Источник: Provenzano, G., et al. Иммуногистохимическая визуализация активности нейронов гиппокампа после пространственного обучения в мышиной модели нарушений развития нервной системы. J. Vis. Exp. (2015)Это видео демонстрирует иммуногистохимическую визуализацию для визуализации активации нейронов гиппокампа. Окрашенные срезы мозга показывают более темные области под светлопольным микроскопом, что указывает на активированные нейроны.
Video Duration: 4 minutes and 54 seconds
JoVE Encyclopedia of Experiments
Нейронаука
Нейровизуализация
Видеоэнциклопедия передовых исследовательских экспериментов для учёных в академии и промышленности.

Снято в ведущих университетских лабораториях
Практика и теория для каждого эксперимента
Содержание
Нейровизуализация
Источник: Галенчик-Чан, А., и др. Функциональная магнитно-резонансная томография (фМРТ) зрительной коры головного мозга с широконаправленной ретинотопической стимуляцией. J. Vis. Exp. (2023). Видео демонстрирует функциональную магнитно-резонансную томографию (фМРТ) зрительной коры для отображения активности на основе уровня оксигенации крови. Структурные изображения МРТ получаются в качестве анатомических эталонов, за которыми следует сканирование с помощью фМРТ. Зрительные стимулы...
Video Duration: 3 minutes and 46 secondsИсточник: Ванг, Дж., и др. Визуализация иммунореактивной иннервации твердой мозговой оболочки черепа крысы, связанной с геном кальцитонина, с иммунофлуоресценцией и нейронным отслеживанием. J. Vis. exp. (2021). }Это видео демонстрирует метод отслеживания происхождения сенсорных нейронов в твердой мозговой оболочке с помощью флуоресцентной микроскопии. Ретроградный индикатор вводится в обнаженную твердую мозговую оболочку крысы, находящейся под наркозом. Индикатор захватывается аксонами...
Video Duration: 4 minutes and 11 secondsИсточник: Сабадо, В.В. , et др., Нагоши, Э. Флуоресцентная визуализация в реальном времени с разрешением одной клетки Drosophila Циркадные часы в мозге личинок Культура. J. Vis. Exp. (2018). } Это видео демонстрирует процедуру встраивания мозг дрозофилы{{}}{{}}{{}} с последующей покадровой флуоресцентной визуализацией нейронов циркадных часов для анализа ритмической активности, синхронизированной со светлыми/темновыми циклами.
Video Duration: 3 minutes and 8 secondsИсточник: Bancroft, E. A., et al. Количественная оценка спонтанного Ca2+J. Vis. Exp. (2020) Это видео демонстрирует визуализацию притока кальция в вентральные нейроны среднего мозга, полученные из эмбрионов мышей. Используя вирусный вектор для экспрессии индикатора кальция, нейроны визуализируются под конфокальным микроскопом для отслеживания изменений интенсивности флуоресценции во время спонтанной и индуцированной нейротрансмиттером активности кальция.
Video Duration: 4 minutes and 53 secondsИсточник: Кальво-Родригес, и др. Флуоресцентная и биолюминесцентная визуализация субклеточного Ca2+ в старых нейронах гиппокампа. {{}}J. Vis. exp. (2015). Это видео демонстрирует использование флуоресцентной визуализации для измерения уровня цитозольного кальция в краткосрочных и долгосрочных культурах гиппокампа крыс. Сравнивая молодые и старые нейроны, он показывает, как повышенная плотность потенциал-зависимых кальциевых каналов L-типа и длительная активация в старых нейронах приводят к...
Video Duration: 3 minutes and 41 secondsИсточник: Reindl, V., et и др. Проведение экспериментов по гиперсканированию с помощью функциональной спектроскопии в ближнем инфракрасном диапазоне. J. Vis. Exp. (2019)} Это видео демонстрирует использование функциональной спектроскопии ближнего инфракрасного диапазона (fNIRS) для измерения активности мозга во время социальных взаимодействий. Участники выполняют скоординированную задачу, которая увеличивает активность в префронтальной коре, области, критически важной для социального поведения,...
Video Duration: 5 minutes and 41 secondsНачните с пациента с диагнозом аневризма головного мозга — состояние, при котором кровеносные сосуды в мозге выпячиваются и наполняются кровью.Закрепите голову пациента внутри катушки головки аппарата МРТ. Инициируйте визуализацию. Система генерирует сильное магнитное поле, выравнивая протоны в ткани мозга по своему направлению. Инициируйте подготовленную намагничиванием последовательность быстрого градиентного эха или MPRAGE путем подачи инверсионного радиочастотного импульса, изменяя...
Video Duration: 1 minute and 26 secondsЧерепно-мозговая травма, или ЧМТ, ухудшает приток крови к пораженным областям и нарушает активность дофаминергических нейронов. Чтобы исследовать нарушения, связанные с ЧМТ, начните с внутривенной инъекции липофильного радиоактивного индикатора пациенту. Индикатор проходит по церебральным сосудам и диффундирует в клетки корковой и подкорковой ткани головного мозга. Выполните однофотонную эмиссионную компьютерную томографию (ОФЭКТ) для обнаружения излучения, испускаемого индикатором.
Video Duration: 1 minuteSource: <span style='background-color:#f9f9f9;color:#1155cc;'>et. al., Покадровая конфокальная визуализация мигрирующих нейронов в органотипической культуре срезов эмбрионального мозга мыши с использованием In Utero Электропорация. J. Vis. Exp. (2017) Это видео демонстрирует покадровую конфокальную микроскопию для наблюдения за радиальной миграцией корковых нейронов из субвентрикулярной зоны к кортикальной пластинке через радиальные глиальные скаффолды в трансдуцированных эмбриональных...
Video Duration: 2 minutes and 59 secondsПоместите голову человека в катушку головы системы функциональной магнитно-резонансной томографии (фМРТ). Используйте измерение занятости сосудистого пространства или VASO, метод измерения изменений объема мозговой крови, или CBV, объема крови в мозге. Начните с применения импульса восстановления инверсии для подавления сигналов от крови, позволяя обнаруживать только сигналы от окружающих тканей в этой области. Затем используйте совместимые с МРТ наушники для доставки слуховых стимулов. Стимулы...
Video Duration: 1 minute and 21 secondsИсточник: Шотт, Д. Т., и др. Получение культур-предшественников олигодендроцитов крыс и количественная оценка олигодендрогенеза с помощью двухинфракрасного флуоресцентного сканирования. J. Vis. Exp. (2016). Это видео демонстрирует использование двойной флуоресцентной визуализации для оценки дифференцировки олигодендроцитов из клеток-предшественников (OPC), выделенных из мозга детеныша крысы. Процесс включает в себя фиксацию клеток, мечение специфических маркеров первичными и...
Video Duration: 3 minutes and 16 secondsИсточник: Upputuri, P. K., et al. Высокопроизводительная компактная система фотоакустической томографии для In Vivo Визуализация мозга мелких животных. J. Vis. Exp. (2017)Это видео демонстрирует протокол неинвазивной визуализации мозга крыс in vivo с использованием фотоакустической томографии, демонстрируя подготовку, настройку системы визуализации и сбор данных для реконструкции 2D-изображений мозга для визуализации сосудистых структур и нейроваскулярного здоровья.
Video Duration: 3 minutes and 27 secondsИсточник: Shimojo, H., et al. Биолюминесцентная визуализация динамики передачи сигналов Notch во время нейрогенеза мышей в режиме реального времени. J. Vis. Exp. (2019)В этом видео используются культуры кортикальных срезов трансгенных эмбрионов мышей для мониторинга экспрессии генов с помощью трехмерной визуализации. Биолюминесцентные, флуоресцентные и светлопольные изображения используются для визуализации экспрессии генов в реальном времени во время дифференцировки нейронов в нативной ткани.
Video Duration: 2 minutesИсточник: Jamadar, S. et. al. Введение радиоиндикаторов для позитронно-эмиссионной томографии головного мозга человека с высоким временным разрешением: применение к ФДГ-фПЭТ. J. Vis. Exp. (2019)В этом видео демонстрируется количественная оценка метаболизма глюкозы в мозге с помощью позитронно-эмиссионной томографии (ПЭТ). Во время сканирования участнику вводят индикатор F-18 фтордезоксиглюкозу (ФДГ). ФДГ накапливается в активных нейронах и выделяет позитроны при распаде F-18. Эти позитроны...
Video Duration: 2 minutes and 18 secondsИсточник: Delalande, J., et.al. Двойная маркировка клеток нервного гребня и кровеносных сосудов в куриных эмбрионах с помощью трансплантации нервной трубкиGFP для цыплят и инъекции красителя карбоцианина DiI. J. Vis. Exp. (2015)В этом видео демонстрируется трансплантация меченой GFP донорской нервной трубки от трансгенного куриного эмбриона, соответствующего стадии, эмбриону-реципиенту на уровне сомитов от одного до семи, с последующим мечением сосудов с помощью липофильного флуоресцентного...
Video Duration: 3 minutes and 33 secondsИсточник: Zheng, W. et al., Диффузионно-тензорная магнитно-резонансная томография при хронической компрессии спинного мозга. J. Vis. Exp. (2019)В этом видео демонстрируется визуализация тензора диффузии при оценке хронической компрессии спинного мозга. Анализируя характеры диффузии воды, фракционную анизотропию и кажущиеся значения коэффициента диффузии, результаты показывают повреждение аксонов в сжатых областях. Полученные данные дают решающее представление о патологии спинного мозга и...
