Электрофизиологическая регистрация афферентных нервов толстой кишки в толстой кишке крысы ex vivo

Аннотация

Источник: Meng, Y. et al., Характеристика in vitro электрофизиологических свойств афферентных волокон толстой кишки у крыс. J. Vis. Exp. (2017)

Это видео демонстрирует метод записи активности афферентных нервов толстой кишки в толстой кишке крысы ex-vivo, канюлированной с обоих концов и влитой в физиологический раствор для повышения внутрипросветного давления. По мере повышения давления нервный сигнал повышается, свидетельствуя о его стимуляции.

Протокол

Все процедуры, связанные с животными, были проверены местным институциональным комитетом по уходу за животными и ветеринарным наблюдательным советом JoVE.

1. Приготовление перфузионного раствора и тестовых соединений

1. Приготовьте 5 л раствора Кребса: 113 мМ натрия хлорида, NaCl, 5,9 мМ хлорида калия, KCl, 1,2 мМ дигидрофосфата натрия,₂PO₄, 1,2 мМ сульфата магния, MgSO₄, 25 мМ гидрокарбоната натрия, NaHCO₃, 1,2 мМ кальция хлорида, CaCl₂ и 11,5 мМ глюкозы. Насытите раствор газовой смесью 95%_О2 + 5%_СО2. Предварительно охладите ~500 мл насы....

Результаты

Рисунок 1. Электрофизиологическая регистрация афферентных нервов толстой кишки крыс in vitro. A. Схематическая иллюстрация препарата толстой кишки ex vivo для «трубки» крысы. Толстая кишка с прикрепленным PG переплавляется в записывающей камере и канюлируется с обоих концов. Внутрипросветная инфузия достигается с помощью шприцевого насоса и перемещается в пероральном направлении. Ра.......

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье

Имя	Компания	Каталожный номер	Комментарии
Пентобарбитал натрия	Шанхай Вестанг Био-Тек	В558
Капсаицин	сигма	М2028
Съемник электродов	МикроДата Инструмент, Инк	ПМП107
Система «Невролог» (биоусилитель)	Диджитимер, ООО	Система «Невролог»
Аналого-цифровой преобразователь	Кембриджский электронный дизайн	Микро1401
Программное обеспечение для обработки данных	Кембриджский электронный дизайн	Spike2 версия 6
Серебряная проволока	Мировые прецизионные приборы	ЭП12
Стеклянные трубки	Мировые прецизионные приборы	1В150-4
Держатель электродов	Мировые прецизионные приборы	MEH3SBW
Нагревательная баня	грант	ГР150
Препарирующий микроскоп	Лейка	Зум2000
Препарирующий микроскоп	Мировые прецизионные приборы	ПЗМIII-БС
прикуриватель	любой	NA
Хирургические инструменты	Мировые прецизионные приборы	NA
Булавки от насекомых	Самодельный из проволоки из нержавеющей стали толщиной 0,1 мм	NA
Трехсторонний манипулятор	Мировые прецизионные приборы	КИТФ-Р
Крыс	любой	NA	Можно использовать любой сорт/пол.