В этом видео показана процедура сдавливания лицевого нерва у мыши, при которой тупое вскрытие через ключевые ориентиры обнажает ствол лицевого нерва в шиломалоидном отверстии. Затем щипцы используются для сжатия нервного ствола, вызывая повреждение аксонов и нарушая передачу нейронного сигнала.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Выполнение соксосящей аксотомии на лицевом нерве у модели мыши
858 просмотров
⸱
28 апреля 2025 г.
В этой статье
Аннотация
Протокол
Все процедуры, связанные с животными моделями, были рассмотрены местным комитетом по уходу за животными и ветеринарным наблюдательным советом JoVE.
1. Хирургический подход
- Выровняйте и сфокусируйте стереоскоп относительно операционного поля. Отрегулируйте носовой обтекатель и закрепите его скотчем так, чтобы он располагался вдоль края поля зрения.
- Когда мышь лежит на левом боку, прикрепите край правого уха к носовому конусу, обнажив область за ухом, где будет сделан разрез. Убедитесь, что задняя ушная вена проходит горизонтально через ухо. Обратите внимание, что правильная постановка животного и тейпирование уха имеют решающее значение для того, чтобы быстро найти лицевой нерв.
- Намочите шерсть на ухе и за ухом 70% этанолом и побрейте место операции с помощью лезвия бритвы или скальпеля. Предварительное смачивание шерсти облегчает бритье в этом анатомическом месте.
- Очистите кожу раствором йода, например, хирургическим скрабом Бетадином (7,5% повидон-йода), а затем 70% этанолом. Повторите эту чистку еще два раза, чтобы тщательно продезинфицировать участок.
- Чтобы определить, где нужно сделать разрез, проследите заднюю ушную вену от уха каудально до области, расположенной позади выступа уха. С помощью пружинных ножниц сделайте разрез 4 мм на 2 – 3 мм позади выпуклости.
- Рассекайте подкожно-жировую клетчатку и фасцию с помощью тупой диссекции. Избегайте прямых порезов ножницами, так как кровеносные сосуды или мышечная ткань могут быть легко повреждены.
- При возникновении кровотечения надавите на место операции стерильным ватным тампоном не менее чем на 30 секунд. Если происходит значительная потеря жидкости, введите мышке внутрибрюшинно до 0,5 мл стерильного 0,9% физиологического раствора с помощью иглы 25 или 27 G.
- Используйте несколько ключевых ориентиров: спинномозговой добавочный нерв, ушной канал и переднюю двужелудочную мышцу (описанную ниже), чтобы определить местоположение лицевого нерва. Рассекайте вокруг этих ориентиров, пока не будут визуализированы ветви лицевого нерва. Когда нерв будет обнажен, он будет выглядеть как значительная твердая белая структура, а слой фасции прилипает к нижележащим структурам.
- Найдите спинномозговой добавочный нерв, который идет от каудальной части черепа для иннервации трапециевидной мышцы после рассечения подкожного жира и фасции. Лицевой нерв находится глубоко по отношению к спинномозговому добавочному нерву.
- Найдите хрящевой слуховой проход, который выглядит жемчужно-белым и может быть виден рострально по отношению к лицевому нерву.
- Найдите мышечный живот передней двужелудочной мышцы, которая находится сверху и каудально по отношению к лицевому нерву.
- Когда основные ветви лицевого нерва визуализированы, проведите их дорсально, чтобы найти их начало от шиломастоидного отверстия. Используя щипцы Дюмона #5/45 с тонкими наконечниками, чтобы удерживать место операции открытым, переместите кончики пружинных ножниц по траектории нерва, затем переместите щипцы дорсально, чтобы вновь продвинутая область оставалась открытой.
- Визуализируйте ствол лицевого нерва со скуловой, щечной и краевой ветвями нижней челюсти в этой точке.
ПРИМЕЧАНИЕ: Височная ветвь будет найдена ближе к затылку. Маргинальный нижнечелюстной нерв разветвляется на верхнюю и нижнюю его части ближе к челюсти, поэтому эти нервные ветви не будут видны на этом уровне.- При выполнении травмы раздавливания используйте щипцы Dumont #5/45 для сжатия нерва в течение 30 секунд, используя постоянное давление, чтобы разорвать все аксоны, затем повторите это раздавливание под вторым углом перпендикулярно первому месту раздавливания. Избегайте приложения переменного давления во время 30-секундного раздавливания, в противном случае травма будет неравномерной для разных животных.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Stereo Microscope | Leica | M60 | |
| Маркировочная лента | Fisher Scientific | 15-952< | |
| Пружинные ножницы Vannas-Tübingen - прямые/острые/8,5 см/5 мм режущая кромка | Fine Science Tools | 15003-08 | Стерилизовать перед использованием |
| Щипцы Dumont #5/45 - Стандартные tips/Угловой 45°/Dumoxel/11cm | Fine Science Tools | 11251-35 | Стерилизовать перед использованием |
| 0.9% Sodium Chloride Injection, USP | Hospira | 0409-4888-10 | < |
| 19-027132 | |||
| 70% Ethanol | < | < | |
