Методическая статья

Установка оптических окон в мозг трансгенных мышей для визуализации нейронной активности

1.2K просмотров

8 июля 2025 г.

В этой статье

Аннотация

Источник: Lin, X., et al. Визуализация нейронной активности в первичной соматосенсорной коре с использованием трансгенных мышей thy1-GCaMP6s. J. Vis. Exp. (2019).

Это видео демонстрирует запись нейронной активности мозга через оптическое окно у трансгенных мышей. Мыши экспрессируют флуоресцентный белок, который позволяет обнаруживать нейронную активность. Небольшая часть черепа осторожно удаляется для установки оптического окна, а затем череп покрывается черным цементом, чтобы блокировать свет перед визуализацией.

Протокол

Все процедуры, связанные с животными, были проверены местным институциональным комитетом по уходу за животными и ветеринарным наблюдательным советом JoVE.

1. Подготовка животного к визуализации

  1. Поместите в операционную область стерильную марлю, ватные палочки и автоклавные хирургические инструменты. Включите стерилизатор микрошариков для межоперационной стерилизации хирургических инструментов.
  2. Обезболивание мышей (самцов или самок, 1,5–2,5 месяца, 20–25 г) путем внутрибрюшинного введения (в/в) смеси кетамина (17,2 мг/мл), ксилазина (0,475 мг/мл) и ацепромазина (0,238 мг/мл) (6 мкл/г массы тела). Подожд....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

figure-results-1
Рисунок 1. Создание двусторонних окон на черепе. (А) На фотографическом изображении видны 2 краниальных оптических окна с каждой стороны черепа, расположенные над областью S1. (B) Большое увеличение прямоугольной области изображения (A), показывающей двусторонние оптические окна, обнажающие нижележащую твердую мозговую оболочку и кровеносные сосуды. Масштабная линейка = 680 мкм. (C) Обнаженный череп........

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Конфликт интересов не декларируется.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
C57BL/6J-Tg(Thy1-GCaMP6s)GP4.3Dkim/JджэксонNo 24275Могут быть любые штаммы, продуцируемые генетически кодируемым нейронным индикатором и эффектором, экспрессирующим зеленый флуоресцентный индикатор кальция, GCaMP, в подмножествах возбуждающих нейронов в коре головного мозга.
В6. Cg-Tg(Thy1-EGFP)OJrs/GfngJ.джэксон7919Могут быть любые штаммы, экспрессирующие EGFP в подмножествах нейронов в определенных популяциях коры головного мозга, обеспечивая яркое, жизнеспособное окрашивание по методу Гольджи.
Щипцы Dumont No5, стандартные, DumoxelИнструменты для точной науки11251-30Может быть любой бренд по выбору.
Щипцы Dumont No 5SFИнструменты для точной науки11252-00Может быть любой бренд по выбору.
Стерилизатор микрошариковЮжная лабораторная посудаВ1201Может быть любой бренд по выбору.
Адаптер для удержания головы Harishige SG-4NИсследования TritechСГ-4НМожет быть любой бренд по выбору.
Полный набор идеальных микродрелейГарвардский аппарат72-6065 (АнглийскийМожет быть любой бренд по выбору.
Заусенцы для микродрелиИнструменты для точной науки19007-05Может быть любой бренд по выбору.
Круглое защитное стекло, 3 ммГарвардские биологические наукиW4 64-0720Может быть любой бренд по выбору.
Круглое защитное стекло, 5 ммГарвардские биологические наукиW4 64-0700Может быть любой бренд по выбору.
Оптический клей NorlandПродукты Norland7106Может быть любой бренд по выбору.
Жидкий суперклей LoctiteВ.Б. МейсонLOC1647358Может быть любой бренд по выбору.
Набор цемента Grip, порошок и растворительДентспли675570 (АнглийскийМожет быть любой бренд по выбору. Смешайте 5 частей белого порошка стоматологического цемента (Grip Cement) с одной частью черной темперной порошковой краски (для защиты от света; некоторые пользователи предпочитают соотношение 10:1).
Гелевая пенаМур Медикал2928Может быть любой бренд по выбору.
Микроножницы для препарированияРобозРС-5841Может быть любой бренд по выбору.
Искусственная спинномозговая жидкость (АЧС)- T- TACSF содержит 125 мМ NaCl, 4,5 мМ KCl, 26 мМ NaHCO3, 1,25 мМ NaH2PO4, 2 мМ CaCl2, 1 мМ MgCl2 и 20 мМ глюкозы. Наполните ACSF кислородом (95% кислорода, 5% углекислого газа) и отрегулируйте pH до 7,4. Готовьте свежий раствор ACSF перед каждым экспериментом.
) гг. ) г.

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE

Запросить разрешение

Теги

Thy1 GCaMP6s

Похожие статьи