подавляют пролиферацию опухолевых клеток и вызывают гибель клеток.

Это видео демонстрирует процедуру адоптивного переноса обработанных солью антигенпрезентирующих дендритных клеток (ДК) мышам. Мышиные CD11c+ дендритные клетки (ДК) подвергаются воздействию среды, содержащей большое количество натрия, образуя в клетках аддукты изолевугландина (IsoLG). Эти аддукты служат неоантигенами и представлены на поверхности ДК. Обработанные солью клетки вводятся мышам путем адоптивного переноса клеток.

Это видео демонстрирует анализ для получения индуцированных плюрипотентных стволовых клеток CD8αβ+ Т, полученных из опухолевого антигена. Опухолевые антиген-специфические ИПСК выращивают на монослое стромальных клеток и дифференцируют в гемопоэтические клетки-предшественники (ГПК). ГПК дифференцируются в CD4+ CD8+ двойные положительные Т-клетки с использованием дифференцировочной среды. Затем эти клетки стимулируют для генерации одиночных положительных Т-клеток, экспрессирующих CD8.

Это видео демонстрирует метод фотоиммунотерапии в ближнем инфракрасном диапазоне для лечения рака легких на сконструированной мышиной модели, демонстрирующей опухолевые клетки, экспрессирующие люциферазу. При введении конъюгата антитело-фотосенсибилизатор (APC), который связывается со специфическими антигенами на опухолевых клетках, мышь подвергается воздействию ближнего инфракрасного излучения, что вызывает фотохимические изменения в APC и приводит к некротической гибели связанных опухолевых...

Это видео демонстрирует метод создания мышей иммунной системы человека (HIS). CD34+ гемопоэтические стволовые клетки (ГСК) выделяют из клеток охристой оболочки пуповинной крови человека с помощью магнитных шариков, покрытых антителами. CD34+ ГСК размножаются в питательной среде, обогащенной цитокинами и криоконсервированной. Наконец, размороженные ГСК вводят иммунодефицитному мышонку для создания мышиной модели ГИС.

Это видео иллюстрирует тестирование адъювантной или дополнительной терапии на мышиной модели с не полностью резецированными подкожными опухолями. Частично резецированную опухоль мышь лечат антителом, нацеленным на антицитотоксический белок Т-регуляторных клеток, потенциально снижая повторный рост опухоли и предполагая эффективную адъювантную терапию.

Это видео демонстрирует анализ для оценки эффективности пероральной комбинированной антиретровирусной терапии (пероральная cART) на модели гуманизированной мыши, инфицированной вирусом иммунодефицита человека-1 (HIV-1). Комбинация препаратов, нацеленных на ВИЧ-1, включая нуклеозидные ингибиторы обратной транскриптазы и ингибиторы переноса цепи интегразы, вводится вместе с пищевой добавкой и антибиотиками. После употребления этой смеси гуманизированными мышами, инфицированными ВИЧ-1, эффективное...

Это видео демонстрирует метод пересадки человеческой кожи мыши с иммунодефицитом и подавленным ответом нейтрофилов. Метод включает в себя нанесение расщепленной кожи человека на ложе трансплантата мыши, его герметизацию и покрытие для восстановления. В конце концов, человеческая кожа прилипает к коже мыши, устанавливая васкуляризацию и кровообращение, что приводит к успешному ксенотрансплантату кожи.

Это видео демонстрирует анализ для создания гуманизированной модели мыши из ксенотрансплантата. Мыши с ослабленным иммунитетом вводят циклофосфамид, чтобы вызвать истощение иммунных клеток. Полученные от пациента опухолевые клетки, смешанные с мононуклеарными клетками периферической крови человека (PBMC) в гидрогеле, подкожно вводят мыши, образуя опухоль с инфильтрирующими Т-клетками.

В этом видео представлена процедура имплантации внутричерепной канюли в мышиной модели опухоли мозга, чтобы облегчить введение иммунотерапевтического агента. Доставка Т-клеток, специфичных к глипикан-2-специфичному химерному антигену, в микроокружение опухоли запускает активацию Т-клеток, что приводит к лизису опухоли и регрессии опухоли.