Video Duration: 5 minutes and 20 secondsИсточник: Fowler, B. E., et al. Визуализация кальция in vivo реакции коленчатых ганглиозных нейронов мыши на вкусовые стимулы. J. Vis. Exp. (2021) В этом видео демонстрируется протокол доставки вкусовых добавок к хирургически обнаженному коленчатому ганглии у мыши, находящейся под наркозом, и использование флуоресценции GCaMP с эпифлуоресцентной микроскопией для визуализации нейронных реакций в режиме реального времени, что помогает в исследованиях обработки периферических вкусовых сигналов.
Video Duration: 2 minutes and 13 secondsИсточник: Blanc, J., et al. Функциональная магнитно-резонансная спектроскопия при 7 Тл в коре ствола головного мозга крысы во время активации усов. J. Vis. Exp. (2019)В этом видео демонстрируется метод анализа метаболических изменений в коре головного мозга крысы с помощью функциональной магнитно-резонансной спектроскопии во время стимуляции усов. Исходные спектры метаболитов сравниваются со стимулированными спектрами для выявления увеличения лактата в коре головного мозга, что подтверждает...
Video Duration: 3 minutes and 28 secondsИсточник: Villarreal, S., et. al., Измерение эндоцитоза синаптических везикул в культивируемых нейронах гиппокампа. J. Vis. Exp. (2017)Это видео демонстрирует анализ эндоцитоза синаптических везикул в культивируемых нейронах гиппокампа с помощью мечения пероксидазы хрена и электронной микроскопии.
Video Duration: 5 minutes and 41 secondsИсточник: Becker-Kojić, Z. A., et. al., генерация нейронных клеток, полученных из крови, без ГМ. J. Vis. Exp. (2021)В видео демонстрируется протокол подготовки нервных клеток, полученных из перепрограммированных клеток периферической крови, для флуоресцентной микроскопии, демонстрируя различные типы клеток и стадии развития с помощью иммунофлуоресцентной визуализации.
Video Duration: 1 minute and 48 secondsИсточник: McLeod, F., et al. Оценка плотности синапсов в срезах мозга грызунов гиппокампа. J. Vis. Exp. (2017). В этом видео демонстрируется метод визуализации синаптических маркеров в срезах мозга гиппокампа с помощью конфокального иммунофлуоресцентного анализа. Срезы окрашивают первичными антителами, нацеленными на пресинаптические и постсинаптические маркеры, за которыми следуют флуорофор-конъюгированные вторичные антитела. Затем помеченные маркеры визуализируются с помощью конфокальной...
Video Duration: 5 minutes and 9 secondsИсточник: Lerchundi, R., et. al. Визуализация внутриклеточной АТФ в органотипических срезах тканей мозга мыши с помощью сенсора ATeam1.03YEMK на основе FRET. J. Vis. Exp. (2019)Это видео демонстрирует использование датчиков на основе FRET (Fluorescence Resonance Energy Transfer) для измерения внутриклеточных уровней АТФ в органотипических срезах гиппокампа мышей, что позволяет визуализировать динамику АТФ в нейронах и астроцитах в режиме реального времени в физиологических и экспериментальных...
Video Duration: 3 minutes and 40 secondsИсточник: Эспиноза, Р., и др. Двухцветная визуализация комбинационного рассеяния света мыши в реальном времени для диагностики тканей. J. Vis. exp. (2022). Видео демонстрирует двухцветную визуализацию срезов мозговой ткани мышей методом вынужденного комбинационного рассеяния света (SRS). Два синхронизированных лазерных луча направляются на участок ткани для возбуждения молекулярных колебаний, что приводит к изменению относительной интенсивности лучей. Липиды и белки в ткани обнаруживаются с...
Video Duration: 7 minutes and 16 secondsИсточник: Олесен, М. В., {{}} и др. Метод оптического фракционатора для оценки количества клеток в модели электросудорожной терапии на крысах. J. vis. exp. (2017). В видео демонстрируется техника количественного определения вновь сгенерированных нейронов в тканях мозга. Срезы ткани гиппокампа, содержащие меченые бромоксиуридином (BrdU) нейроны, окрашивали с помощью иммуногистохимии и затем количественно определяли по толщине ткани с помощью метода оптического фракционатора.
Video Duration: 6 minutesИсточник: Guan, W., et. al. Визуализируйте Drosophila аксоны двигательных нейронов ног через взрослую кутикулу. . (2018) Это видео демонстрирует...
Video Duration: 3 minutes and 40 seconds<p style='line-height:1.2;margin-bottom:0pt;margin-top:0pt;' dir='ltr'>Источник: Lauer, S. M., et al. Визуализация кортикальных модулей в уплощенной коре млекопитающих. (2018) <p style='line-height:1.2;margin-bottom:0pt;margin-top:0pt;text-align:justify; dir='ltr'>Это видео демонстрирует метод визуализации корковых модулей в плоских участках мозга с помощью гистохимического окрашивания. Предварительно зафиксированные участки обрабатываются процеживающим реагентом, который выделяет...
Video Duration: 3 minutes and 34 secondsИсточник: Хидмарк, А. С., }Анализ иммунных клеток в одиночных седалищных нервах и ганглии заднего корешка у одной мыши с помощью проточной цитометрии. J. Vis. Exp.{{TAG_ 27}} (2017). }Это видео демонстрирует использование проточной цитометрии для анализа иммунных клеток в седалищных нервах мышей и ганглиях дорсальных корешков (DRG). Процесс включает в себя мечение иммунных клеток антителами, меченными флуорофорами и биотинами, стабилизацию и проникновение клеток, а также использование...
Video Duration: 4 minutes and 38 secondsИсточник: Morsch, M., , Запуск клеточного стресса и смерти с помощью обычной УФ-лазерной конфокальной микроскопии. J. Vis. Exp. (2017)...
Video Duration: 5 minutes and 13 secondsИсточник: Лунелли, Л., et. al. Изучение полисом мозга с помощью атомно-силовой микроскопии. {{}}J. Vis. exp.(2016). В этом видео демонстрируется визуализация полисом с помощью атомно-силовой микроскопии. Покрытый ионами никеля лист слюды закрепляет РНК с прикрепленными рибосомами. Образец промывают, сушат и устанавливают на предметный столик микроскопа. Консольный наконечник сканирует поверхность образца, регистрируя лазерные прогибы для картографирования топологии. Программное обеспечение...
Video Duration: 2 minutes and 28 secondsИсточник: Kimmelmann-Shultz, Б., et. al. использование ближней инфракрасной флуоресценции и сканирования высокого разрешения для измерения экспрессии белка в мозге грызунов. J. Vis. Exp. (2019) Это видео демонстрирует метод флуоресценции ближнего инфракрасного диапазона и сканирования с высоким разрешением для измерения экспрессии белка в мозге грызуна.
Video Duration: 3 minutes and 3 secondsИсточник: Hamid, H. S., et al. Трехмерная визуализация и анализ митохондрий в интраэпидермальных нервных волокнах человека. J. Vis. Exp. (2017) Это видео демонстрирует метод визуализации нервно-специфических митохондрий с помощью трехмерной визуализации. В нем описан процесс получения последовательных сканов предварительно помеченных внутриэпидермальных нервных волокон и создания 3D-изображений поверхности для выделения и отображения митохондрий по отношению к нервным структурам.
Video Duration: 5 minutes and 37 secondsИсточник: Mukherjee, K., et. al. Анализ митохондрий мозга с использованием серийной сканирующей электронной микроскопии. J. Vis. exp.{{}}} Это видео демонстрирует подготовку, визуализация и анализ тканей мозга мыши с использованием серийного сканирующего электронного микроскопа (SBFSEM) для визуализации ультраструктуры митохондрий, что позволяет точно картировать их морфологию и пространственное распределение в аксональных и дендритных нейронных компартментах.
Video Duration: 3 minutes and 25 secondsИсточник: Laboissonniere, et. al. РНК-секвенирование одиночных клеток определенных подмножеств ганглиозных клеток сетчатки. J. Vis. exp. (2017). Это видео демонстрирует метод флуоресцентной трассировки для определения подтипов ганглиозных клеток сетчатки (РГК) в трансгенной сетчатке мыши. Процесс включает в себя закрепление изолированной сетчатки в записывающей камере, поддержание жизнеспособности клеток с помощью оксигенированной перфузии и нацеливание на флуоресцентно меченные РГК с помощью...
Video Duration: 3 minutes and 20 secondsВозьмите фиксированный участок кортикальной ткани мозга мыши, на котором видны нейронные аксоны и дендриты. Дендриты обладают выступами, известными как дендритные шипы, которые образуют синапсы с аксонами. Инкубируйте ткань с ферроцианидом осмия, который связывается с липидами, после чего следует еще одно применение осмия, которое усиливает структурный контраст для визуализации. Окрашивание соединением тяжелого металла, которое связывается с макромолекулами и усиливает контраст. Обезвоживайте с...
Video Duration: 1 minute and 21 secondsИсточник: Mizuno, H., et al. In Vivo<span style='font-family:"Arial",sans-serif;font-size:12.0pt;' lang='EN-US'> двухфотонная визуализация корковых нейронов у новорожденных мышей. J. Vis. Эксп. (2018)Это видео демонстрирует двухфотонную микроскопию, используемую для визуализации нейронов в мозге трансгенного щенка мыши, находящегося под наркозом. Двухфотонный лазер позволяет получать более глубокие изображения с высоким пространственным разрешением и минимальным рассеянием света, что...
