Использование быстрого сканирования циклической вольтамперометрии для измерения электрической вызвала пресинаптических динамики дофамина в полосатом ломтики мозга.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Пресинаптических Динамика Допамин в стриатуме мозга Ломтики с быстрой разверткой циклической вольтамперометрии
* These authors contributed equally
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Обширные исследования были направлены на нейротрансмиттера допамина из-за его важности в механизме действия наркотиков, вызывающих зависимость (например, кокаин и амфетамин), роль, которую оно играет в психиатрических заболеваний (например, шизофрения и синдром дефицита внимания с гиперактивностью), и его участие в дегенеративных расстройств, таких как болезнь Паркинсона и болезнь Хантингтона. В нормальных физиологических условиях, допамин, как известно, регулирует двигательную активность, познание, обучение, эмоциональное воздействие, и нейроэндокринной секреции гормона. Один из крупнейших плотности дофаминовых нейронов в полосатом теле, которые можно разделить на два различных регионах нейроанатомической известный как прилежащего ядра и хвостатого-путамен. Цель состоит в том, чтобы проиллюстрировать общий протокол для среза быстрое сканирование циклической вольтамперометрии (FSCV) в стриатуме мышей. FSCV является четко определенной электрохимической техники предоставляя возможность измерять выпуск допамина и поглощения в реальном времени в гiscrete регионах мозга. Углеродные волокна микроэлектродов (диаметр ~ 7 мкм) используются в FSCV обнаружить допамина окисления. Аналитические преимущество использования FSCV обнаружить дофамина заключается в расширении временным разрешением в 100 миллисекунд и пространственным разрешением менее десяти микрон, что обеспечивает дополнительную информацию в микродиализа естественных условиях.
Протокол
1. Экспериментальные необходимости
Электрод Изготовление
- Есть множество методов углеродного волокна микроэлектродов изготовления, так как большинство сделаны в доме. Обычно то, что диктует детали изготовления электродов является электрохимический метод, который применяется к электроду (например amperometry против FSCV). Для FSCV, микроэлектродов может быть собственного производства с помощью следующей трехступенчатой процедуры. Для более полного описания углеродного волокна изготовления электродов, см. недавнюю статью Юпитер 1. Однако учтите, что электроды, описанные ниже, цилиндрические углеродные волок....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
Протокол, представленные здесь демонстрирует, как подготовить и использовать мышь корональных ломтики мозга для экспериментов FSCV. Хотя этот способ можно использовать для получения и измерения динамики допамина, других нейротрансмиттеров, таких как аденозин, перекись водорода, норадреналина и серотонина были контролироваться в естественных условиях или в пробирке с 3 FSCV, 8 - 11. FSCV может быть использован для мониторинга некоторые из этих других нейрохимических веществ простой модификаци.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
Нет конфликта интересов объявлены.
Благодарности
Финансовые средства, предоставленные Национальным институтом по проблемам злоупотребления алкоголем и алкоголизма (NIAAA; АА-016967 и AA016967-01S1; ТАМ), Wayne State University запуска средства и Wayne State University Research Программа грантов. Материалы будут использоваться исключительно ответственности авторов и не отражает официальную точку зрения NIAAA или Национального института здоровья.
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Имя | Компания | CAS номер | |
Реагент | |||
Хлористый калий | Рыболов | 7447407 | |
Хлористый натрий | EMD Химические вещества | 7647145 | |
Хлорид магния | Рыболов | 7791186 | |
Хлорид кальция | Рыболов | 10035048 | |
Бикарбонат натрия | EMD Химические вещества | 144558 | |
Натрия фосфат, Диаммоний | EMD Химическаяы | 7558794 | |
D-глюкозы | Рыболов | 50997 | |
Аскорбиновая кислота | Рыболов | 50817 | |
Сахароза | Рыболов | 57501 | |
|
| ||
Материалы | Продавец | Номер по каталогу | |
Углеродные волокна | Гудфеллоу Oakdale, Пенсильвания | ||
Стеклянный капилляр | AM Системы Carlsborg штат Вашингтон. | 602000 | |
Серебряная проволока | -M Системы Carlsborg штат Вашингтон. | 787000 | |
Вольфрам стимулирующий электрод | Пластмассы Один из них, Роанок, Вирджиния | ||
Платиновая проволока | |||
Ведущий проволоки | Сквайрс Электроника, Корнилий, ИЛИ | ||
Loctite 404 мгновенного клея | Hankal Корпорация Rocky Hill CT. | ||
Бритва | Всемирный точные инструменты Инк FL. | ||
BD спинного игла | BD Medical Systems, Franlin озеро, Нью-Джерси | REF 405234 | |
Хирургическое Клинка | Перо безопасную бритву Ко LTD. Япония | ||
Программное обеспечение | Продавец | Номер по каталогу | |
TH программного обеспечения | ESA Inc, Челмсфорд, Массачусетс | ||
Инструмент | Продавец | Номер по каталогу | |
Погружение камеры записи | Custom Научные, Denver, CO | ||
Neorolog стимул изолятор | Digitmeter, Хартфордшир, Англия | ||
Автоматический регулятор температуры | Warner Instrument Corporation | ||
Микроскоп (SZX7) | Олимп | ||
Микроскоп | Рыболов | ||
Vibratome 3000 секционирования системы | Санкт-Луесть, МО. | ||
Перфузии насоса | Уотсон Marlow Limited, Фалмут Корнуолл - Англия | H110708 | |
Микропипетки съемник | Narishige, Токио, Япония | ||
ChemClamp потенциостате | Даган Корпорации, Minneapolis, MN. |
Ссылки
- Pike, C. M., Grabner, C. P., Harkins, A. B. Fabrication of Amperometric Electrodes. J. Vis. Exp. (27), e1040-e1040 (2009).
- Lack, A. K., Diaz, M. R., Chappell, A., DuBois, D. W., McCool, B. A. Chronic ethanol and withdrawal differentially modulate pre- a....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
