Методическая статья

Индукция субарахноидального кровоизлияния у мышиной модели посредством эндоваскулярной перфорации

8 июля 2025 г.

В этой статье

Аннотация

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Источник: Liu, S., et al. Модель эндоваскулярной перфорации субарахноидального кровоизлияния в сочетании с магнитно-резонансной томографией (МРТ).J. Vis. Exp. (2021).

Видео демонстрирует индукцию субарахноидального кровоизлияния через эндоваскулярную перфорацию на мышиной модели. Разрез делается в области шеи мыши, находящейся под наркозом, для доступа к общей сонной артерии и ее раздвоению. Нить вводится через артерии для перфорации ветви внутричерепной артерии, вызывая субарахноидальное кровоизлияние.

Протокол

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Все процедуры, связанные с животными, были проверены местным институциональным комитетом по уходу за животными и ветеринарным наблюдательным советом JoVE.

1. Подготовка животных

  1. Индуцируйте анестезию путем внутрибрюшинного введения кетамина (70 мг/кг) и ксилазина (16 мг/кг). Поддерживают нормальную температуру тела, способствуя быстрой индукции глубокой анестезии. Проверьте на адекватную седацию с помощью болевого раздражителя, такого как пощипывание пальца ноги, и убедитесь в отсутствии реакции.
  2. Осторожно сбрейте волосы на шее мыши бритвой, очистите их 70% этанолом с последующим добавлением бетадина/хлоргексидина и нанесите 1% лидокаин на поверхность кожи для локального контроля боли.
  3. Поместите мышь в положение лежа на спине. Используйте ленту для фиксации конечностей и хвоста, мягко растягивая кожу шеи к противоположной стороне операции. Одновременно слегка приподнимите горлышко.
  4. Используйте офтальмологическую мазь (например, 5% декспантенол) для предотвращения обезвоживания глаз во время операции.

2. Индукция SAH

  1. Вскройте кожу шеи стерильным скальпелем, от подбородка до верхнего края грудины (1,5 см), и тупым образом отделите слюнные железы от окружающей их соединительной ткани.
  2. Отделите группу мышц с одной стороны [в данном случае с правой стороны] трахеи, обнажив оболочку общей сонной артерии (ОКА), покрытую питательными кровеносными сосудами и венулами. ОСА и нервы расположены в непосредственной близости друг от друга.
  3. Отмежеваться от CCA и оставить свободный счет 8-0 шелковый шов вокруг ОСА без его предварительного лигирования. Обратите внимание на защиту блуждающего нерва, так как он легко повреждается (рисунок 1А).
  4. Тройная бифуркация ОЦА, внутренней сонной артерии (ВСА) и наружной сонной артерии (ЭКА) видна вдоль нижней задней трети диастаза. Рассеките дистальный конец ЭХА и переведите сосуд в два раза дальше по горизонтали.
  5. Отсоедините ЭХА в средней точке дважды перевязанного сегмента, создав культю сосуда.
  6. Настройте одну перевязку нити вокруг культи ЭХА, не закрывайте ее до успешного введения нити.
  7. Используйте шов или микрозажим для временной окклюзии ВСА и ОСА (рисунок 1B).
  8. Сделайте небольшой разрез (примерно половина диаметра ЭКА) в ЭКА с помощью микрососудистых ножниц. Вставьте пролевую нить 5-0 (или 4-0) в ECA и продвинуте ее в CCA.
  9. Слегка закройте лигатуру на ЭХА, ослабляя микрозажим на ВСА и ОСА (рисунок 1С).
  10. Осторожно потяните за нить и отрегулируйте культю ЭХА в краниальном направлении, инвагинируя нить через бифуркацию в ВСА (Рисунок 1D).
  11. Направьте кончик нити медиально под углом ~30° к средней линии трахеи и ~30° к горизонтальной плоскости. Протолкните нить вперед внутрь ICA. После достижения бифуркации передней мозговой артерии (ВДК) - средней мозговой артерии (МКА) возникает сопротивление (~9 мм).
  12. Продвинуте нить на 3 мм дальше, перфорируя правый ACA. Своевременно выводите филамент на культю ЭХА, позволяя крови поступать в субарахноидальное пространство.
  13. Удерживайте нить накала в таком положении около 10 с (Рисунок 1E). Наличие мышечного тремора, ипсилатерального миоза, затруднения дыхания, изменения сердечного ритма и недержание мочи могут быть доказательствами успешной операции.
  14. Временно закройте ОСА, чтобы избежать избыточной кровопотери. Мгновенно вытяните нить и завяжите ECA заранее наложенным швом. Вновь откройте ОСА и дайте возможность реперфузии и дальнейшего выпадения крови в субарахноидальное пространство (Рисунок 1F).
  15. После проверки на наличие кровотечения продезинфицируйте кожу вокруг раны, чтобы предотвратить послеоперационные кожные инфекции, и зашите рану нерассасывающимся шовным материалом из полиэфирного волокна 4-0.
  16. Поместите мышь в термобокс до тех пор, пока не придет в себя. Подождите, пока животное полностью придет в себя, и убедитесь, что оно пришло в сознание, достаточное для поддержания лежачего положения на грудине. Не возвращайте животных в компанию других мышей до полного выздоровления.
  17. Введите парацетамол в дозе 200-300 мг/кг массы тела для облегчения послеоперационной боли.
  18. Ежедневно проверяйте мышей после операции.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

figure-results-1
Рисунок 1: Пошаговые изображения хирургической техники.(А) Изображение анатомии обнаженной правой сонной артерии: идентифицирована ОСА и ее разветвление на ВСА и ЭХА, а также малые ветви ЭХА (ОА и СТА). (B) ЭКА мобилизуется из окружающей ткани и перевязывается двумя швами перед разрезанием. Третья лигация должна быть размещена свободно рядом с бифуркацией, не закупор...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Конфликт интересов не декларируется.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Крем для глазБайер815529836Бепантен
Лигационный шов (5-0)СМИШелковый черный USP
Источник света для микроскопаЦейссСветодиод CL 6000
КетаминCP-pharma797-037 (Английский)100 мг/мл
Парацетамол (40 мг/мл)bene Arzneimittel4993736
Проленовая нить (5-0)ЭрхиконЭХ7255
бритваВеллаХС61
Хирургический инструмент (тонкие ножницы)ФСТ14060-09
Хирургический инструмент (щипцы #1)АЭСКУЛАПFM001R
Хирургический инструмент (щипцы #2)АЭСКУЛАПFD2855R
Хирургический инструмент (щипцы #3)ХаммахерНСС 082-12
Хирургический инструмент (иглодержатель)ФСТ91201-13
Хирургический инструмент (пружинные ножницы Ванны)ФСТ15000-08
Хирургический микроскопЦейссStemi 2000 C
Ранящий шов(4-0)ЭрхиконКБ84Д
КсилаветCP-pharma797-062 (Английский20 мг/мл
)

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE

Запросить разрешение

Теги

Похожие статьи