Методическая статья

Оценка влияния токсинов на развитие нейронной сети куриного эмбриона с использованием многоэлектродных матриц

8 июля 2025 г.

В этой статье

Аннотация

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Источник: Sanchez, K. R., et.al. Оценка влияния соединений, разрушающих эндокринную систему, на развитие функции нейронной сети позвоночных с использованием многоэлектродных матриц. J. vis. Exp. (2018).

Это видео демонстрирует использование многоэлектродных матриц (MEA) для изучения влияния токсинов на ранние эмбриональные культуры нейронов цыплят. Отслеживая синхронную активность нейронов в нейронной сети, MEA фиксирует функциональную динамику нейронной сети в ответ на воздействие токсина. Снижение синхронности и частоты срабатывания при воздействии токсина подчеркивает его пагубное влияние на созревание и функционирование нейронной сети.

Протокол

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. Запись активности нейронной сети

  1. В день приобретения замените питательную среду на свежую нейробазальную среду и верните МЭА в инкубатор CO2 минимум на 2 часа до регистрации. Запустите программное обеспечение для записи и установите температуру MEA на 37 °C, нажав на значок температуры.
    заметка: Запись может начаться уже на 3-й день нанесения покрытия и продолжаться до тех пор, пока культуры живы.
  2. Настройте параметры сбора, щелкнув правой кнопкой мыши по значку "Muse" (в разделе "Потоки" на левой панели окна) и выбрав "Добавить обработку" и "Детектор шипов", а затем нажмите "OK" во всплывающем окне. Под именем файла появится надпись "Spike Detector (6 x STD)".
  3. Затем щелкните правой кнопкой мыши по детектору всплесков, выберите "Добавить обработку" и "Детектор всплесков" и нажмите OK во всплывающем окне. Под значком Muse появится надпись "Burst Detector" (ISI).
  4. Затем щелкните правой кнопкой мыши по Детектору всплесков, выберите «Добавить обработку» и «Компилятор нейронной статистики». Во всплывающем окне убедитесь, что выбраны «Заголовок файла», «Агрегированная статистика скважины» и «Синхронность». Нажмите OK. Ниже появится надпись "Компилятор статистики".
    заметка: Это установит адаптивное пересечение порога (6-кратный фильтр STD), интервал между спайками на уровне 100 мс с минимальным числом спайков на уровне 5, среднюю скорость обнаружения срабатывания на уровне 10 с параметром синхронности на уровне 20 мс и минимальную скорость спайков на уровне 0,083333 пиков в минуту.
  5. Настройте запланированную запись на время записи 5 минут (300 000 мс), нажав на значок часов внизу. Это достигается за счет изменения информации в разделе настроек на запись каждые 5,1 минуты и запись в течение 5 минут. Это будет запущено немедленно и выполнено один раз.
  6. Перед перемещением MEA убедитесь, что температура MEA достигла 37 °C. Извлеките MEA из инкубатора, поместите его на записывающее устройство и заблокируйте MEA. Начните запись сетевой активности, нажав на кнопку начала записи в разделе запланированной записи или на иконку записи в окне «Воспроизведение файла». Как правило, достаточно времени записи в 5 минут (300 000 мс), хотя могут быть получены более длительные записи до 10 минут.
  7. После записи верните MEA в инкубатор.
    заметка: Необходимо позаботиться о поддержании стерильности и свести к минимуму время, в течение которого МЭА находится вне инкубатора.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Конфликт интересов не декларируется.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Аксион, Муза MEAАксион, БиосистемыМ64-ГЛ1-30Пт200В рукописи будет называться MEA system
Программное обеспечение AxisАксион, БиосистемыВ рукописи будет называться программа для записи
Бисфенол АСигма-Олдрич239658-250г
ЭтиленоксидСигма-ОлдричРежим 64-17-5
Нейробазальная средаBrainBitsНБ4-500
Статистическое программное обеспечение NeuroexplorerТехнологии NexНейроэксплорер версия 5

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE

Запросить разрешение

Теги

Похожие статьи