$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Все процедуры, связанные с животными, были проверены местным институциональным комитетом по уходу за животными и ветеринарным наблюдательным советом JoVE.
1. Материалы
- Приготовление инъекции ЛПС
- Добавьте 25 мл дистиллированной воды к 25 мг порошка ЛПС, полученного из Salmonella typhimurium, до конечной концентрации 1 мг/мл. Хранить инъекцию в стерильной пробирке при температуре 4 °C.
осторожность: ЛПС токсичен.
2. Животные
- Введение ЛПС самцам крыс Спрэг-Доули (SD) в возрасте 10 недель (средний вес: 280 ± 20 г) путем внутрибрюшинной инъекции.
осторожность: Если крысы приобретаются у другой организации, то адаптационная фаза не должна быть меньше 7 дней.
3. Впрыски LPS
- Внутрибрюшинно ввести ЛПС каждой крысе в дозе 1 мг/кг и вернуть крыс в их домашнюю клетку.
заметка: Анестезия не требуется.
- Через шесть часов введите крысам ту же дозу инъекции ЛПС.
- Через шестнадцать часов введите крысам ту же дозу ЛПС><.
осторожность: Введение крысам SD ЛПС в дозе 1 мг/кг может привести к 5% смертности. Уровень смертности может еще больше увеличиться у молодых или старых крыс или беременных самок крыс.
- Верните крыс в клетки после инъекции ЛПС и обеспечьте им свободный доступ к пище и питью.
заметка: У крыс будет проявляться отчетливая системная воспалительная реакция, и поэтому клетки должны оставаться чистыми на протяжении всего эксперимента. Крысы должны часто (2 раза в день) контролироваться на предмет веса, общего вида и поведения после первой инъекции ЛПС. Если у крыс начинает проявляться сгорбленная осанка, нежелание двигаться, значительная потеря веса (>20%) или окрашивание порфирином, их следует гуманно усыпить до 7-дневной конечной точки исследования.