Видео демонстрирует локорегионарную доставку онколитических вирусов через инъекцию печеночной артерии в качестве терапевтического подхода к гепатоцеллюлярной карциноме. Эти вирусы избирательно реплицируются в опухолевых клетках, индуцируя лизис клеток и высвобождая антигены, ассоциированные с опухолевыми клетками. Этот процесс вызывает иммуногенную гибель клеток, вызывая противоопухолевый ответ.

Это видео демонстрирует метод оценки противоопухолевой активности белка, активирующего нейтрофилы Helicobacter pylori, или HP-NAP, в модели рака мочевого пузыря мыши. HP-NAP взаимодействует с нейтрофилами опухолевых клеток с образованием провоспалительных цитокинов, индуцируя дифференцировку наивных Т-клеток в фенотипы Т-хелперов (Th1) типа 1 и цитотоксических (Tc1) типов 1. Клетки Th1 и Tc1 секретируют интерферон-гамма, ингибируя ангиогенез опухоли и способствуя цитотоксическому разрушению...

Это видео демонстрирует клеточную терапию аутоиммунного артрита у мышей. Регуляторные клетки, полученные из iPSC, экспрессирующие рецепторы, специфичные для овальбумина, вводят метилированный бычий сывороточный альбумин (mBSA), эмульгированный в адъюванте. Мышиные антигенпрезентирующие клетки (APC) обрабатывают и представляют mBSA Т-клеткам, вызывая активацию Т-клеток и миграцию к синовиальной мембране коленного сустава. Последующие инъекции включают только mBSA в левом колене и комбинацию mBSA...

Это видео демонстрирует технику стереотаксической инъекции для введения человеческих эффекторных Т-лимфоцитов в мышиную модель, несущую опухоль мозга человека. После размещения мыши, несущей опухоль под наркозом, на стереотаксической рамке и создания отверстия для заусенцев в месте инъекции на черепе, эффекторные Т-лимфоциты вводятся в область опухоли.

Это видео демонстрирует метод создания двойной гуманизированной костной мыши BLT (костный мозг, печень и тимус) с функциональной иммунной системой человека и стабильным привитым кишечным микробиомом, подобным человеческому.

Это видео демонстрирует генерацию фармацевтических аэрозолей и целенаправленную доставку этих аэрозолей мышам только через нос с помощью ингаляционного устройства, оснащенного генератором аэрозоля. Мышь удерживается в удерживающем устройстве, предназначенном только для носа, и подключается к ингаляционному блоку, который доставляет препарат непосредственно в носовую полость мыши. Впоследствии препарат проходит через трахею и попадает в легкие.

Это видео демонстрирует метод создания модели интерпозиции аорты мыши для изучения аллоиммун-индуцированного отторжения сосудов. После установки мыши-донора под наркозом в положение лежа на спине, инфраренальная брюшная аорта (ИУК) тщательно изолируется от окружающих структур. Ветвящиеся сосуды перевязываются, и оба конца ИУК зажимаются для предотвращения кровотока перед резекцией. Впоследствии донорская ИУК имплантируется аллогенной мыши-реципиенту, и кровоток восстанавливается с помощью...

Видео демонстрирует хирургический метод создания мышиной модели васкуляризованной гетеротопической трансплантации селезенки. Брюшная полость мыши-донора, находящейся под наркозом, вскрывается хирургическим путем для удаления селезенки. Идентифицируют нижнюю полую вену и инфраренальную аорту, перевязывают их поясничные ветви, а также делают отверстия для гетеротопической трансплантации селезенки от конгенной мыши-донора. После завершения сосудистого анастомоза и восстановления притока крови к...

Видео демонстрирует метод создания модели крысы с широко распространенной демиелинизацией коры головного мозга. Это включает в себя нарушение гематоэнцефалического барьера путем введения провоспалительных цитокинов мышам, заряженным рекомбинантным белком миелиновой оболочки. Этот процесс способствует инфильтрации иммунных клеток, что приводит к распространенной демиелинизации коры головного мозга.

