Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Идентификация подтипов ганглиозных клеток сетчатки мыши с помощью флуоресцентной трассировки

740 просмотров

29 мая 2025 г.

В этой статье

Аннотация

Источник: Laboissonniere, et. al. РНК-секвенирование одиночных клеток определенных подмножеств ганглиозных клеток сетчатки. J. Vis. exp. (2017).

Это видео демонстрирует метод флуоресцентной трассировки для определения подтипов ганглиозных клеток сетчатки (РГК) в трансгенной сетчатке мыши. Процесс включает в себя закрепление изолированной сетчатки в записывающей камере, поддержание жизнеспособности клеток с помощью оксигенированной перфузии и нацеливание на флуоресцентно меченные РГК с помощью пипетки с индикатором. Анализируя морфологию и стратификацию дендритов, метод позволяет классифицировать различные подтипы RGC.

Протокол

<

p style='line-height:1.2;margin-bottom:0pt;margin-top:' dir='ltr'>Все процедуры, связанные с образцами животных, были рассмотрены и одобрены соответствующей экспертизой по этике животных.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

figure-results-1

Рисунок 1: Идентификация типо.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Diethyl pyrocarbonate (DEPC)Sigma AldrichD5758 <
Alexa Fluor 594 HydrazideInvitrogenA10442
чашка Петри (диаметр 35 мм)Thermo Fisher Scientific153066 <
Офтальмологические ножницыИнструменты Fine Science15000-00 <
#5 ЩипцыFine Science Tools11252-30
Glass MicropipetteSutterBF120-69-10 <
Micropipette PullerSutter <
1mL шприцFisher Scientific14-823-2F
tr style='height:20px;'>tr style='height:20px;'>tr style='height:20px;'>tr style='height:20px;'>td style='overflow:hidden;padding:0px 3px;vertical-align:bottom;'>P-1000 горизонтальный вытягиватель пипетки

Теги

Ганглионарные клетки сетчаткисетчатка мышидендритная морфологияэлектрофизиологические записимаркировка GFPконфигурация целого клеткиоксигенированная перфузияинфракрасное освещение