Все процедуры, связанные с животными, были проверены местным институциональным комитетом по уходу за животными и ветеринарным наблюдательным советом JoVE.
1. Анестезия и подготовка
- Поместите животное в анестезиологическую камеру и введите общую анестезию с помощью 1,8% изофлурана и 0,9 л/мин кислорода.
- Подтвердите адекватный уровень анестезии путем оценки спонтанного дыхания и оценки сознания путем оценки реакции гримасы животного на щипок на пальце ноги.
- Наносите смазку для глаз с обеих сторон, чтобы предотвратить раздражение или сухость роговицы.
- Выбрейте операционное место (места) бритвой или автоматической машинкой для стрижки.
- Разработайте метод идентификации крыс в это время, либо с помощью ушной бирки, либо хвостовой этикетки/маркировки.
- Введите подкожную инъекцию 0,05 мг/кг бупренорфина вдоль спины животного для профилактики послеоперационных болей.
2. Хирургический подход и схемы травм
- Перенесите животное на операционный стол и продолжайте подачу газа через носовой обтекатель. Убедитесь, что под животным и стерильным полем расположена грелка для поддержания температуры его тела.
- Поместите стерилизованную марлю (свернутую и скрепленную лентой) на шею крысы для использования в качестве рулона для шеи; это усилит воздействие на операционное поле. Обратите внимание, что правильное положение животного имеет первостепенное значение для эффективной идентификации и вскрытия нерва.
- Подготовьте кожу лица животного к процедуре. Чтобы обеспечить дезинфекцию, трижды протрите место операции хлоргексидином или раствором на основе йода, чередуя его с 70% этанолом.
- При желании запланируйте и обозначьте хирургический разрез. Манипулируйте ипсилатеральным ухом в передне-заднем направлении, чтобы определить естественную складчатость постаурикулярной кожи.
- Сделайте разрез 4-5 мм в заушной складке с помощью острых ножниц радужной оболочки или лезвия No 15. При необходимости это может быть расширено позже в ходе процедуры.
- Тупо рассеките через непосредственную подкожную фасцию и установите микро-ретрактор Вейтланера для усиления воздействия. Учтите, что в этой области могут быть кровеносные сосуды малого калибра; Их лучше всего избежать, втягивая вверх или вниз с помощью втягивающего устройства Вейтланера.
- Определите переднюю двужелудочную мышцу, поскольку она движется в направлении от нижнего к верхнему к прикреплению вдоль основания черепа.
- Аккуратно распределите по мышечному животу вдоль точки его введения, чтобы открыть сухожилие передней части двужелудочного живота. Обратите внимание, что сухожилие выглядит как пленчатый белый отросток, исходящий из мышцы с твердым прикреплением к основанию черепа.
- После определения передней двужелудочной мышцы и ее сухожилия отрегулируйте ретрактор Вейтланера для дальнейшего втягивания мышечного живота. Обратите внимание, что область, которая впоследствии подвергается воздействию, является трехмерным пространством, в котором находится основной ствол лицевого нерва.
заметка: Эта область ограничена сверху и медиально основанием черепа, латерально передней двужелудочной мышцей, заднемедиально ушным каналом и снизу структурами шеи, включая поверхностную височную артерию.
- После адекватного воздействия определите основной ствол лицевого нерва, поскольку он проходит снизу из-под сухожилия двужелудочной мышцы, где он выходит из стиломастоидного отверстия от основания черепа. Обратите внимание, что нерв выглядит как жемчужно-белый шнур, заключенный в околоушно-жевательную фасцию животного. Соблюдайте осторожность при дальнейшем обнажении нерва по следующим причинам.
- Избегайте агрессивного рассечения или перпендикулярного распространения, чтобы защититься от травмы нейропраксии, опосредованной растяжением.
- Избегайте агрессивной задней и медиально направленной диссекции, чтобы предотвратить повреждение тонких тканей, лежащих над ушным каналом, так как это может привести к появлению флоры среднего уха в операционном поле.
- Избегайте повреждения поверхностной височной артерии с помощью широкой медиально и нижненаправленной диссекции. Обратите внимание, что травма будет определяться по быстрому, пульсирующему кровотечению.
- Если артерия повреждена, немедленно надавите на нее с помощью аппликатора с ватным наконечником или стерильной марли с помощью щипцов. Гемостатические средства или жидкий фибриновый герметик могут быть размещены в непосредственной близости. Имейте в виду, что животному может потребоваться подкожное введение 0,9% стерильного физиологического раствора для стабилизации жидкости.
- Проведите по основному стволу дистально, рассекая вдоль нерва в нижнем направлении, дистально от выхода шиломастоидного отверстия.
- Расширьте первоначальный разрез, чтобы полностью обнажить нерв и его ветви. Избегайте нарушения работы околоушной железы, так как это может привести к послеоперационному сиалоцеле.
- Вызывайте желаемые паттерны травм следующим образом.
- При раздавливающей травме используйте ювелирные щипцы с гладкой поверхностью, чтобы крепко захватить нерв и сжать его9. Оказывайте постоянное и воспроизводимое давление на нерв в течение 30 секунд, чтобы обеспечить соответствующую травму от раздавливания.
- Для простого пересечения захватите фасцию, лежащую над нервом, или непосредственный эпиневрий с помощью тонкозубчатых щипцов и с помощью острых микроножниц аккуратно пересеките нерв в нужной точке одним разрезом. Следите за тем, чтобы не допустить чрезмерного вытяжения нерва с помощью щипцов.
- Для модели нервной щели создайте желаемую нервную щель с помощью метода, аналогичного простой травме при пересечении. Используйте стерилизованный стерилизованный стержень аппликатора с ватным наконечником, отрезанный до нужной длины нервного зазора-интраоперационно, чтобы обеспечить схожесть характера травмы между животными.
3. Закрытие раны
- Орошите рану стерильным физиологическим раствором и обсушите стерильной марлей.
- Подогните края кожи простым подкожным способом с помощью рассасывающихся швов или используйте клей для кожи или зажимы для ран, которые также приемлемы для закрытия раны. Наложите заглубленный шов, взяв глубокий и поверхностный укус одного края кожи, а затем последующий поверхностный или глубокий укус противоположного края кожи.