Видео демонстрирует создание модели кожи овцы ex vivo, зараженной золотистым стафилококком. Это включает в себя обработку биопсии кожи лба ягненка антибиотиками, создание раневого ложа, размещение его на проницаемой мембране в многолуночной пластине со средой, не содержащей антибиотиков, и установление бактериальной инфекции в кожной ране.

Видео демонстрирует метод прямого переноса интерлейкина-15, кодирующего плазмидную ДНК, в ткань кожи мышиной модели с дефицитом интерлейкина-15 с помощью иглоукалывания с использованием микроигл. Эти микроиглы генерируют микропроколы в самом внешнем слое кожи, способствуя всасыванию и трансфекции плазмидной ДНК в эпидермальные клетки, включая кератиноциты, в тканях кожи.

Это видео демонстрирует процедуру трансплантации фекальной микробиоты мышам с дефицитом интерлейкина-10 и воспалением толстой кишки. Колонизированные фекальные микробы в кишечнике высвобождают вторичные метаболиты, вызывая высвобождение противовоспалительных цитокинов и уменьшая воспаление толстой кишки.

Это видео демонстрирует метод создания двойной гуманизированной модели мыши с иммунной системой человека и клетками печени. Он включает в себя трансплантацию клеток печени человека и гемопоэтических стволовых и прогениторных клеток трансгенной иммунодефицитной мыши путем внутриселезеночной инъекции, что приводит к приживлению клеток печени и развитию иммунных клеток человека.

Видео демонстрирует метод фаговой терапии, нацеленный на инфекцию Pseudomonas aeruginosa у эмбрионов рыбок данио-рерио с муковисцидозом. Фаготерапия эффективно снижает бактериальную нагрузку и смягчает провоспалительные иммунные реакции у эмбрионов рыбок данио-рерио, инфицированных бактериями, что приводит к снижению летальности эмбрионов муковисцидоза.

Это видео демонстрирует технику введения обогащенной тромбоцитами плазмы (PRP) в разрезанное ахиллово сухожилие крыс. Небольшой сегмент вырезается из ахиллова сухожилия крысы-реципиента, участок зашивается, и крысе дают восстановиться. Одновременно с этим у крысы-донора собирают цельную кровь и центрифугируют для получения PRP, которую затем активируют и вводят в ушивное место крысы-реципиента для стимуляции восстановления сухожилия.

В видео демонстрируется метод создания гуманизированной модели мыши с искусственным иммунитетом против вируса иммунодефицита человека (ВИЧ) на основе стволовых клеток. Ткань тимуса плода человека и сконструированные гемопоэтические стволовые клетки (ГСК) имплантируются в почечную капсулу мыши с сильно ослабленным иммунитетом. ГСК, экспрессирующие химерные антигенные рецепторы (CAR) против ВИЧ, смешиваются в студенистой белковой смеси, что способствует их совместной локализации с тканью тимуса.

Это видео демонстрирует пероральное введение преобразованных дрожжевых клеток в мышиную модель. Трансформированные дрожжевые клетки перорально вводятся с помощью техники зондажа, достигая желудка мыши. Позже клетки мигрируют в тонкую кишку, где микрочастицы поглощают их и облегчают их перенос к пейеровым пластырям и получают доступ к иммунной системе кишечника.

Это видео демонстрирует каналостомию, процедуру, которая позволяет местной доставке лекарств во внутреннее ухо мыши через полукружный канал с минимальным повреждением слуха и вестибулярной функции. Этот метод позволяет вводить вирусные векторы, фармацевтические препараты и малые молекулы во внутреннее ухо мыши.

Это видео демонстрирует основанный на визуализации метод визуализации трансплантированных бета-клеток, экспрессирующих люциферазу, у мыши с диабетическим иммунодефицитом, не страдающей ожирением. Введение спленоцитов от мышей с диабетом приводит к прогрессирующему разрушению бета-клеток, что визуально подтверждается снижением люминесценции после введения субстрата.

