Методическая статья

Одновременная электроэнцефалографическая регистрация и регистрация потенциала локального поля у крысы под наркозом

8 июля 2025 г.

В этой статье

Аннотация

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Источник: Kang, S., et al. Одновременная запись колокализованной электроэнцефалографии и потенциала локального поля у грызунов. J. Vis. Exp. (2017).

Это видео демонстрирует процедуру одновременной записи ко-локализованной электроэнцефалографии (ЭЭГ) и потенциалов локального поля (LFP) у крысы под наркозом. Процесс включает в себя подготовку крысы и прикрепление стимулирующих электродов к ее подушечкам усов. Электрод для ЭЭГ-паука помещается на череп крысы для поверхностных измерений ЭЭГ. В то же время многоканальный микроэлектрод вводится в определенную область мозга через отверстие в черепе для записи нейронной активности из локализованной области мозга.

Протокол

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Все процедуры, связанные с животными, были проверены местным институциональным комитетом по уходу за животными и ветеринарным наблюдательным советом JoVE.

1. Ко-локализованная настройка ЭЭГ/ЛФП

  1. Очистите и высушите череп вокруг отверстия от заусенца с помощью ватного тампона.
  2. Осторожно поместите проводящую пасту ЭЭГ на одну плоскую сторону электрода ЭЭГ-паука. Оставьте небольшое отверстие свободным от пасты ЭЭГ на пауке-электроде, чтобы многослойный микроэлектрод мог пройти через отверстие, не соприкасаясь с пастой и пауком-электродом. Это предотвращает электрический контакт между электродом ЭЭГ и микроэлектродом.
  3. Выровняйте паук-электрод по отверстию заусенца в черепе так, чтобы паста ЭЭГ была направлена на череп.
  4. Осторожно прижмите паукообразный электрод к черепу, плотно соприкасаясь с черепом с помощью пасты ЭЭГ. Удалите пасту, скрывающую отверстие от заусенца, с помощью иглы на шприце.
  5. Удалите излишки пасты ЭЭГ за пределами периферии паука-электрода так, чтобы контакт между пауком-электродом и черепом был пространственно ограничен размером электрода (Рисунок 1B).
  6. Нанесите пасту ЭЭГ на электрод сравнения для ЭЭГ и надежно поместите ее внутрь разреза на задней части шеи крысы.
  7. Подключите электроды ЭЭГ к предусилителю через пассивный делитель сигнала для сигналов с низким импедансом (рис. 2). Убедитесь, что импеданс паука-электрода не превышает 5 кОм. Если это не так, убедитесь, что паста для ЭЭГ находится в хорошем контакте с черепом, а электрод плотно прижат к пасте для ЭЭГ. При необходимости добавьте еще ЭЭГ-пасты.
  8. Установите руку микроманипулятора на стереотаксическую раму. Подсоедините линейный 16-канальный микроэлектрод (шаг 100 мкм, площадь каждого участка 177мкм2) к 16-канальному острому столу, надежно закрепленному на манипуляторе микроманипулятора.
  9. Нанесите пасту для ЭЭГ на электроды сравнения для ЭЭГ и микроэлектрод, затем надежно поместите их внутрь разреза (рисунок 1A).
  10. Отрегулируйте угол наклона руки микроманипулятора так, чтобы микроэлектрод был перпендикулярен поверхности коры головного мозга. В норме этот угол находится в пределах 25-35°.
  11. Опустите микроэлектрод под микроскоп, повернув ручки микроманипулятора так, чтобы кончик микроэлектрода был направлен на крошечное отверстие в нижней части отверстия для заусенцев до тех пор, пока самый верхний электрод не проникнет в кортикальную поверхность. Необходимо соблюдать осторожность, чтобы не надавить микроэлектрод на поверхность твердой мозговой оболочки, так как это может привести к поломке электрода.
  12. Подключите 16-канальный микроэлектрод к предусилителю, подключенному к блоку сбора данных с помощью оптоволоконного кабеля (рис. 2).
  13. Включите предусилитель, блок сбора данных и подключенный к нему компьютер. Включите блок стимулятора.
  14. Вставьте микроэлектрод в кортикальную поверхность в норме, медленно поворачивая ручку оси Z микроманипулятора на глубину 1 500 мкм.
  15. Отрегулируйте глубину на микроуровне, подав цепочку стимулов на подушечку усов и наблюдая за 16-канальной вызванной LFP на мониторе ПК с помощью программного обеспечения блока сбора данных, установленного на ПК. Осторожно поворачивайте ручку оси Z на микроманипуляторе до тех пор, пока наибольшая амплитуда вызываемого LFP не произойдет вокруг канала 7 (так как он совпадает со слоем IV в коре головного мозга).
    заметка: Установка ипси-латерального электрода ЭЭГ: Для некоторых экспериментов второй паук-электрод был размещен на ипси-латеральной стороне интактного черепа над корой ствола. Эта установка позволила провести двустороннюю запись ЭЭГ в состоянии покоя для исследования влияния отверстия заусенца на сигнал ЭЭГ><. заметка: Хирургическая процедура установки электрода ЭЭГ идентична описанной выше, за исключением того, что височная мышца с каждой стороны головы была тщательно отделена от черепа, зашита и надежно привязана к соответствующей стороне стереотаксической рамы><. заметка: Одновременная установка ЭЭГ/ЛФП также идентична описанной выше, с дополнительным этапом, когда второй паук-электрод нагружается пастой ЭЭГ, а затем плотно прижимается к черепу над ипси-латеральной корой ствола.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

