Синаптическая модуляция у дрозофил после длительного воздействия света

Аннотация

Источник: Sugie, A., et al. Анализ синаптической модуляции фоторецепторов Drosophila melanogaster после воздействия длительного света. J. Vis. Exp. (120)

Это видео демонстрирует выращивание Drosophila melanogaster в определенных условиях освещения для изучения роли белков Bruchpilot в высвобождении нейротрансмиттеров и результирующей модуляции синаптической активности.

Протокол

1. Условия воздействия света

1. Начиная со стадии личинки и до ее выведения, держите мух в темном цикле 12 часов/12 часов при температуре 25 °C (Рисунок 1A).
2. Соберите мух через 0 - 6 ч после высадки и поместите их в новый флакон с кормом для мух.
3. Установите флаконы в прозрачную решетку из акриловой смолы с тремя ступенями (высота 41 см, основание 21 см, толщина 4 см и высота 13 см для каждой ступени) (рисунок 1B).
4. Отрегулируйте расстояние между стойкой и светодиодной панелью, чтобы обеспечить освещение со средней интенсивностью 1 000 люкс с помощью цифрового экспонометра (рис. 1C).
5. Держите мух в течение 1 - 3 дней в одном из следующих условий: постоянная темнота (DD), 12 часов света/12 часов темнового цикла (LD) или постоянный свет (LL) при 25 °C в небольшом инкубаторе (рисунки 1A и 1C).

Результаты

Рисунок 1: Подготовка условий для воздействия с определенной интенсивностью света. (А) Протоколы воздействия света после эксклюзии. DD, непрерывная темнота; LD, 12 ч светло/12 ч темно; LL, постоянное воздействие света. Мозг мухи был препарирован в время, указанное в скобках (адаптировано из предыдущей публикации9). (B) Флаконы выровнены в специальном акриловом прозрачном штативе. (C) Акриловый стелла...

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье

Имя	Компания	Каталожный номер	Комментарии
флакон	Хайтек, Япония	МКС-20
затычка	Thermo Fisher Sciehtific, США	АС-275
Кастомизированный прозрачный стеллаж из акриловой смолы	Корпорация Shin-Shin, Япония		высота 41 см, основание 21 см, толщина 4 см и высота 13 см для каждой ступени
Крутой инкубатор	MITSUBISHI ELECTRIC, Япония	CN-40A
Светодиодная панель	MISUMI, Япония	LEDXC170-W
Цифровой экспонометр	ЦЕМ	ДТ-1301
Накладка на флайбридж	Токкен, Япония	ТК-ХА03-С