Индукция и оценка депрессии у мышей в результате хронического воздействия стресса

Аннотация

Источник: Yan, Z., et al. Оценка антидепрессивного эффекта Xiaoyaosan на мышах с хроническим стрессом. J. Vis. Exp. (2019).

В видеоролике демонстрируется процесс создания мышиной модели хронической стресс-индуцированной депрессии и оценки депрессивного поведения. Хроническое применение различных стрессоров вызывает высвобождение кортикостерона, что приводит к перевозбуждению нейронов и возможной гибели нейронов, что приводит к симптомам, похожим на депрессию, у мышей.

Протокол

Все процедуры, связанные с животными моделями, были рассмотрены местным институциональным комитетом по уходу за животными и ветеринарным советом JoVE.

1. Подготовка мышей к экспериментальной процедуре

ПРИМЕЧАНИЕ: Для экспериментальной процедуры были отобраны здоровые самцы мышей C57BL/6J в возрасте 12 недель, каждая мышь весом от 18 до 22 г.

1. Держите мышей по отдельности в клетках в типичном помещении для лабораторных животных, свободных от специфических патогенов (SPF) (22 ± 1 °C, 12 ч/12 ч темный/светлый цикл, относительная влажность: 30–40%) в течение недели до процедуры CUMS.
2. Случайным образом разделите всех мышей на контрольную группу и модельную группу в соответствии с массой их тела. В каждой группе по 15 мышей.
3. Перед началом эксперимента пронумеруйте мышей в каждой группе на хвосте с помощью маркера.

2. Индукция депрессии у мышей

ПРИМЕЧАНИЕ: Чтобы вызвать депрессию, мыши в модельной группе и двух группах лечения подвергались хроническому непредсказуемому легкому стрессу (CUMS) в течение 21 дня. План может быть изменен в зависимости от практической ситуации, но следует придерживаться принципа, согласно которому один и тот же стрессор не может использоваться постоянно.

1. Ежедневно подвергайте мышей воздействию любых двух из следующих семи факторов стресса в течение 21 дня подряд. Наш план моделирования разработан следующим образом:
   1. В понедельник подвергните мышей воздействию недостатка пищи (опустошите корм из каждой клетки на 24 часа, с 8:00 до 8:00 утра) и лишению воды (уберите поилку из каждой клетки на 24 часа, с 8:00 до 8:00 утра).
   2. Во вторник подвергните мышей удерживающему напряжению (удерживайте мышей в небольшой пластиковой ванне в течение 3 ч, с 8:00 до 11:00 утра) и пустым клеткам (снимите обивку в каждой клетке на 11 ч, с 8:00 утра до 19:00 вечера).
   3. В среду подвергните мышей воздействию влажных и загрязненных клеток (налейте воду в каждую клетку и держите их влажными в течение 24 часов, с 8:00 до 8:00 утра) и переполненных клеток (поместите пять мышей в одну клетку на 24 часа, с 8:00 до 8:00 утра).
   4. В четверг подвергните мышей стрессу и ледяному плаванию (заставьте каждую мышь плавать в прозрачном стеклянном аквариуме с ледяной водой в течение 5 минут).
   5. В пятницу подвергайте мышей воздействию влажных и грязных клеток и лишению пищи.
   6. В субботу подвергните мышей стрессу от ограничений и переполненным клеткам.
   7. В воскресенье выставьте мышей на пустые клетки и поплавайте на ледяном льду.
2. Записывайте состояние шерсти и массу тела еженедельно до конца моделирования (день 21). Рассчитайте общую оценку состояния шерсти как сумму баллов от семи различных частей тела: головы, шеи, спинной шерсти, брюшной шерсти, передних лап, хвоста и задних лап. Оценка единица указывает на ухоженную шерсть, а оценка на ноль указывает на неопрятную шерсть.

Материалы