Методическая статья

Покадровая визуализация радиальной миграции корковых нейронов в трансдуцированных срезах эмбрионального мозга мыши

29 мая 2025 г.

В этой статье

Аннотация

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Source: <span style='background-color:#f9f9f9;color:#1155cc;'>et. al., Покадровая конфокальная визуализация мигрирующих нейронов в органотипической культуре срезов эмбрионального мозга мыши с использованием In Utero Электропорация. J. Vis. Exp. (2017)

Это видео демонстрирует покадровую конфокальную микроскопию для наблюдения за радиальной миграцией корковых нейронов из субвентрикулярной зоны к кортикальной пластинке через радиальные глиальные скаффолды в трансдуцированных эмбриональных срезах мозга мыши.

Протокол

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Все процедуры, связанные с образцами животных, были рассмотрены и одобрены соответствующей экспертизой по этике животных committee.

1. Time-Lapse Imaging

  1. Microscope Setup
    1. Установите климатическую камеру, помещенную на сцену инвертированного конфокального микроскопа, при температуре 37 °C и 5% углекислого газа в атмосфере. Используйте гибридный детектор для снижения интенсивности лазера и повышения жизнеспособности клеток. Для детального анализа используйте сверхдлинный 40-кратный сухой объектив с рабочим расстоянием и числовой апертурой 0,6 или выше.
      Note:Slice Imaging
      1. Выберите срез мозга для визуализации из 6-луночной пластины, содержащей мембранные вставки, с помощью инвертированного флуоресцентного микроскопа.
        Caution:NOTE:NOTE:

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
6-well plateCorning351146
Инвертированный флуоресцентный микроскоп культуры тканейLeicaDM IL LED <
Конфокальный лазерный сканирующий микроскопLeicaTCS SP5II<
Hybrid detectorLeicaHyD
Objective, 40x/0.60 NALeica11506201
Система контроля температуры микроскопаLife Imaging ServicesCube, Brick & Box
Вставка клеточной культурыMilliporePICM0RG50 <
MicrogrinderNarishigeEG-45Используйте угол 38° для скоса
Microinjector<052-0500-900Picospritzer III
Пинцет с 5 мм электродами платинового дискаSonidelCUY650P5
Micropipette pullerSutter InstrumentP-97 <
Коробка нитьSutter InstrumentFB255B2,5 мм x 2,5 мм
Micro-spoon spatulaVWR231-0191185 мм x 5 мм
Тарелка со стеклянным дном, 50 ммWorld Precision InstrumentsFD5040-100
tr style='height:21px; '>td style='overflow:hidden;padding:0px 3px;vertical-align:bottom;'> <tr style='height:21px;' > Servicestr style='height:21px;' >td style='overflow:hidden;padding:0px 3px;vertical-align:bottom; white-space:normal;word-wrap:break-word; wrap-strategy:4;'>Parker Hannifintr style='height:21px;'>

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE

Запросить разрешение

Теги

Zin utero

Похожие статьи