Video Duration: 2 minutes and 52 secondsИсточник: Ларк, А. Р., et. al., подход к функциональной визуализации мозга in vivo на основе биолюминесцентного индикатора кальция GFP-aequorin. J. Vis. Exp.} (2016){{}}Это видео демонстрирует визуализацию динамики кальция в реальном времени с помощью Грина. флуоресцентный белок-эквориновая биолюминесценция в глубоких структурах мозга Drosophila.
Video Duration: 3 minutes and 54 secondsИсточник: Муто, А., {{}}et al{{}}. Абляция нейронной популяции с помощью двухфотонного лазера и ее оценка с помощью визуализации кальция и поведенческой записи у личинок рыбок данио. J. Vis. exp.} (2018){{}}} В этом видео Продемонстрирована процедура двухфотонной лазерной абляции, позволяющая избирательно разрушать флуоресцентные нейроны у личинок данио-рерио, иммобилизованных агарозой. Визуализация с высоким разрешением до и после процедуры подтверждает эффективное повреждение нейронов, о чем...
Video Duration: 4 minutes and 42 secondsИсточник: Winkle, C. C., et al. Использование комбинированных методологий для определения роли доставки плазматических мембран во время ветвления аксонов и морфогенеза нейронов. J. Vis. Exp. (2016)В этом видео демонстрируется метод визуализации в реальном времени с использованием дифференциально-интерференционно-контрастной микроскопии (DIC) для наблюдения за разветвлением аксонов в корковых нейронах в режиме реального времени. Покадровые видео фиксируют эффекты лечения нетрином-1 — сигнальной...
Video Duration: 3 minutes and 21 secondsИсточник: Жиляков, Н. В. и др., Регистрация кальциевых транзиентов в нервно-мышечном переходе мышей с высоким временным разрешением с помощью конфокальной микроскопии. J. Vis. Exp. (2021)В этом видео демонстрируется техника визуализации регистрации быстрых кальциевых переходных процессов в нервных окончаниях с помощью конфокальной микроскопии. Стимулируя нерв и улавливая изменения флуоресценции от кальций-связывающих красителей, он визуализирует динамический приток кальция и клиренс в нервном...
Video Duration: 3 minutes and 25 secondsИсточник: Ting, C., et al., Analyzing Dendritic Morphology in Columns and Layers. J. Vis. Exp. (2017)В этом видео демонстрируется процедура подготовки мозга дрозофилы, захвата горизонтальных и фронтальных стеков изображений меченых GFP дендритов продолговатого мозга под конфокальным микроскопом и создания 3D-реконструкции для анализа их морфологии в слоях и колонках.
Video Duration: 4 minutes and 27 secondsИсточник: Lacin, E., et al. Создание флуоресцентных репортеров на основе клеточных нейротрансмиттеров (CNiFERs) для оптического детектирования нейротрансмиттеров in vivo. J. Vis. Exp. (2016)В этом видео демонстрируется техника визуализации высвобождения нейротрансмиттеров in vivo с использованием флуоресцентных репортеров на основе клеточных нейротрансмиттеров (CNiFERs), специализированных репортерных клеток, предварительно вводимых в кору головного мозга мыши. Расположенная под двухфотонным...
Video Duration: 4 minutes and 13 secondsИсточник: Doser, R., et al. Субклеточная визуализация обработки кальция в нейронах in vivo. J. Vis. Exp. (2023)В этом видео in vivo демонстрируется визуализация субклеточного потока кальция в нейронах вентрального нервного канатика трансгенных штаммов Caenorhabditis elegans. Используются два различных показателя кальция: цитоплазматический индикатор у одного штамма и митохондриальный индикатор у другого. Нейроны наблюдаются под флуоресцентным микроскопом для мониторинга изменений интенсивности...
Video Duration: 3 minutes and 17 secondsИсточник: Gouder, et. al. Трехмерная количественная оценка дендритных шипиков из пирамидальных нейронов, полученных из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток человека. J. Vis. Exp. (2015).В этом видео демонстрируется визуализация и анализ дендритных шипиков в трансдуцированных, иммуномеченых пирамидальных нейронах с помощью конфокальной микроскопии. Фоновый шум уменьшается, а дендриты отслеживаются путем оценки их диаметра и длины. Автоматизированная сегментация позвоночника включает в...
Video Duration: 5 minutes and 25 secondsИсточник: Creighton, B. A., et al. Визуализация и анализ внутриклеточного транспорта органелл и других грузов в астроцитах. J. Vis. Exp. (2019)В этом видео демонстрируется визуализация внутриклеточного транспорта грузов в культивируемых астроцитах с помощью флуоресцентного ацидотропного зонда, который селективно мечет кислые эндолизосомальные везикулы. Покадровая визуализация и получение Z-стека с помощью конфокального микроскопа позволяют отслеживать флуоресцентно помеченный груз по всему...
Video Duration: 2 minutes and 35 secondsИсточник: Katsalifis, A., et al. Визуализация окислительно-восстановительного состояния митохондриального глутатиона в первичных нейронах в реальном времени с использованием ратиометрического индикатора. J. Vis. Exp. (2021)В этом видео демонстрируется визуализация окислительно-восстановительного состояния митохондрий в первичных нейронах с использованием ратиометрического флуоресцентного индикатора. Применяя две длины волны возбуждения под флуоресцентным микроскопом, измеряют отношение...
Video Duration: 2 minutes and 39 secondsИсточник: Bagheri, M., et al. Протокол трехмерного конфокального морфометрического анализа астроцитов. J. Vis. Exp. (2015).В этом видео демонстрируется визуализация флуоресцентно меченых астроцитов в срезе мозга мыши с помощью конфокального микроскопа. Мозговой отдел располагается под соответствующей линзой объектива, и подбираются подходящие флуорофоры и фильтры. После автоматической оптимизации экспозиции определяются параметры сканирования для получения 2D-изображений с высоким разрешением.
Video Duration: 3 minutes and 16 secondsИсточник: Weber, R. Z., et al., Внутримозговая трансплантация и биолюминесцентное отслеживание in vivo нейронных клеток-предшественников человека в мозге мыши. J. Vis. Exp. (2022)В этом видео демонстрируется метод биолюминесцентной визуализации in vivo генетически модифицированных нейронных клеток-предшественников человека, введенных в мозг мыши. Процесс включает в себя инъекцию люциферина, подготовку к визуализации и обнаружение биолюминесцентных сигналов от трансплантированных клеток в месте...
Video Duration: 1 minute and 49 secondsИсточник: Bannai, H., et al., Dissection of Local Ca2+ Signals in Cultured Cells by Membrane-Targeted Ca2+ Indicators. J. Vis. Exp. (2019)В видео демонстрируется флуоресцентная визуализация для наблюдения за специфической для компартмента динамикой спонтанного кальция в астроцитах путем последовательного мониторинга чувствительных к кальцию белков, локализованных на плазматической мембране и эндоплазматическом ретикулуме.
Video Duration: 2 minutes and 33 secondsИсточник: Marinello, M., et al. Характеристика нервно-мышечных соединений у мышей с помощью комбинированной конфокальной микроскопии и микроскопии со сверхвысоким разрешением. J. Vis. Exp. (2021)В этом видео демонстрируется подготовка, иммуноокрашивание и визуализация нервно-мышечных соединений в мышечной ткани крысы с использованием конфокальной микроскопии и микроскопии сверхвысокого разрешения для визуализации и анализа пресинаптических и постсинаптических структур.
Video Duration: 4 minutes and 7 secondsИсточник: Чиу, С., и др. Фазово-контрастная магнитно-резонансная томография в общей сонной артерии крысы. J. Vis. Exp. (2018). В этом видео демонстрируется фазово-контрастная магнитно-резонансная томография (ПК-МРТ) для измерения кровотока в общей сонной артерии крысы. После закрепления крысы под наркозом на кровати для МРТ и обеспечения стабильных физиологических параметров общая сонная артерия сканируется для получения изображений через определенные промежутки времени. Затем на основе этих...
Video Duration: 3 minutes and 52 secondsИсточник: Хейдж, Б. Д. et. al., Функциональное транскраниальное допплеровское ультразвуковое исследование для мониторинга мозгового кровотока. {{}}J. Vis. exp.} (2021)} Это видео демонстрирует использование допплеровского ультразвука в качестве функционального Инструмент визуализации для измерения скорости мозгового кровотока или CBFV в режиме реального времени. В нем подчеркивается, как сдвиги частоты в средней мозговой артерии во время таких задач, как задержка дыхания, выявляют изменения в...
Video Duration: 3 minutes and 47 secondsРасположите голову пациента внутри радиочастотной, или радиочастотной, катушки магнитно-резонансного томографа, или МРТ, аппарата. Начните времяпролетную магнитно-резонансную ангиографию или TOF MRA, неинвазивный метод визуализации кровеносных сосудов. Выберите срез ткани для визуализации, чтобы визуализировать артерии и вены. Подайте радиочастотный импульс для возбуждения протонов в выбранном срезе изображения. Эти протоны выделяют энергию, которая регистрируется как сигнал МРТ. Повторное...
Video Duration: 1 minute and 17 secondsПериваскулярные пространства (ПВС) — это заполненные жидкостью пространства вокруг кровеносных сосудов головного мозга, участвующих в оттоке жидкости. Чтобы исследовать изменения в ПВС во время инсульта небольшого сосуда, выполните магнитно-резонансную томографию (МРТ) области базальных ганглиев в головном мозге пациента. Протокол визуализации включает в себя Т2-взвешенные последовательности быстрого спинового эха и восстановления инверсии с ослаблением жидкости (FLAIR). Т2-взвешенная...
