Мониторинг коры головного мозга с помощью многоэлектродной матрицы в ответ на агенты, вызывающие судороги

Abstract

Источник: Lu, H. C., et al. Стимуляция постоянным током и запись с помощью многоэлектродной матрицы судорожной активности при приготовлении среза мозга мышей. J. Vis. Exp. (2016).

В этом видео исследуются эффекты транскраниальной стимуляции постоянным током (tDCS) на срезы мозга, содержащие переднюю поясную кору (ACC) и области таламуса, с использованием многоэлектродной матрицы (MEA) для измерения электрических сигналов. Путем подачи электрических импульсов и введения препаратов, вызывающих судороги, в исследовании изучается реакция ACC на припадки.

Protocol

Все процедуры, связанные с образцами животных, были рассмотрены и одобрены соответствующим комитетом по этической экспертизе животных.

1. Подготовка экспериментального раствора и оборудования для регистрации МЭА (многоэлектродной матрицы)

1. Готовят искусственную спинномозговую жидкость (aCSF; 124 мМ NaCl, 4,4 мМ KCl, 1 мМ₂PO₃, 2 мМ MgSO₄, 2 мМ CaCl₂, 25 мМ NaHCO₃ и 10 мМ глюкозы, пузырчатой с 95%_O2 и 5%_CO2).
2. Используйте два типа преобразователей MEA: 6 x 10 планарных MEA и 8 x 8 MEA. Первый зонд охватывает область, которая включ....

Results

Рисунок 1: Подготовка среза таламоцингулата и настройка системы регистрации МЭА. (a) Процедура среза MT-ACC, (a) Удалить мозг и (b) перевести в прохладный, насыщенный кислородом aCSF. (в) Сделайте два парасагиттальных разреза от средней линии. (d) Вид сбоку на медиальную часть мозгового блока. (e) Сделайте два наклонных вентральных разреза мозгового блока. (f) Приклейте мозговой блок на пластиковую п.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Изофлуран	Корпорация Halocarbon Products	НДЦ 12164-002-25	4%
aCSF (всего:1 л):
D(+)-глюкоза	Мерк	1.08337.1000	10 мМ
Гидрокарбонат натрия	Мерк	1.06329.0500	25 мМ
Хлорид натрия	Мерк	1.06404.1000	124 мМ
(+)-L-аскорбат натрия, >=98%	сигма	А4034-100Г	0,15 г/2 с·
Магния сульфат, безводный, РеагентПлюс	сигма	М7506-500Г	2 мМ
Дигидрат хлорида кальция	Мерк	1.02382.1000	2 мМ
Натрия дигидрофосфата моногидрат	Мерк	1.06346.1000	1 мМ
Хлористый калий	Мэй & Бейкер ЛТД, Дагенхэм, Англия	МС 7616	4,4 мМ
(+)-Бикукуллин	ТОКРИС	130	5 мкМ в КСФ
4-Аминопиридин	ТОКРИС	940	250 мкМ в ХКБ
Вибратом	Вибратом	Серия 1000	Нарезка блоков на ломтики толщиной 500 μм
Многоэлектродные преобразователи (MEA): 6 x 10 планарных MEA	Многоканальные системы	60MEA500/30iR-Ti-pr MEAS 6x10	диаметр электрода, 30 μм; расстояние между электродами, 500 μм; импеданс, 50 кОм при 200 Гц
Многоэлектродные преобразователи (MEA): 8 x 8 MEA	Аянда Биосистемы	60MEA200/10iR-Ti-pr MEAS 8x8	электрод пирамидальной формы, диаметр 40 мкм, высота кончика 50 мкм, расстояние между электродами 200 мкм, импеданс 1000 кОм при 200 Гц
Использовался 60-канальный усилитель с полосовым фильтром, установленным в диапазоне частот от 0,1 Гц до 3 кГц при 1200-кратном усилении	Многоканальные системы	MEA-1060-BC
Программное обеспечение MC Rack с частотой дискретизации 10 кГц	Многоканальные системы		Программное обеспечение для сбора и записи данных
управление генератором импульсов	Многоканальные системы	СТГ 1002
Комплекты срезных анкеров и прижимные приспособления	Уорнер Инструментс	ШД-26Н/10; ВИ64-0250
Перистальтический насос-минипульс3	Гилсом	MINIPULS3	Скорость перфузии: 8 мл/мин
Изолированный стимулятор	Системы А-М	Модель 2100	интенсивность ±350 μА , продолжительность 200 μсек
Вольфрамовый электрод	Системы А-М	575300	Помещено в таламус