Фаготерапия против инфекции, вызванной Pseudomonas aeruginosa, у эмбрионов рыбок данио

Аннотация

Источник: Cafora, M., et al., A. Применение фаговой терапии для противодействия инфекции Pseudomonas aeruginosa у эмбрионов рыбок данио-рерио. J. Vis. Exp. (2020)

Видео демонстрирует метод фаговой терапии, нацеленный на инфекцию Pseudomonas aeruginosa у эмбрионов рыбок данио-рерио с муковисцидозом. Фаготерапия эффективно снижает бактериальную нагрузку и смягчает провоспалительные иммунные реакции у эмбрионов рыбок данио-рерио, инфицированных бактериями, что приводит к снижению летальности эмбрионов муковисцидоза.

Протокол

1. Микроинъекция эмбрионов рыбок данио с бактериями и фаговым коктейлем

ПРИМЕЧАНИЕ: Для проведения системной инфекции у эмбриона должно быть кровообращение, которое обычно начинается после 26 hpf.

1. После 26 hpf дехорионатные эмбрионы раствором проназы готовят путем растворения порошка проназы в среде Е3 в концентрации 2 мг/мл. Аккуратно пипеткой зародыши разбить хорион. Выбросьте проназу / Е3 и несколько раз промойте посуду свежим Е3, чтобы удалить всю проназу.
2. Обезболите эмбрионы данио-рерио в среде Е3, содержащей трикаин, примерно за 5 минут до инъекций.
3. Введите пипеткой обе....

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье

Имя	Компания	Каталожный номер	Комментарии
Бакто-агар	БД	No 214010
Фоспатированный буферный солевой раствор Дульбекко PBS	Сигма-Олдрич	Д8537
Этил3-аминобензоат метансульфонат	Сигма-Олдрич	886-86-2	Общее название трикаин
Микроманипулятор Femtojet	Эппендорф	No 5247
Иглы для микроинъекций	Гарвардский аппарат
N-фенилтиомочевина >=98%	Олдрич-П7629	Тел.: 103-85-5
Проназа	Сигма-Олдрич	9036-06-0
Z-MOLDS Микровпрыск	Прецизионные приборы Word