Video Duration: 1 minute and 23 secondsSource: Nishimura, C. Количественная оценка архитектуры сосудов головного мозга с помощью двухфотонной микроскопии на мышиной модели нейровоспаления, вызванного ВИЧ.J. Vis. Exp. (2016). Это видео демонстрирует визуализацию in vivo корковых капилляров в мозге мыши с помощью двухфотонной микроскопии. В нем описаны этапы введения флуоресцентного красителя мыши, находящейся под наркозом, с тонким корковым окном черепа, подготовки к визуализации и получения подробных изображений микрососудистых...
Video Duration: 2 minutes and 58 secondsПоместите пациента с внутренним стенозом сонной артерии, состоянием, характеризующимся сужением внутренней сонной артерии, на стол для визуализации для цифровой субтракционной ангиографии (DSA). Вставьте ангиокатетер в общую сонную артерию на уровне четвертого шейного позвонка. Сделайте рентгеновское изображение перед контрастированием, чтобы зафиксировать фоновые структуры, такие как кости и мягкие ткани, с помощью рентгеновского облучения. Введите Йодсодержащее контрастное вещество в сонную...
Video Duration: 1 minute and 22 secondsНачнем с пациента с церебральным васкулитом, который вызывает воспаление и повышенную проницаемость кровеносных сосудов в головном мозге. Поместите голову пациента внутрь радиочастотной, или радиочастотной, катушки магнитно-резонансного томографа, или МРТ, аппарата. Инициируйте магнитно-резонансную ангиографию (МРА), которая использует радиочастотные импульсы для визуализации кровотока. Протоны в текущей крови генерируют сильные сигналы, заставляя кровеносные сосуды казаться яркими, в то время...
Video Duration: 1 minute and 14 secondsИсточник: Тан, З., et и др., Построение и применение атласа мозгового кровотока на основе церебральной функциональной области с использованием магнитно-резонансной томографии-артериального спин-мечения. J. Vis. Exp. (2024). В этом видео демонстрируется метод построения атласа мозгового кровотока путем интеграции данных магнитно-резонансной томографии или МРТ-спиновой маркировки артерий с сегментированными областями мозга, визуализации моделей кровотока и количественной оценки уровней кровотока...
Video Duration: 3 minutes and 38 secondsИсточник: Kim, D., et. al. Комбинированная флуоресцентная визуализация в ближнем инфракрасном диапазоне и микрокомпьютерная томография для непосредственной визуализации тромбоэмболии головного мозга. J. Vis. Exp. (2016)Это видео демонстрирует визуализацию тромба головного мозга у мышей с помощью микрокомпьютерной томографии (микро-КТ). В мышиную модель мозгового тромба вводят наночастицы золота, нацеленные на фибрин, действующие как контрастный агент. Мышь помещается на ложе аппарата...
Video Duration: 2 minutes and 5 secondsИсточник: Giustetto, P., et. al., Неинвазивная паренхиматозная, сосудистая и метаболическая высокочастотная ультразвуковая и фотоакустическая визуализация мозга крыс. J. Vis. Exp. (2015)В этом видео мы демонстрируем использование высокочастотного ультразвука и фотоакустической визуализации для изучения сосудистой сети и содержания гемоглобина в мозге крысы. Этот метод дает подробное представление о перфузии мозга и оксигенации крови, что позволяет проводить неинвазивный анализ сосудистых...
Video Duration: 4 minutes and 57 secondsИсточник: Kalva, S. K., et al., Настольная фотоакустическая томография на основе импульсного лазерного диода для мониторинга вымывания и вымывания красителя в сосудистой сети коры крысы. J. Vis. Exp. (2019)Это видео демонстрирует процедуру использования фотоакустической визуализации для наблюдения за изменениями в корковых сосудах крысы, находящейся под наркозом. Процесс включает в себя базовую визуализацию, впрыск красителя и анализ абсорбции и выведения красителя во время смывки и смывки.
Video Duration: 3 minutes and 15 secondsИсточник: Menezes Forti, R. et al. Мониторинг нейрокритических пациентов в режиме реального времени с помощью диффузной оптической спектроскопии. J. Vis. Exp. (2020)В этом видео демонстрируется использование диффузной корреляционной спектроскопии (DCS) для измерения мозгового кровотока у людей. В нем описываются этапы подготовки системы, калибровки зонда, его размещения на лбу участника, получения данных о рассеянном свете и анализа колебаний интенсивности для интерпретации динамики кровотока в...
Video Duration: 5 minutes and 9 secondsИсточник: Kim, D. E., et al. Комбинированная флуоресцентная визуализация в ближнем инфракрасном диапазоне и микрокомпьютерная томография для непосредственной визуализации тромбоэмболов головного мозга. J. Vis. Exp. (2016)В этом видео демонстрируется флуоресцентная визуализация в ближнем инфракрасном диапазоне (NIRF) для визуализации тромбов в иссеченной ткани мозга, помеченной фибрин-специфическим зондом. Ближний инфракрасный свет возбуждает зонд, заставляя тромб флуоресцировать, что позволяет...
Video Duration: 1 minute and 45 secondsИсточник: Villaseñor, R and Collin. L. Конфокальная визуализация гематоэнцефалического барьера с высоким разрешением: визуализация, 3D-реконструкция и количественная оценка трансцитоза. J. Vis. Exp. (2017)В этом видео демонстрируется 3D-визуализация гематоэнцефалического барьера (ГЭБ) с высоким разрешением с использованием конфокальной микроскопии, показывающая окрашенные антителами участки мозга мыши для анализа компонентов ГЭБ и внутриклеточных структур, применимых для изучения гомеостаза...
Video Duration: 3 minutes and 4 secondsИсточник: Sweeney, A. M., et al. Визуализация in vivo транспорта спинномозговой жидкости через интактный череп мыши с использованием флуоресцентной макроскопии. J. Vis. Exp. (2019)Это видео демонстрирует процесс визуализации потока спинномозговой жидкости (СМЖ) в мозге мыши с помощью флуоресцентной визуализации. Флуоресцентный индикатор вводится в большую цистерну (КМ), что позволяет отслеживать ее движение с ликвором через субарахноидальное и периваскулярное пространства. Покадровая съемка...
Video Duration: 2 minutes and 41 secondsИсточник: Breid, S., et. al. Биолюминесцентная визуализация нейровоспаления у трансгенных мышей после периферической инокуляции фибрилл альфа-синуклеина. J. Vis. Exp. (2017)Это видео демонстрирует биолюминесцентную визуализацию нейровоспаления у трансгенных мышей, демонстрируя люцифераз-люцифериновые реакции в активированных астроцитах. Протокол позволяет проводить неинвазивную количественную оценку активации астроцитов, помогая исследованиям воспаления ЦНС и терапевтической эффективности.
Video Duration: 3 minutes and 7 secondsИсточник: Nyström, S., et al., Визуализация амилоидных тканей, окрашенных люминесцентными конъюгированными олиготиофенами, с помощью гиперспектральной конфокальной микроскопии и флуоресцентной визуализации времени жизни. J. Vis. Exp. (2017). В этом видео демонстрируется анализ амилоидных структур с помощью флуоресцентной микроскопии с визуализацией жизни или FLIM с использованием красителя hFTAA для выявления компактных ядер в виде синего/зеленого цвета, а нестабильных периферий в виде...
Video Duration: 3 minutes and 26 secondsИсточник: Боско, А., } и др. in vivo Динамика активации микроглии сетчатки во время нейродегенерации: конфокальная офтальмоскопическая визуализация и морфометрия клеток при мышиной глаукоме. J. Vis. Exp. (2015) Это видео демонстрирует визуализацию микроглии сетчатки in vivo на мышиной модели глаукомы. Трансгенную мышь с микроглией сетчатки, экспрессирующей флуоресцентные белки, помещают под офтальмоскоп. Инфракрасное излучение используется для определения местоположения диска зрительного нерва...
Video Duration: 4 minutes and 55 secondsИсточник: Маити, П. et. al.,. Маркировка и визуализация амилоидных бляшек в тканях мозга с использованием природного полифенола куркумина. J. Vis. exp. (2019){Это видео демонстрирует процедуру визуализации бета-амилоидных бляшек в срезах ткани мозга с использованием иммуномаркировки и окрашивания куркумином. Иммуномаркировка обеспечивает специфичность бета-амилоида, в то время как куркумин избирательно связывается с фибриллами, богатыми β листами, улучшая визуализацию. Ко-кализация красной и...
Video Duration: 3 minutes and 14 secondsПоместите голову пациента с рассеянным склерозом внутрь радиочастотной или радиочастотной катушки аппарата МРТ. Начните восстановление инверсии с ослаблением жидкости или визуализацию FLAIR. Выберите срез мозга, содержащий поражения рядом с областями, богатыми спинномозговой жидкостью. Система генерирует сильное магнитное поле, выравнивая протоны в здоровой и поврежденной ткани мозга и спинномозговой жидкости вдоль своего направления, создавая чистую намагниченность. Примените инверсионный...
Video Duration: 1 minute and 22 secondsИсточник: Zaeck, L., et и др. 3D-визуализация инфекции вируса бешенства высокого разрешения в ткани мозга, очищенной растворителем. J. Vis. Exp. (2019). Это видео демонстрирует процесс подготовки и визуализации ткани мозга мыши, инфицированной вирусом бешенства (RABV), для оценки прогрессирования инфекции. В нем описаны ключевые этапы, включая окрашивание тканей флуоресцентными маркерами, обезвоживание, очистку и монтаж для конфокальной лазерной сканирующей микроскопии, кульминацией которых...
