Method Article

Выделение нескольких типов клеток из мозга мыши путем механической гомогенизации

July 8th, 2025

In This Article

Abstract

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Источник: Molina Estevez, F. J., et al. Одновременная проточная цитометрическая характеристика нескольких типов клеток, полученных из головного/спинного мозга мышей с помощью различных методов гомогенизации. J. Vis. Exp. (2019).

Это видео демонстрирует выделение нескольких типов клеток из ткани мозга мыши. Сначала ткань механически срезается с помощью измельчителя тканей в солевом растворе для поддержания осмотического баланса. Затем тканевый гомогенат подвергают центрифугированию с градиентом плотности для удаления клеточного мусора. Затем клетки ресуспендируются в растворе для дальнейшего анализа.

Protocol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Дисклеймер: Все процедуры, связанные со сбором образцов, были выполнены в соответствии с рекомендациями института IRB.

1. Механическая гомогенизация головного и спинного мозга

ПРИМЕЧАНИЕ: Объемы, описанные в этом разделе, достаточны для гомогенизации половины головного или спинного мозга.

  1. Предварительно охладите стеклянный раствор тканевого измельчителя Dounce (Table of Materials) на льду.
  2. Добавьте в раствор 3 мл предварительно охлажденного 1x сбалансированного раствора соли Хэнка (HBSS).
  3. Перенесите ткань (головно....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Конфликт интересов не декларируется.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
10X HBSS (без кальция, хлорида магния и сульфата магния)Gibco14185-052
Сетчатый фильтр 70 ммКорнинг431751
Конические пробирки (15 мл)СеллТрит229411
Конические пробирки (50 мл)СеллТрит229422
Набор шлифовальных машин Dounce Tissue (включает в себя ступку, а также пестики A и B)Сигма-ОлдричД9063-1СЕТ
ПерколлGE Healthcare10266569Продается как нестерильный реагент
Перколлсигма65455529стерильный реагент (для использования в приложениях, требующих стерильности)
Перколл ПЛЮСсигмаГЭ17-5445-01реагент с очень низким содержанием эндотоксина

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Mouse Brain TissueMechanical HomogenizationTissue GrinderDensity Gradient CentrifugationCell IsolationFlow CytometryHBSS BufferDebris RemovalCell SuspensionFACS BL Solution

Related Articles