figure-results-1
Рисунок 1: Общая настройка для одновременной записи ЭЭГ/LFP. (А) Установка состоит из модифицированного носового конуса для облегчения стимуляции подушечки усов под анестезией изофлураном, двух стимулирующих электродов, вставленных в подушечку усов, электрода-паука, расположенного на черепе над корой головного мозга напротив стимулирующих электродов, многоканального микроэлектрода, в...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Конфликт интересов не декларируется.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Самки крыс Lister HoodЧарльз Риверс
Паук-электродООО «Унимед Электрод ПоставкаСКС24-426
Паста для ЭЭГ: Ten20ООО «Унимед Электрод Поставка10-20-С
Стереотаксический держатель с двойными рычагами микроманипулятора: Dual Manipulator Stereotaxic Frame с ушными планками под углом 18°WPI (Мировые прецизионные приборы)502603
Стимулирующие электроды из нержавеющей сталиПластиксОдинE363/1/SPC
Изолированный стимулятор токаСделано на собственном предприятии
16-канальный микроэлектрод, шаг 100 мкм, площадь каждого участка 177 м2НейроНексусА1х16-10мм-100-177-А16
16-канальный острый сценарийТакер Дэвид Текнолоджис Инк., ТДТРА16AC-Z
Предусилитель: 64-канальный нейрооцифровывающий предусилитель серии ZТДТПЗ5-64
Пассивный разветвитель сигнала: 32-канальный разветвитель для PZ5ТДТС-BOX_PZ5
Блок сбора данных: процессор RZ2 BioAmp. Сверхвысокопроизводительный процессор Z-Series 4-DSPТДТРЗ2-4
Изофлуран Нэшнл Вет Сервисез Лимитед No 50878
Обезболивающая система изофлурана для мелких животныхВПИ EZ-B800A
Термостатическая грелка: Rat Blanket System 230ВГарвардский аппарат, Великобритания 50-7221-Ф
Офтальмологическая мазь: Optixcare eye lubeВиовет 203865
Клетка Фарадея Корпорация Ньюпорт ВИС-ФДК-3600
Виброизолирующая рабочая станция: Vision IsoStationКорпорация Ньюпорт М-VIS3660-РГ4-325А
Блок управления оксиметром и датчик:
MouseOxPlus, Starr Life Sciences
Corp.		ВПИ О15001
Прозрачный мягкий носовой конус: аппарат без дыхания Microflex с крысиным носекономВПИ ЭЗ-103А
» »

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE

Запросить разрешение

Теги

ElectroencephalographyConcurrent RecordingStereotaxic FrameBurr HoleMicroelectrode InsertionEEG Spider ElectrodeWhisker Pad StimulationData Acquisition

Похожие статьи