Video Duration: 6 minutes and 41 secondsИсточник: Бишт, К., et. al. Корреляционная световая и электронная микроскопия для изучения взаимодействия микроглии с β-амилоидными бляшками. J. Vis. exp. (2016)Это видео демонстрирует визуализацию и картирование метокси-X04-меченых амилоидных бляшек в мозге мышей при болезни Альцгеймера срезы с использованием флуоресценции и светлопольной микроскопии, что позволяет точно соотнести бляшки с анатомическими структурами для изучения патологии болезни Альцгеймера.
Video Duration: 3 minutes and 19 secondsИсточник: Ouyang, Y., et al. Одновременная визуализация ПЭТ/МРТ во время гипоксии-ишемии головного мозга мышей. J. Vis. Exp. (2015)Это видео демонстрирует метод оценки повреждения гипоксии головного мозга с помощью одновременной позитронно-эмиссионной томографии (ПЭТ) и магнитно-резонансной томографии (МРТ). Мышь под наркозом подвергается перевязке общей сонной артерии (ОСА), что снижает приток крови к одному полушарию мозга и предрасполагает к травмам, вызванным гипоксией. ПЭТ и МРТ оценивают...
Video Duration: 6 minutes and 43 secondsИсточник: Krishnamurthy, K. et al. Флуоресцентное измерение синаптических функций в реальном времени на моделях бокового амиотрофического склероза. J. Vis. Exp. (2021)Это видео демонстрирует визуализацию кальция в реальном времени для мониторинга синаптической активности в нейронах с мутацией БАС, экспрессирующих генетически кодируемый биосенсор кальция. В нем описываются этапы подготовки нейронов к визуализации, стимуляции динамики кальция и регистрации флуоресценции для измерения изменений...
Video Duration: 3 minutes and 18 secondsИсточник: Ciraku, L., et. al. Модель среза мозга ex vivo для изучения и нацеливания на метастатический рост опухоли головного мозга при раке молочной железы. J. vis. exp. (2021). В этом видео демонстрируется визуализация опухолевых клеток, экспрессирующих люциферазу, в органотипическом срезе мозга мыши. В среду добавляют люциферин, и пластину помещают внутрь камеры системы визуализации in vivo. Корректируются параметры для получения изображения, а также определяются форма и размер опухоли.
Video Duration: 2 minutes and 8 secondsИсточник: Arango-Lievano, M. et. al., Продольная визуализация цереброваскулячного кровоснабжения in vivo: отношение к заболеваниям ЦНС. J. Vis. Exp. (2016)Это видео демонстрирует двухфотонную визуализацию in vivo для визуализации флуоресцентно меченых амилоидных бляшек и сосудов головного мозга. Синей флуоресценцией отмечены бляшки, а зеленой флуоресценцией выделены кровеносные сосуды головного мозга. 3D-карта области интереса и мозаичная визуализация с высоким разрешением позволяют выявить...
Video Duration: 2 minutes and 46 secondsИсточник: Clark, A.J., et al. Биолюминесцентная визуализация иммунокомпетентной животной модели глиобластомы. J. Vis. Exp. (2016)В этом видео демонстрируется биолюминесцентная визуализация для отслеживания прогрессирования глиобластомы на иммунокомпетентной мышиной модели с использованием опухолевых клеток, экспрессирующих люциферазу, и люциферина для количественной оценки роста опухоли неинвазивным способом.
Video Duration: 2 minutes and 28 secondsИсточник: Parker, J. J., et al. Органотипическая модель культуры срезов глиобластомы человека для изучения миграции опухолевых клеток и специфических для пациента эффектов антиинвазивных препаратов. J. Vis. Exp. (2017)В этом видео показана визуализация срезов ткани глиобластомы, экспрессирующих зеленый флуоресцентный белок (GFP), с помощью конфокальной микроскопии. Изображения с высоким разрешением захватываются через определенные промежутки времени, чтобы отслеживать движение и направление...
Video Duration: 2 minutes and 7 secondsИсточник: Лутц, Д., et.al. Оценка параметров ультраструктурной нейропластичности после внутриутробной трансдукции развивающегося головного и спинного мозга мыши. J. Vis. Exp. (2019). В этом видео демонстрируется подготовка и анализ участка мозга щенка мыши с помощью просвечивающей электронной микроскопии (ПЭМ). Протокол начинается с того, что фиксированная ткань с тетраоксидом осмия встраивается в смолу, за которой следует точная обрезка для изоляции исследуемой области и ультрамикротомия для...
Video Duration: 2 minutes and 53 secondsИсточник: Inal, M. A. et. al., Ретроградное отслеживание Drosophila Эмбриональные моторные нейроны с использованием липофильных флуоресцентных красителей. J. Vis. Exp. (2020)Это видео демонстрирует метод ретроградного мечения моторных нейронов Drosophila с использованием липофильных красителей. Краситель проникает в аксон, перемещается в обратном направлении и помечает нейроны зеленым цветом, позволяя детально визуализировать их морфологию и проекции под конфокальным микроскопом.
Video Duration: 4 minutes and 47 secondsИсточник: Flatz, W. H. et и др. Морфометрический анализ черепных нервов человека с использованием магнитно-резонансной томографии в Болезнь Меньера в ушах и нормально слышащие уши. J. vis. exp. (2018). В этом видео демонстрируется использование МРТ для анализа морфологии черепных нервов в ушах у пациентов, страдающих хроническим заболеванием внутреннего уха. В нем изложены этапы выполнения МРТ пациента с сильным магнитным полем, реконструкции 3D-изображений поперечного сечения черепных нервов...
Video Duration: 6 minutes and 21 secondsИсточник: Braeckman, K., и др. Расширенная диффузионная визуализация в гиппокампе крыс с легкой черепно-мозговой травмой. (2019)Это видео демонстрирует использование диффузионно-взвешенной визуализации для оценки микроструктурных изменений в гиппокампе крысы после легкой черепно-мозговой травмы (ЧМТ) выделение аксонального повреждения с помощью точного МРТ-сканирования и диффузионного анализа.
Video Duration: 4 minutes and 9 secondsИсточник: Пападелис, К. , et др., интериктальные высокочастотные колебания, обнаруженные с помощью одновременной магнитоэнцефалографии и электроэнцефалографии как биомаркер детской эпилепсии. {{}}J. Vis. exp.}{{TAG_ 27}} (2016). Это видео демонстрирует метод использования записей электроэнцефалографии (ЭЭГ) и магнитоэнцефалографии (МЭГ) для идентификации межприступных эпилептиформных разрядов (СВУ) и высокочастотных колебаний (ГФО) для определения местоположения областей мозга, подверженных...
Video Duration: 4 minutes and 40 secondsИсточник: Huang, Y. et. al., продольный морфологический и физиологический мониторинг трехмерных опухолевых сфероидов с использованием оптической когерентной томографии. J. Vis. Exp. (2019)Это видео демонстрирует использование оптической когерентной томографии (ОКТ) для мониторинга опухолевых сфероидов в многолуночном планшете путем получения изображений поперечного сечения с высоким разрешением. Анализируя отражения света от клеточных структур, ОКТ строит 3D-модели для оценки морфологических...
Video Duration: 3 minutes and 7 secondsИсточник: Лане, М., et.al. Культура взрослых трансгенных эксплантов сетчатки данио для визуализации живых клеток с помощью многофотонной микроскопии. J. Vis. Exp. (2017)Это видео демонстрирует визуализацию миграции глиального ядра Мюллера в живых клетках в индейских эксплантах сетчатки рыбок данио-рерио после повреждения фоторецепторов, вызванного светом. Фактор некроза опухоли-альфа (TNF-α), высвобождаемый поврежденными фоторецепторами, активирует глиальные клетки Мюллера, вызывая ядерную...
Video Duration: 5 minutes and 50 secondsИсточник: Bénard, M., et al. ex vivo Визуализация постнатальной миграции гранулярных клеток мозжечка с помощью конфокальной макроскопии. J. Vis. Exp. (2015)}Это видео демонстрирует конфокальный макроскопический метод отслеживания миграции ex vivo миграции гранулярных клеток в срезах мозжечка из постнатального мозга крыс.
Video Duration: 3 minutes and 59 secondsИсточник: Daynac, M., et. al. Сортировка нейронных стволовых и прогениторных клеток из субвентрикулярной зоны взрослой мыши и живая визуализация динамики их клеточного цикла. J. Vis. Exp. (2015)Это видео демонстрирует покадровую визуализацию нейронных стволовых клеток (НСК) из трансгенного мозга мыши с использованием конфокального лазерного сканирующего микроскопа. НСК флуоресцируют красным цветом во время фазы G1 и не флуоресцентны в других фазах клеточного цикла. Адгезивный культура NSC...
Video Duration: 2 minutes and 43 secondsИсточник: Уильямс, А. Л., и др. Многофотонная покадровая визуализация для визуализации развития в режиме реального времени: визуализация мигрирующих клеток нервного гребня у эмбрионов рыбок данио. J. Vis. Exp. (2017)}Это видео демонстрирует протокол многофотонной покадровой визуализации для визуализации миграции клеток нервного гребня в эмбрионе данио-рерио в режиме реального времени с высоким разрешением.
