Индуцирование потери слуха у мышей при длительном воздействии громкости звука

Аннотация

Источник: Lee, D. et. al., Модифицированные экспериментальные условия для потери слуха, вызванной шумом, у мышей и оценки слуховой функции и повреждения наружных волосковых клеток. J. Vis. Exp. (2023)

Это видео демонстрирует процедуру потери слуха, вызванной шумом, у мышей. Громкий звук повреждает волосковые клетки во внутреннем ухе и нарушает слуховые пути, что приводит к ухудшению слуха.

Протокол

Все процедуры, связанные с животными моделями, были рассмотрены местным комитетом по уходу за животными и ветеринарным наблюдательным советом JoVE.

1. Индукция шум-индуцированной тугоухости (NIHL) у мышей

1. Подготовьте клетку для подопытных мышей
   1. Для этого используйте клетку-ловушку для крыс размерами 14 см × 17 см × 24 см. Отрежьте четыре куска гофрокартона на соответствующие размеры, сделав их подходящими для клетки (13 см × 23 см и 13 см × 16 см).
   2. Чтобы мыши не порезали ноги сеткой-сеткой, поместите две части на дно и с тыльной стороны соответственно. Поместите две другие части перпендикулярно друг другу, чтобы разделить пространство внутри клетки на четверти.
2. Проводите это исследование в звуконепроницаемом боксе. Поместите динамик на расстоянии 8,5 см перед клеткой и поместите колонку и клетку в звуконепроницаемый бокс.
3. Откройте прикладное программное обеспечение CLIO.
4. Наведите курсор на иконку динамика, затем нажмите на TwoSin. Введите и измените значение Freq 1 на 1000 Гц, и Freq 2 на 6000 Гц, и нажмите OK , чтобы начать воспроизведение звука.
5. На вкладке Leq измените децибелвольт (dBV) на уровень звукового давления (dBSPL). После установки времени в интерфейсе программного обеспечения нажмите кнопку с зеленым треугольником, чтобы воспроизвести звук.
6. Поместите микрофон перед динамиком на расстоянии 8,5 см для калибровки уровня шума (Рисунок 1). Отрегулируйте уровень шума до 125 дБ SPL-A и непрерывно контролируйте в течение не менее 3 минут, чтобы убедиться, что уровень шума достаточно стабилен. Используйте генератор, анализатор и усилитель для создания и управления шумом. (Рисунок 2)
   ПРИМЕЧАНИЕ: Выполните этот шаг в звуконепроницаемом боксе, чтобы избежать повреждения слуха оператора.
7. Поместите в клетку четырех самцов мышей C57BL/6J (по одному на каждую четверть) для воздействия шума. Случайным образом распределите мышей по каждой четверти во время воздействия шума. Поместите микрофон в верхнюю часть клетки, чтобы контролировать уровень шума во время воздействия шума (Рисунок 3).
   ПРИМЕЧАНИЕ: Выполните этот шаг в звуконепроницаемом боксе, чтобы избежать повреждения слуха оператора.
8. Подвергайте мышей воздействию шума на частотах 1 кГц и 6 кГц непрерывно в течение 6 ч в сутки, в течение 5 дней подряд.

Результаты

Figure 1: Расчет напряжения по результатам калибровки. Для каждой конкретной частоты значение выбранного напряжения (горизонтальная ось) будет вводиться в калибровочную кривую для получения соотве...

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье

Имя	Компания	Каталожный номер	Комментарии
1/4" CCP Free-field Standard Microphone Set	GRAS	428158	Для воздействия шума
Клетка для крыс<		14 см x 17 см x 24 см
Усилитель звука, MT-1000	unika	<
Звуковой генератор/анализатор/разное, FW-02	CLIO	620300719	For noise exposure
Звукоизоляционная камера	IEA Electro-Acoustic Technology		For noise exposure and ABR
Speaker	IEA Electro-Acoustic Technology		Для воздействия шума

td style='width:99pt;'> td style='width:140pt;'>For noise exposure