Методическая статья

Intravitreous для закачки Создание глазных болезней Модель

37.4K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/313

⸱

1 октября 2007 г.

 ,  , 
1The University of Hong Kong - HKU

В этой статье

Краткое содержание

Intravitreous инъекции широко используемый метод в исследовании визуального наук для глазных болезней или в виде прямого применения местного лечения. Это видео показали протокол для intravitreous инъекций применяют 1 мл шприца со стеклянной пипетки. Полезные советы об уходе от массивного кровотечения и повреждения линзы заданы.

Аннотация

Intravitreous инъекции широко используемый метод в исследовании визуального наук. Он может быть использован для создания моделей на животных с глазных болезней или прямого применения местного лечения. Это видео представляет, как использовать простые и недорогие инструменты для отделки intravitreous процедуры инъекции. Использование 1 мл шприца, вместо шприца Хэмилтон, используется. Практические советы о том, как внести соответствующие игл инъекции с использованием стеклянных пипеток с совершенным советы, и как легко подключить иглу шприца со стеклянной пипетки плотно вместе, приведены.

Провести хорошее инъекции intravitreous, Есть три аспекта, которые необходимо соблюдать: 1) инъекции не должна нарушать структуру сетчатки, 2) кровотечения следует избегать, чтобы уменьшить риск заражения, 3) объектив должен быть нетронутым, чтобы избежать травматической катаракты. Короче говоря, самый важный момент состоит в сокращении прерывания нормального строения глазного яблока. Чтобы избежать остановки работы сетчатки, начальник носовой области крысы глаз был выбран. Кроме того, прокол точку игла по номинальной плоской, что составило около 1,5 мм от лимба области крысы глаз. Небольшое количество стекловидного мягко выталкивается через отверстие прокола снизить внутриглазное давление до инъекции. С углом 45 инъекций °, это менее вероятно, вызовет травматический катаракты у крыс глаз, что позволяет избежать осложнений и влияния факторов линзовидные. В этой операции, не было резки мышц конъюнктивы и глаз, без кровотечения. С быстрым и легким травмам, успешное введение intravitreous может быть сделано за считанные минуты.

Инъекции, описываемых в данном протоколе является специфическим для intravitreous инъекции. Тем не менее, методы и материалы, представленные здесь, могут также использоваться для других процедур, инъекций для доставки лекарств в мозг, спинной мозг или другие органы, в небольших млекопитающих.

Протокол

  1. Подготовка стеклянной пипетки использованием пипетки съемник, подключите его к 1 мл шприц, и печатью связи с парафильмом. Вывод 2 мл раствора в кончике пипетки и получить готовый для инъекции.
  2. Анестезировать крыс внутри-перитонеального инъекции кетамина (80mg/kg) и ксилазина (8mg/kg) (объемное соотношение 2:1).
  3. Применяют по одной капле 0,5% alcaine для крыс глазах местных анестетиков перед intravitreous инъекции.
  4. Позиция крысы и выставить высший носовой области глаз.
  5. Используйте 30 иглой проколоть превосходной носовой склеры на уровне номинальной Плана. Старайтесь не прикасаться глазных мышц и сосудов.
  6. Дайте глазного яблока умеренное давление, чтобы избавиться от небольшого количества стекловидной через прокол отверстие с задней камеры.
  7. Вставьте кончик стеклянной пипетки через прокол отверстие под углом 45 ° через склеру в стекловидное тело. Inject 2 мл раствора в заднюю камеру и держать на месте в течение нескольких секунд, затем аккуратно удалить иглу. Старайтесь не касаться линзы и внутриглазного судов.
  8. После intravitreous инъекции, применять мазь офтальмологических Tobrex на крысу глаз, чтобы предотвратить инфекцию.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Хорошо инъекции intravitreous полезно для создания модели животных, а также прямые внутриглазного лечения. Во-первых, место инъекции не должна нарушать структуру сетчатки. Во-вторых, кровотечения следует избегать, чтобы уменьшить риск заражения. В-третьих, объектив должен быть нетронутым, чтобы избежать травматической катаракты. Самое главное заключается в снижении прерывания нормального строения глазного яблока.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Животных были обработаны в соответствии с протоколом для использования животных в исследованиях одобрена Комитетом по использованию живых животных в области преподавания и исследований (CULATR) из университета Гонконга и Ассоциация научных исследований в области зрения и офтальмологии отчетность за Использование животных в офтальмологический и Vision Research.

Благодарности

Изучению глаукомы в этой лаборатории проводится при поддержке Национального Глаукома Исследования, проведенные американским фондом помощник здравоохранения.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Операционный микроскопOlympus CorporationOME
Стеклянные пипеткиWorld Precision Instruments, Inc.
ПипеткотягаDavid Kopf Instruments
Шприцы объемом 1mlодноразовые
Иглы 30Gодноразовые
КетаминAldasanанестетик
КсилазинAldasanанестетик
AlcaineAlcon0.5% гидрохлорид пропаракаина
TobrexAlconмазь, 3% тобрамицин

Ссылки

  1. Chiu, K., Lam, T. T., Ying Ku, W. W., Caprioli, J., Kwong Kwong, J. M. Calpain and N-methyl-d-aspartate (NMDA)-induced excitotoxicity in rat retinas. Brain Research. 1046, 207-215 (2005).
  2. Fisher, D., Pavlidis, M., Thanos, S. Cataractogenic lens injury prevents traumatic ganglion cell death and promotes axonal regeneration both in vivo and in culture. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 41, 3943-3954 (2000).
  3. Ji, J. -Z., Elyaman, W., Yip, H. K., Lee, V. W. H., Yick, L. -W., Hugon, J., So, K. -F. CNTF promotes survival of retinal ganglion cells after induction of ocular hypertension in rats: the possible involvement of STAT3 pathway. European Journal of Neuroscience. 19, 265-272 (2004).
  4. Lam, T. T., Abler, A. S., Kwong, J. M. K., Tso, M. O. M. N-Methyl-D-Aspartate (NMDA)-Induced Apoptosis in Rat Retina. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 40, 2391-2397 (1999).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE

Запросить разрешение

Теги

145

Похожие статьи