Video Duration: 4 minutes and 49 secondsИсточник: Чонг, С. Визуализация проекционного паттерна аксонов эмбриональных моторных нейронов у Drosophila. J. Vis. Exp. (2017)Это видео демонстрирует визуализацию проекций аксонов у эмбрионов Drosophila. Иммуномаркировка моторных нейронов, точное препарирование для выявления нейронных структур и дифференциально-интерференционно-контрастная микроскопия в совокупности позволяют выявить детальную архитектуру нейронов, подчеркивая проекционные паттерны аксонов.
Video Duration: 3 minutes and 57 secondsИсточник: Canovic, E. P., et. al., Характеристика многомасштабных механических свойств ткани мозга с помощью атомно-силовой микроскопии, ударного индентирования и реометрии. J. Vis. Exp. (2016)В видео демонстрируется использование ударного вдавливания для измерения механических свойств гидратированной ткани мозга мыши, включая жесткость, рассеивание энергии и демпфирование, с помощью анализа смещения зонда и скорости.
Video Duration: 2 minutes and 44 secondsИсточник: Portela-Lomba, M., et. al. Кокультура аксотомизированных ганглиозных нейронов сетчатки сетчатки крысы с обонятельной оболочечной оболочкой, как in vitro модель регенерации аксонов взрослого человека. J. vis. exp. (2020). В этом видео демонстрируется визуализация и количественная оценка регенерации аксонов в аксотомизированных ганглиозных нейронах сетчатки сетчатки крысы (ОРГ), совместно культивируемых с иммортализированными клетками глии, обоняющей обоняние человека. ГН имеют...
Video Duration: 2 minutes and 23 secondsИсточник: Changou, C. A., et. al. Живые изображения переноса белка GLUT4 в первичных нейронах гипоталамуса мыши с помощью деконволюционной микроскопии. J. Vis. Exp. (2017). В этом видео показана визуализация инсулин-индуцированной транслокации GLUT4 в нейронах гипоталамуса с использованием деконволюционной микроскопии для захвата и анализа динамики трафика GFP-GLUT4 с высоким разрешением.
Video Duration: 3 minutes and 38 secondsИсточник: Kennedy, L. H., et. al. Визуализация и живая визуализация олигодендроцитарных органелл в органотипических срезах мозга с использованием аденоассоциированного вируса и конфокальной микроскопии. J. Vis. Exp. (2017)Это видео демонстрирует визуализацию митохондрий олигодендроцитов в органотипических срезах мозга мышей. Ломтик помещается в камеру ванны с непрерывной циркуляцией жидкости и контролируемой температурой. После настройки различных параметров конфокального микроскопа покадровые...
Video Duration: 4 minutes and 11 secondsИсточник: Этьен, Ф. et al. Двухфотонная визуализация притяжения микроглиальных процессов к АТФ или серотонину в острых срезах мозга. J. Vis. Exp. (2019)Это видео демонстрирует использование двухфотонной микроскопии для изучения притяжения микроглиальных процессов к инъецируемому соединению в срезах мозга. В нем представлен обзор подготовки срезов мозга мышей, введения тестового соединения хемоаттрактанта и визуализации флуоресцентно меченой микроглии для визуализации их реакции.
Video Duration: 4 minutes and 28 secondsИсточник: Wang, Z., et al. Транспупиллярная двухфотонная визуализация сетчатки мыши in vivo. J. Vis. Exp. (2021). В этом видео демонстрируется техника визуализации сетчатки in vivo с помощью двухфотонной микроскопии. Мышей под наркозом готовят к визуализации, фиксируя их голову, нанося глазную смазку и накладывая на глаз покровное стекло. Ганглиозные клетки сетчатки (ГСК), экспрессирующие флуоресцентные белки, сначала визуализируются с помощью эпифлуоресценции для выравнивания. Наконец,...
Video Duration: 4 minutes and 32 secondsИсточник: Бишт, К., et al. Точное картирование мозга для выполнения повторяющейся визуализации нейроиммунной динамики у мышей in vivo. J. Vis. Exp. (2020)Это видео демонстрирует флуоресцентную визуализацию нейроиммунной динамики у трансгенной мыши с имплантатом черепа. Стабильность сосудов и нейронов визуализируется наряду с динамическими изменениями микроглии, отражающими иммунные реакции на активность нейронов.
Video Duration: 4 minutes and 2 secondsИсточник: Шеннонхаус, Дж., и др. In Vivo Кальциевая визуализация нейронных ансамблей в сетях первичных сенсорных нейронов в интактных ганглиях дорсальных корешков. J. Vis. Exp. (2023). В видео демонстрируется метод визуализации кальция in vivo для мониторинга активности нейронов в ганглиях дорсальных корешков (DRG) трансгенной мыши. Нейроны DRG экспрессируют показатель кальция, который увеличивает интенсивность флуоресценции при связывании с кальцием. Механические или термические стимулы,...
Video Duration: 7 minutes and 9 secondsИсточник: Hellerman, M. B. , и др. Живая визуализация }Drosophila}. J. Vis. Exp. (2015){{TAG_ 28}}Видео демонстрирует технику визуализации в реальном времени для изучения рисунка глаз у куколки Drosophila melanogaster. Маркеры, помеченные зеленым флуоресцентным белком (GFP), позволяют визуализировать клеточную организацию и дифференцировку во время формирования развивающейся структуры глаза.
Video Duration: 4 minutes and 22 secondsИсточник: Уливи, А. Ф., et. al. Продольная двухфотонная визуализация спинного гиппокампа CA1 у живых мышей. J. Vis. exp. (2019)Это видео демонстрирует продольную двухфотонную визуализацию флуоресцентно меченных пирамидальных нейронов у живой мыши. демонстрируя подготовку, выравнивание канюли и визуализацию дендритов и дендритных шипиков для изучения структуры нейронов в области CA1 гиппокампа.
Video Duration: 2 minutes and 36 secondsИсточник: Gómez-Villafuertes, R., et. al., живая визуализация с последующим отслеживанием одной клетки для мониторинга клеточной биологии и развития линии нескольких нейронных популяций. J. Vis. Exp. (2017) Видео демонстрирует процесс подготовки, визуализации и отслеживания взрослых нейронных стволовых клеток в режиме реального времени для изучения клеточных поведения, включая деление и дифференциацию.
Video Duration: 3 minutes and 54 secondsИсточник: Вольпе, Б. А. , et др. } Лазерная абляция и регенерация на основе конфокального микроскопа в межневневромастных клетках данио-рерио. {{}}J. Vis. exp.{{TAG_ 31}} (2020) }Это видео демонстрирует мониторинг восстановления межневневромастных клеток у рыбок данио-рерио с помощью конфокальной микроскопии, отслеживая гибель и восстановление клеток с помощью покадровой флуоресцентной визуализации.
Video Duration: 2 minutes and 39 secondsИсточник: Фрид, Д. Э., Гульбрансен, Б. Д. In Situ Ca2+ визуализация энтеральной нервной системы. J. Vis. Exp. (2015)Это видео демонстрирует кальций визуализация для визуализации и анализа активности энтеральных нейронов и глии в препаратах миентерального сплетения толстой кишки мышей.
Video Duration: 4 minutes and 14 secondsИсточник: Jagodzinska, J., et. al., Оптическая когерентная томография: визуализация ганглиозных клеток сетчатки мыши . J. Vis. Exp. (2017) В этом видео мы демонстрируем использование спектральной оптической когерентной томографии (SD-OCT) для визуализации слоев сетчатки и оценки структурных изменений в генетически модифицированной модели мыши с оптической нейропатией.
Video Duration: 4 minutes and 8 secondsИсточник: Чейни, А. М., et.al. ПЭТ-визуализация нейровоспаления с использованием [11C]DPA-713 в мышиной модели ишемического инсульта. J. Vis. exp. (2018). Это видео демонстрирует технику визуализации in vivo нейровоспаления у мышей с моделью ишемического инсульта с использованием TSPO-специфичного радиоиндикатора. После инъекции радиоактивный индикатор связывается с TSPO, белком, расположенным на внешней мембране митохондрий и сверхэкспрессирующимся в активированных иммунных клетках. Сканер...
Video Duration: 9 minutes and 19 secondsИсточник: Choi, J. P. et et al. Индукция и микрокомпьютерная томография кавернозных мальформаций головного мозга на мышиной модели. J. Vis. exp. ( 2017)Это видео демонстрирует использование микрокомпьютерной томографии для визуализации поражений церебральной кавернозной мальформации (CCM) в мозге мыши. В нем подробно описаны этапы подготовки образцов, визуализации и реконструкции 3D-изображений для оценки плотности и расположения поражений КМК в ткани головного мозга.
Video Duration: 3 minutes and 35 seconds<p style='line-height:1.2;margin-bottom:0pt;margin-top:0pt;' dir='ltr'>Источник: Schmitz, К., et al., Биолюминесценция и ближняя инфракрасная визуализация неврита зрительного нерва и воспаления мозга в модели рассеянного склероза у мышей по модели EAE. J. Vis. Exp. (2017).В этом видео демонстрируется метод визуализации и мониторинга экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита или EAE-индуцированного воспаления зрительного нерва с использованием Биолюминесцентная визуализация. Он...
Video Duration: 2 minutes and 27 secondsИсточник: Ишимото, Х. et. al., Визуализация кальция ex vivo для визуализации реакции мозга на эндокринную сигнализацию у дрозофил. J. Vis. exp.} (2018)Это видео демонстрирует визуализацию кальция для изученияДрозофила реакция мозга на нейропептиды. Нейроны, экспрессирующие флуоресцентный индикатор кальция, выявляют внутриклеточную динамику кальция и функциональные реакции на сигнальные молекулы.
