Анализ амилоидных структур в срезе ткани с помощью флуоресцентной пожизненной микроскопии

Abstract

Источник: Nyström, S., et al., Визуализация амилоидных тканей, окрашенных люминесцентными конъюгированными олиготиофенами, с помощью гиперспектральной конфокальной микроскопии и флуоресцентной визуализации времени жизни. J. Vis. Exp. (2017).

В этом видео демонстрируется анализ амилоидных структур с помощью флуоресцентной микроскопии с визуализацией жизни или FLIM с использованием красителя hFTAA для выявления компактных ядер в виде синего/зеленого цвета, а нестабильных периферий в виде красного/желтого цвета на изображениях с цветовой кодировкой, что отражает организацию амилоида.

Protocol

1. Подготовка образцов тканей

ПРИМЕЧАНИЕ: Многие типы тканей могут быть визуализированы с использованием гептамер-формилтиофенуксусной кислоты (hFTAA) в качестве амилоидного маркера. hFTAA чувствительна к конформации агрегатов. Поэтому окрашивание предпочтительно проводить на неразрушенных агрегатах без воздействия эпитопов. Оптимальное спектральное качество достигается в том случае, если фиксация тканей сведена к минимуму. Следовательно, предпочтение отдается свежезамороженному материалу, аккуратно з....

Materials