Покадровая визуализация трансфицированных первичных клеток коры головного мозга мыши

Аннотация

Источник: Landeira, B. S.,et al., Живая визуализация первичных клеток коры головного мозга с использованием 2D-системы культивирования. J. Vis. Exp. (2017)

Видео демонстрирует использование покадровой визуализации для отслеживания флуоресцентно меченных корковых предшественников, мониторинга их деления и дифференцировки, а также изучения развития линий в первичных клетках коры головного мозга

Протокол

1. Покадровая видеомикроскопия

ПРИМЕЧАНИЕ: Для этого шага требуется инвертированный флуоресцентный микроскоп с инкубационной камерой (см. Таблица материалов).

1. После заражения ретровирусом поместите планшет для культивирования тканей в инкубатор, подключенный к контроллерам температуры и CO₂.
   ПРИМЕЧАНИЕ: Предварительный нагрев камеры в течение 3 часов перед началом съемки может помочь свести к минимуму дрейф и расфокусировку во время съемки.
   ПРИМЕЧАНИЕ: Камера должна поддерживать ячейки в постоянных условиях 37 °C и 5% CO₂.
2. Выберите положение на ....

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье

Имя	Компания	Каталожный номер	Комментарии
ImageJ	NIH
tTt	ETH Zurich	}
}Микроскоп наблюдателя клетки	Zeiss
Программное обеспечение Tracking Tool (tTt)		https://www.bsse.ethz.ch/csd/software/ttt-and-qtfy.html