Video Duration: 2 minutes and 31 secondsИсточник: Al Omran, A. J., et al. Живая визуализация эпендимальных ресничек в боковых желудочках мозга мыши. J. Vis. exp. (2015). Это видео демонстрирует технику визуализации в реальном времени с использованием дифференциально-интерференционно-контрастной микроскопии (ДВС) для наблюдения за биением эпендимальных ресничек в сагиттальных срезах мозга мыши. Эпендимальные реснички приводят в движение спинномозговую жидкость (ликвор), и их активность регистрируется в участках мозга, поддерживаемых...
Video Duration: 2 minutes and 56 secondsИсточник: Pigazzini, M. L., et. al. Характеристика амилоидных структур при старении C. Elegans использование флуоресцентного визуализации в течение жизни. J. Vis. Exp. (2020).Это видео демонстрирует использование флуоресцентной микроскопии с визуализацией в течение жизни (FLIM) для оценки агрегации белка polyQ в C. elegans нейроны, сравнивая контрольных и шаперонов с дефицитом белка. Повышенная агрегация у червей с дефицитом шаперона способствует передаче энергии между кластеризованными...
Video Duration: 5 minutes and 36 secondsИсточник: Landeira, B. S.,et al., Живая визуализация первичных клеток коры головного мозга с использованием 2D-системы культивирования. J. Vis. Exp. (2017)Видео демонстрирует использование покадровой визуализации для отслеживания флуоресцентно меченных корковых предшественников, мониторинга их деления и дифференцировки, а также изучения развития линий в первичных клетках коры головного...
Video Duration: 1 minute and 56 secondsИсточник: Lee, H. et. al., Успешная визуализация кальция in vivo с помощью миниатюрного микроскопа, устанавливаемого на голове, в миндалевидном теле свободно ведущей себя мыши. J. Vis. Exp. (2020)Это видео демонстрирует визуализацию кальция in vivo у мыши с использованием градиентного показателя преломления или линзы GRIN и миниатюрного микроскопа. Установка сочетает в себе фиксацию головы в системе подвижных клеток без трения, стимулируя нейроны и вызывая приток ионов кальция. Линзы GRIN...
Video Duration: 2 minutes and 24 secondsИсточник: Thapa, R., et. al., Стереотаксическая инъекция вируса и имплантация линз с градиентным индексом для глубокого мозга In Vivo Визуализация кальция. J. Vis. Exp. (2021)Видео демонстрирует визуализацию кальция в реальном времени с помощью минископа в трансдуцированной мыши, коррелируя активность нейронов с поведением.
Video Duration: 2 minutes and 55 secondsИсточник: Moore, J. D., et al. Юкстацеллюлярный Мониторинг и локализация отдельных нейронов в подкорковых структурах мозга бдительных, ограниченных головой крыс. J. Vis. Exp. (2015)Это видео демонстрирует метод сопоставления целлюлярной записи и окрашивания у сдержанной, бодрствующей крысы. Процедура включает в себя запись сигналов от нейронов и введение красителя для точной локализации места записи. Этот метод позволяет точно сопоставлять нейронную активность с анатомической структурой мозга.
Video Duration: 2 minutes and 54 secondsИсточник: Schramm, P. et al. Визуализация in vivo полностью активной ткани мозга у бодрствующих личинок и молодых особей данио-рерио путем удаления черепа и кожи. J. Vis. Exp. (2021)Это видео демонстрирует визуализацию in vivo нейронов мозжечка у трансгенных личинок данио-рерио, которые экспрессируют флуоресцентные белки в нейронах Пуркинье. Процесс включает в себя обезболивание личинок, их обездвиживание в агарозе и тщательное удаление пигментированной кожи для усиления проникновения света и...
Video Duration: 3 minutes and 6 secondsИсточник: Ing-Esteves, S. & Lefebvre, J. L. Time-Lapse Imaging of Neuronal Arborization using Sparse Adeno-Associated Virus Labeling of Genetic Targeted Retinal Cell Populations. J. Vis. Exp. (2021)Это видео демонстрирует использование конфокальной микроскопии для визуализации дендритной динамики в живых эксплантах сетчатки мышей. В нем описаны шаги по стабилизации сетчатки под конфокальным микроскопом, выполнению эпифлуоресцентной визуализации для визуализации амакриновых интернейронов со...
Video Duration: 3 minutes and 15 secondsИсточник: Kamei, R., et al., In vivo хроническая двухфотонная визуализация микроглии в гиппокампе мыши. J. Vis. Exp. (2022)В видеоролике демонстрируется процесс настройки и визуализации in vivo двухфотонной микроскопии динамики микроглии в гиппокампе CA1 (Cornu ammonis 1) и зубчатой извилине, что обеспечивает оптимальное оптическое выравнивание и оценку структурной целостности.
Video Duration: 2 minutes and 42 secondsИсточник: Lukasz, D., et al. Визуализация кальция in vivo волосковых клеток латеральной линии у личинок данио-рерио. J. Vis. Exp. (2018)В этом видео демонстрируется живая визуализация притока кальция в волосковых клетках латеральной линии парализованной трансгенной личинки данио-рерио с помощью конфокального микроскопа. Механическая стимуляция пучков волос с помощью импульсов жидкости индуцирует поступление кальция через каналы механотрансдукции и потенциал-зависимые каналы, что визуализируется...
Video Duration: 5 minutes and 18 secondsИсточник: Лаут, Э. Л., и др. Визуализация нейронов в толстых срезах мозга с помощью метода Гольджи-Кокса. J. Vis. Exp. (2017)Это видео демонстрирует визуализацию нейронов в толстом участке мозга, окрашенном по методу Гольджи-Кокса, путем установки верхних и нижних границ фокусировки и захвата перекрывающихся изображений. Несколько мест визуализируются для обеспечения детальных нейронных проекций, которые объединяются для создания 3D-представления.
Video Duration: 2 minutes and 37 secondsИсточник: Heredia, D. J., et. al.al ex vivo визуализация клеточно-специфической передачи сигналов кальция в трехстороннем синапсе диафрагмы мыши. J. Vis. Exp. (2018)} Это видео демонстрирует флуоресцентную визуализацию динамики кальция в нервно-мышечных соединениях (НМЖ) у трансгенной мыши, экспрессирующей генетически кодируемые показатели кальция. NJM идентифицируется флуоресцентно помеченными ацетилхолиновыми рецепторами в диафрагме с диафрагмальным нервом. Разветвитель изображения...
Video Duration: 2 minutes and 48 secondsИсточник: Пекарек, Б. Т., et. al., Визуализация и количественное определение интактных нейрональных дендритов с помощью CLARITY Tissue Clearing. J. Vis. Exp. (2021)}В этом видео мы демонстрируем подготовку, визуализацию и анализ очищенного мозга мыши для изучения дендритных стволов, морфологии позвоночника и распределения нейронов с помощью конфокальной микроскопии и методов 3D-реконструкции.
Video Duration: 4 minutes and 2 secondsИсточник: Рафаэли, Р., и др., исследование пространственного взаимодействия между астроцитами и нейронами в очищенном мозге. J. Vis. Exp. (2022)} В видео демонстрируется приготовление камеру и нейровизуализацию очищенной ткани гиппокампа мыши с помощью двухфотонной микроскопии для визуализации пространственных взаимодействий между флуоресцентно мечеными астроцитами и возбуждающими нейронами.
Video Duration: 2 minutes and 19 secondsИсточник: Chan, США, et al., использование постнатальной электропорации in vivo для изучения морфологии нейронов мозжечковой гранулы и развития синапсов. J. Vis. Exp. (2021).Это видео демонстрирует анализ развития нейронов мозжечковой гранулы путем визуализации предварительно зафиксированных срезов мозговой ткани у мышей, помеченных флуоресцентным белком, Получение изображений Z-стека с высоким разрешением с помощью конфокального микроскопа и измерение структурных параметров, включая длину...
Video Duration: 3 minutes and 4 secondsИсточник: Маруока, Х., et. al.} Одновременная визуализация динамики микроглии и нейронной активности у бодрствующих мышей. J. (2022) }В этом видео показана процедура двухфотонной микроскопии для визуализации нейронной активности и динамики микроглии у бодрствующей мыши во время визуальной стимуляции, выделяя переходные процессы кальция и клеточные взаимодействия.
Video Duration: 3 minutes and 13 secondsИсточник: Moye, S. L., et.al. Визуализация морфологии астроцитов с помощью желтого ионофореза Люцифера. J. Vis. exp. (2019). Это видео демонстрирует использование флуоресцентного ионофореза красителя для изучения морфологии астроцитов в фиксированных срезах мозга. В нем подробно описывается прокалывание сомы астроцита электродом для доставки анионного гидрофильного красителя в цитоплазму под действием тока низкого напряжения, что позволяет красителю диффундировать и помечать сому и ветви.
Video Duration: 4 minutes and 19 secondsИсточник: Джонгблотс, Б. К., . Визуализация активности протеинкиназы А у мышей с фиксированным поведением с использованием микроскопии in vivo с двухфотонной флуоресцентной визуализацией в течение жизни. (2019)} Это видео демонстрирует процедуру двухфотонной флуоресцентной микроскопии в течение жизни для визуализации активности протеинкиназы А у мышей с фиксированным поведением головы во время принудительного передвижения.
