Методическая статья

Cre-LoxP опосредованная индукция церебральных кавернозных мальформаций у мышиной модели

8 июля 2025 г.

В этой статье

Аннотация

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Источник: Choi, J. P., et al. Индукция и микрокомпьютерная томография кавернозных мальформаций головного мозга на мышиной модели. J. Vis. Exp. (2017)

В этом видео генетически модифицированный мышиный детеныш, несущий ген Ccm2, окруженный сайтами loxP и Cre-рекомбиназой, слитой с рецептором эстрогена, используется для индуцирования церебральных кавернозных мальформаций (CCM). Введение 4-гидрокситамоксифена активирует Cre в эндотелиальных клетках, что приводит к делеции Ccm2 и образованию CCM в головном мозге.

Протокол

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Все процедуры с участием животных были рассмотрены местным комитетом по уходу за животными и ветеринарным советом JoVE.

1. Индукция церебральных кавернозных мальформаций или КМК в мышиных моделях

  1. Крест Cdh5-CreErt2; Ccm2fl/fl мышей с Ccm2fl/fl для получения пометов с Cdh5-CreErt2; Ccm2fl/fl (Ccm2iECKO) щенки и контрольная группа однопометников (Ccm2fl/fl). Животные Cdh5-CreErt2 и Ccm2fl/fl были описаны ранее19.
  2. Растворить 4HT в 100% этаноле и хранить при -80 °C в аликвотах 30 мкл 4-гидрокситамоксифена (4HT) (концентрация: 10 мг/мл). В день применения разведите аликвотированный 4HT в кукурузном масле (0,5 мг/мл).
  3. Внутрижелудочно введите 50 мкл 4HT (0,5 мг/мл) новорожденным детенышам в точке P1 для индуцирования экспериментальных поражений CCM с помощью инсулинового шприца.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Конфликт интересов не декларируется.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
4-гидрокси тамоксифенСигма-ОлдричН6278Для активации Cdh5-CreErt2
кукурузное маслоСигма-ОлдричК8267-500МЛДля разбавления 4-гидрокси тамоксифена
Инсулиновый шприц

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE

Запросить разрешение

Теги

Cre LoxPCCM24

Похожие статьи