Это видео демонстрирует анализ вакцинации от опухоли на основе клеток. Мышь, которой внутрикожно вводят клетки меланомы B16-F10 для опухолевого образования, вакцинируют клетками B16-F10, секретирующими цитокин Flt3L вблизи развившейся опухоли. Секретируемый из вакцины Flt3L способствует созреванию и пролиферации дендритных клеток, которые затем представляют опухолевые антигены Т-клеткам в лимфатических узлах, вызывая целенаправленный противоопухолевый иммунный ответ.

Это видео демонстрирует метод создания поливалентных вакцин на основе внешних мембранных везикул (OMV). Клетки млекопитающих трансфицируются для экспрессии и секреции вирусных антигенов, слитых со SpyTag и полигистидиновой меткой. Затем эти антигены очищают с помощью аффинной колонки никель-нитрилотриуксусной кислоты (Ni-NTA). Очищенный антиген смешивают с везикулами внешней мембраны, экспрессирующими поверхностно связанный белок SpyCatcher (SC). Множественные антигены ковалентно прикрепляются...

Это видео демонстрирует производство наноэмульсионных вакцин против опухолей. Стабильные нефтехранилища, несущие синтетические пептиды и адъюванты, производятся с помощью низкоэнергетической наноэмульсии, что открывает значительные перспективы для иммунотерапии опухолей.

Это видео демонстрирует интраназальную иммунизацию БЦЖ у мышей, активирующую как врожденные, так и адаптивные иммунные реакции, что приводит к развитию Т-клеток памяти, резидентных в легких, и эффекторных В-клеток, тем самым усиливая защиту от инфекций Mycobacterium.

В видео демонстрируется метод создания адаптированных к холоду рекомбинантных вирусов гриппа. Он включает в себя трансфекцию клеток человека двунаправленными плазмидами с последующей инкубацией при более низкой температуре для получения вирусов, пригодных для производства вакцин, характеризующихся сниженной репликацией в более теплых условиях.

Это видео демонстрирует метод создания полимерного пузыря или новой платформы на основе полипузыря, которая обеспечивает отложенное высвобождение всплеска. Полимеры на основе полиэстера используются для формирования полипузырьков со структурой ядро-оболочка, а в качестве груза могут использоваться небольшие молекулы и антигены.

Это видео демонстрирует анализ in vitro для изучения противораковых эффектов безклеточного супернатанта Lactobacillus (LCFS). При воздействии на сфероиды колоректального рака различных доз LCFS взаимодействие с бактериальными метаболитами в LCFS вызывает апоптоз в раковых клетках, нарушая структуру сфероида и приводя к гибели клеток дозозависимым образом.

Это видео демонстрирует метод создания мРНК-кандидата в вакцину с использованием полимерных наночастиц. Катионный полимер взаимодействует с отрицательно заряженной мРНК, образуя полиплексы. Образование полиплексов стабилизирует мРНК, что делает ее потенциальным кандидатом для будущих мРНК-вакцин в иммунотерапевтических приложениях.

Это видео демонстрирует очистку самоорганизующихся белковых наночастиц или SAPN, помеченных гистидином, с помощью аффинной жидкостной хроматографии. Полученные очищенные фракции SAPN пригодны для разработки вакцин и имеют перспективы для потенциального иммунотерапевтического применения.

Видео демонстрирует технику введения терапевтических препаратов в слюнные железы пациента под контролем ультразвука.

Видео демонстрирует технику загрузки антигенов на Mycobacterium bovis BCG для улучшения ее иммуногенных свойств. Метод использует систему авидин-биотин для покрытия бактериальной поверхности экзогенными антигенами.

Видео демонстрирует анализ in vitro для скрининга интерферонов с противовирусной активностью против вируса Зика, патогена человека. Внутри клетки-хозяина вирус Зика размножается при интернализации, заражая соседние клетки и создавая отдельные зоны или вирусные бляшки. Интерферон I типа, действуя как противовирусное средство, препятствует размножению вируса, тем самым препятствуя образованию вирусных бляшек в монослое клетки-хозяина.

Это видео демонстрирует анализ для иммунизации модели мыши живыми аттенуированными спорозоитами. Ослабленные радиацией спорозоиты Plasmodium вводятся в дорсальную сторону уха мыши. После инъекций в несколько мест на обоих ушах мышь может восстановиться.