Video Duration: 6 minutes and 37 secondsИсточник: Квон, Дж., {{}}et и др., спектральная рефлектометрическая микроскопия миелинизированных аксонов in situ. J. vis. exp. (2018)}}Это видео демонстрирует использование спектральной рефлектометрии с гиперспектральным конфокальным микроскопом для анализа интерференционных картин и определения диаметров миелинизированных аксонов в фиксированных срезах ткани мозга.
Video Duration: 4 minutes and 16 secondsНачните с пациента с менингиомой, или опухолью головного мозга, помещенного в МРТ-сканер для неинвазивной визуализации мозга. Настройте сканер для получения структурных изображений отдельных срезов мозга. Увеличьте контраст для улучшения дифференцировки тканей. Используйте визуализацию коэффициента передачи межсрезовой намагниченности на срезах мозга с помощью радиочастотных импульсов, слегка смещенных от сигнала МРТ. Импульсы доставляют энергию в протонный пул в виде макромолекул и связанных...
Video Duration: 1 minute and 26 secondsSource: Liau, E. S. et al. визуализация моторной навигации по аксонам и количественная оценка арборизации аксонов у эмбрионов мышей с использованием флуоресцентной микроскопии светового листа. J. Vis. Exp. (2018). Это видео демонстрирует использование флуоресцентной микроскопии светового листа для отображения проекций моторных нейронов и ветвления аксонов в трансгенные эмбрионы мышей. В нем описаны шаги, связанные с подготовкой образцов, визуализацией и 3D-реконструкцией разветвления аксонов...
Video Duration: 5 minutes and 40 secondsКоличественное картирование восприимчивости, или QSM, количественно определяет магнитную восприимчивость мозговой ткани, которая отражает ее клеточный состав, например, содержание миелина. Начните с получения данных магнитно-резонансной томографии или МРТ неподвижного полушария мозга человека ex-vivo. Используйте 3D-градиентные магнитные поля для намагничивания ткани и сбора сигналов в нескольких временных точках или эхо-сигналах, чтобы уменьшить фоновый шум и артефакты, а также усилить сигналы.
Video Duration: 1 minute and 9 secondsИсточник: Feng, Y., et al. Вязкоупругая характеристика желатиновых фантомов, имитирующих мягкие ткани, с использованием индентирования и магнитно-резонансной эластографии. J. Vis. Exp. (2022)...
Video Duration: 3 minutes and 54 secondsИсточник: Бойер, Н. П. et. al., Визуализация и анализ транспорта нейрофиламентов в иссеченном большеберцовом нерве мыши. J. Vis. Exp. (2020)}Это видео демонстрирует метод флуоресцентной фотоактивации для анализа Транспорт нейрофиламентов в миелинизированных аксонах периферических нервов. Отслеживая фотоактивированные зеленые нейрофиламенты, помеченные флуорофорами, этот метод дает представление о транспорте аксонов при нейродегенеративных заболеваниях.
Video Duration: 4 minutes and 33 secondsИсточник: Kulkarni, M. et al. Imaging Ca2+ Динамика в окончаниях аксонов фоторецепторов колбочек сетчатки мыши. J. Vis. Exp. (2015)Это видео демонстрирует использование двухфотонной микроскопии для мониторинга динамики кальция в колбочках фоторецепторов трансгенной сетчатки мыши. В нем описаны этапы подготовки срезов сетчатки, визуализации биосенсоров кальция на основе FRET и анализа изменений флуоресценции для количественной оценки уровня кальция при фоновом освещении и световой стимуляции.
Video Duration: 3 minutes and 18 secondsИсточник: Nishidate, I., et al. Одновременная оценка церебральной гемодинамики и светорассеивающих свойств мозга крысы in vivo с использованием мультиспектральной диффузной визуализации. J. Vis. Exp. (2017)Это видео демонстрирует использование мультиспектральной визуализации диффузного отражения для анализа мозгового кровотока, уровня кислорода и изменений структуры тканей у крыс под наркозом, обеспечивая понимание гемодинамики и морфологии мозга в различных условиях.
Video Duration: 2 minutes and 16 secondsИсточник: Van Wonterghem, E., et al. Микродиссекция и сканирующая электронная микроскопия полного монтирования визуализации сосудистого сплетения мыши. J. Vis. Exp. (2022)Это видео демонстрирует подготовку и визуализацию ткани сосудистого сплетения из мозга мыши с помощью сканирующей электронной микроскопии (СЭМ). Процесс включает в себя фиксацию тканей, обезвоживание и покрытие проводящим слоем платины для стабилизации и подготовки образца к визуализации. SEM позволяет получить подробные...
Video Duration: 2 minutes and 23 secondsИсточник: Kato, D. et. al., Оценка и манипулирование нейронной активностью с помощью двухфотонной голографической микроскопии. J. Vis. Exp. (2022)Это видео демонстрирует метод двухфотонной визуализации в сочетании с оптогенетикой с использованием голографической микроскопии. Используя пространственный модулятор света, этот метод обеспечивает точную стимуляцию нейронов, экспрессирующую чувствительную к красному свету визуализацию белка и кальция с минимальным фотоповреждением. Этот подход...
Video Duration: 3 minutes and 25 secondsИсточник: Canovic, E. P., et al. Характеристика многомасштабных механических свойств ткани головного мозга с помощью атомно-силовой микроскопии, ударного индентирования и реометрии. J. Vis. Exp. (2016)Это видео демонстрирует использование атомно-силовой микроскопии (АСМ) для измерения вязкоупругих свойств ткани мозга, где кантилевер со сферическим зондом взаимодействует с тканью и изгибается под действием приложенных сил. Лазерный луч, отраженный на детекторе, отслеживает консоль для измерения...
Video Duration: 3 minutes and 8 secondsИсточник: Canovic, E. P., et al. Характеристика многомасштабных механических свойств ткани головного мозга с помощью атомно-силовой микроскопии, ударного индентирования и реометрии. J. Vis. Exp. (2016)В этом видео реометр был использован для приложения контролируемого колебательного вращательного движения к ткани мозга для создания деформации сдвига и оценки вязких и эластичных свойств ткани. Реометр, как функциональный инструмент, дает представление о механике мозга во время травм или...
Video Duration: 2 minutes and 51 secondsИсточник: Хэйр, Д. Дж., et.al. Визуализация металлов в тканях головного мозга с помощью лазерной абляции - индуктивно связанной плазмы - масс-спектрометрии (LA-ICP-MS). J. Vis. Exp. (2017)Это видео демонстрирует использование лазерной абляции-индуктивно связанной плазмы-масс-спектрометрии (LA-ICP-MS) для визуализации и количественной оценки распределения металлов в тканях мозга мышей. Протокол включает в себя лазерную абляцию для получения аэрозоля из частиц образца, ионизацию частиц в...
Video Duration: 6 minutes and 52 secondsИсточник: Piazza, V., et al., Безметочная нелинейная оптика для изучения тубулин-зависимых дефектов в центральном миелине. J. Vis. Exp. (2023)Это видео демонстрирует процедуру визуализации аномалий микротрубочек в срезе ткани мозга крысы с помощью микроскопа с двухфотонным возбуждением. Он использует сигналы генерации второй гармоники (ГВГ) для обнаружения дефектов тубулина и снижения выработки миелина.
Video Duration: 2 minutes and 40 secondsИсточник: Daniele, F., et. al TIRFM и pH-чувствительные GFP-зонды для оценки динамики везикул нейротрансмиттеров в клетках нейробластомы SH-SY5Y: визуализация клеток и анализ данных. J. vis. exp. (2015). В этом видео демонстрируется визуализация клеток нейробластомы человека с помощью микроскопа с полным внутренним отражением (TIRF) для визуализации синаптических везикул, помеченных флуорофорами. Сначала клетки фокусируются в эпифлуоресцентном режиме. Затем вносятся коррективы для достижения...
Video Duration: 2 minutes and 51 secondsИсточник: Winkle, C. C., et al. Использование комбинированных методологий для определения роли доставки плазматических мембран во время ветвления аксонов и морфогенеза нейронов. J. Vis. Exp. (2016)В этом видео демонстрируется флуоресцентная микроскопия полного внутреннего отражения (TIRF) для визуализации экзоцитарных событий в корковых нейронах. pH-чувствительный маркер зеленого флуоресцентного белка (GFP) флуоресцирует при слиянии везикул, при этом селективное возбуждение TIRF захватывает...
Video Duration: 3 minutes and 54 secondsИсточник: McCullagh, E. A., et al. Применение когерентной антистоксовской рамановской спектроскопии (CARS) для визуализации миелинизации в срезах мозга. J. Vis. Exp. (2022)В видео демонстрируется флуоресцентная и когерентная антистоксова рамановская спектроскопия (CARS) для визуализации нейронной архитектуры в тканях мозга грызунов. Окрашивание Nissl помечает клеточные тела, связываясь с рибосомальной РНК, в то время как визуализация CARS нацелена на богатый липидами миелин с помощью...
Video Duration: 3 minutesИсточник: Hontani, Y., et al. Трехфотонная флуоресцентная микроскопия глубоких тканей в интактном мозге мышей и рыбок данио. J. Vis. Exp. (2022)В этом видео демонстрируется настройка и выполнение трехфотонной визуализации в мозге рыбки данио, находящейся под наркозом. Протокол позволяет визуализировать флуоресцентно меченые нейроны в глубоких тканях, выявляя активность и структуры нейронов в режиме реального времени для исследовательских приложений в области нейронауки.
Video Duration: 3 minutes and 22 seconds