$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Все процедуры, связанные с животными, были проверены местным институциональным комитетом по уходу за животными и ветеринарным наблюдательным советом JoVE.
1. Запись слухового ответа ствола мозга (ABR)
- Обезболивайте крыс Sprague Dawley (SD) (щенки в возрасте от 1 до 14 дней и взрослые особи в возрасте 2 месяцев, обоих полов) однократной инъекцией 1,5% пентобарбитала натрия (22 мг/кг для щенков и 30 мг/кг для взрослых особей, внутрибрюшинно (внутривенно).
- Поместите животное под наркозом в форму из вспененного полиэтилена, чтобы обездвижить тело животного. Поместите животное на антивибрационный стол в комнате с шумоизоляцией. Поддерживайте температуру тела животного на уровне 37,5 °C с помощью грелки.
- Протрите область головы 70% (об/об.) этанолом. С помощью тонких ножниц сделайте разрез 1-2 мм вентролатерально к наружной ушной раковине, чтобы разместить электрод сравнения или заземление. Субдермальный игольчатый электрод (записывающий электрод) расположен над вершиной черепа (рис. 1А).
- С помощью генератора функций сгенерировать откалиброванные тональные всплески (нарастание/спад 1 мс, плато 3 мс) различных частот (2, 4, 8, 16, 24 и 32 кГц) и интенсивностей (снижен с 85 до 10 дБ SPL с шагом 5 дБ). Изменяйте частоту и амплитуду вручную или с помощью компьютера. Подавайте звуковые стимулы через электростатический динамик, расположенный на расстоянии 10 см от головы животного.
- Фильтруйте (100-1000 Гц), усиливайте и усредняйте (в 256 раз) потенциал звука с помощью многофункционального процессора для получения ABR. Трассировки ABR отслеживаются в режиме онлайн и сохраняются для анализа в автономном режиме. Для завершения записи ABR от одного животного требуется около 40 минут.
заметка: Как правило, можно идентифицировать от трех до семи пиков (от волны I до волны VII) с задержками менее 15 мс (рисунок 1B). Порог ABR определяется как минимальный уровень звука, при котором могут быть обнаружены волны I и II.
- Усыпляют до того, как животные проснутся от анестезии (с внутрибрюшинным введением 0,3 мл 1,5% натрия пентобарбитала).
