$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Все процедуры, связанные с моделями животных, были рассмотрены местным институциональным комитетом по уходу за животными и ветеринарным наблюдательным советом JoVE.
1. Размещение зажимов для аневризмы
- Поместите зажим для аневризмы крысы 30 G на каждую маточную артерию. Обеспечить прекращение кровотока, в том числе проксимального и дистального пульса, и потемнение маточных сосудов, в том числе отдельных плацент. Накройте открытые рога и все операционное поле марлей и орошите стерильным физиологическим раствором. Орошайте поле примерно каждые 10 минут, чтобы оно оставалось влажным.
- Через 60 минут снимите марлю и орошите поле. Убедитесь, что рога и сосуды матки достаточно увлажнены для успешного удаления клипсы. Аккуратно снимите каждый зажим для аневризмы с помощью щипцов. Следите за тем, чтобы не травмировать сосуд, и сохраняйте целостность тканей во время удаления.
- Тщательно орошите рога матки и поле, стараясь удалить любые заблудившиеся марлевые нити из амниотических мешочков.
2. Инъекция липополисахарида в амниотические мешки
- В основание каждого отдельного амниотического мешка, прямо перед плацентарной пластиной, введите 100 μл липополисахарида (ЛПС) (4 μг/мешок) с разведенным синим красителем Эвана в амниотическую жидкость. Используйте тупые щипцы для стабилизации и поворота каждого амниотического мешка в оптимальное положение для инъекции. Разбавленный синий краситель Эвана — это контрастное вещество, которое помогает подтвердить правильность установки шприца и его инъекции.
ПРИМЕЧАНИЕ: Используйте только ультратонкий инсулиновый шприц объемом 0,3 мл с прикрепленной иглой 8 мм 31 G для внутриамниотических инъекций. Использование игл большего калибра приведет к хронической потере амниотической жидкости, гибели плода и реабсорбции беременности. Небольшое количество амниотической жидкости, вытекающей после извлечения шприца, может быть уменьшено путем прямого давления на амниотический мешок. Некоторые зародыши крыс могут переносить в определенной степени олигогидрамнию. Тем не менее, острая потеря амниотической жидкости в результате прокола иглами большого калибра или случайного прокола, приводящего к хронической утечке жидкости, приводит к потере плода и, в тяжелых случаях, к потере соседних беременностей. - Орошите рога матки 3 раза стерильным физиологическим раствором.
3. Закрытие лапаротомии
- Используя щипцы, осторожно верните маточные рога в брюшную полость. Обеспечив достаточное пространство между амниотическими мешочками и разрезом по средней линии, повторно аппроксимируйте края мышечно-фасциального слоя с помощью бегущего шелкового шва 3-0. Помните о расположении амниотических мешочков при закрытии мышечного разреза. Будьте осторожны, чтобы не наложить шов внутрь мешочка или через него.
- Повторите приближение слоя кожи, используя бегущий шелковый шов 3-0, закрывая слой кожи.
ПРИМЕЧАНИЕ: Лапаротомия должна быть закрыта двумя слоями непрерывных швов, чтобы обеспечить расширение кожи и мышц с увеличением срока беременности. Непрерывные швы позволяют равномерно распределить натяжение раны. Прерывистые швы менее желательны, так как множественные узлы раздражают и могут быть легко прожеваны крысой после восстановления после анестезии. Хирургические скобки нежелательны. Хвостики хирургических узлов должны быть обрезаны очень коротко (<3 мм). - Введите 1 мл 0,125% бупивакаина подкожно вокруг краев раны с помощью иглы 26 G. Вводите одну дозу 0,1 мг/кг бупренорфина подкожно в область затылка.
- Выключите изофлуран и высушите крысу полотенцем по мере необходимости. Поместите крысу в чистую домашнюю клетку и следите за ее восстановлением после наркоза. Следите за тем, чтобы крыса не переохладилась.