Методическая статья

Пресинаптических Динамика Допамин в стриатуме мозга Ломтики с быстрой разверткой циклической вольтамперометрии

DOI:

10.3791/3464

⸱

12 января 2012 г.

 ,  ,  , 
1Department of Chemistry, Wayne State University

* These authors contributed equally

В этой статье

Краткое содержание

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Использование быстрого сканирования циклической вольтамперометрии для измерения электрической вызвала пресинаптических динамики дофамина в полосатом ломтики мозга.

Аннотация

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Обширные исследования были направлены на нейротрансмиттера допамина из-за его важности в механизме действия наркотиков, вызывающих зависимость (например, кокаин и амфетамин), роль, которую оно играет в психиатрических заболеваний (например, шизофрения и синдром дефицита внимания с гиперактивностью), и его участие в дегенеративных расстройств, таких как болезнь Паркинсона и болезнь Хантингтона. В нормальных физиологических условиях, допамин, как известно, регулирует двигательную активность, познание, обучение, эмоциональное воздействие, и нейроэндокринной секреции гормона. Один из крупнейших плотности дофаминовых нейронов в полосатом теле, которые можно разделить на два различных регионах нейроанатомической известный как прилежащего ядра и хвостатого-путамен. Цель состоит в том, чтобы проиллюстрировать общий протокол для среза быстрое сканирование циклической вольтамперометрии (FSCV) в стриатуме мышей. FSCV является четко определенной электрохимической техники предоставляя возможность измерять выпуск допамина и поглощения в реальном времени в гiscrete регионах мозга. Углеродные волокна микроэлектродов (диаметр ~ 7 мкм) используются в FSCV обнаружить допамина окисления. Аналитические преимущество использования FSCV обнаружить дофамина заключается в расширении временным разрешением в 100 миллисекунд и пространственным разрешением менее десяти микрон, что обеспечивает дополнительную информацию в микродиализа естественных условиях.

Протокол

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. Экспериментальные необходимости

Электрод Изготовление

  • Есть множество методов углеродного волокна микроэлектродов изготовления, так как большинство сделаны в доме. Обычно то, что диктует детали изготовления электродов является электрохимический метод, который применяется к электроду (например amperometry против FSCV). Для FSCV, микроэлектродов может быть собственного производства с помощью следующей трехступенчатой ​​процедуры. Для более полного описания углеродного волокна изготовления электродов, см. недавнюю статью Юпитер 1. Однако учтите, что электроды, описанные ниже, цилиндрические углеродные волок....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Протокол, представленные здесь демонстрирует, как подготовить и использовать мышь корональных ломтики мозга для экспериментов FSCV. Хотя этот способ можно использовать для получения и измерения динамики допамина, других нейротрансмиттеров, таких как аденозин, перекись водорода, норадреналина и серотонина были контролироваться в естественных условиях или в пробирке с 3 FSCV, 8 - 11. FSCV может быть использован для мониторинга некоторые из этих других нейрохимических веществ простой модификаци.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Нет конфликта интересов объявлены.

Благодарности

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Финансовые средства, предоставленные Национальным институтом по проблемам злоупотребления алкоголем и алкоголизма (NIAAA; АА-016967 и AA016967-01S1; ТАМ), Wayne State University запуска средства и Wayne State University Research Программа грантов. Материалы будут использоваться исключительно ответственности авторов и не отражает официальную точку зрения NIAAA или Национального института здоровья.

....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Имя Компания CAS номер

Реагент

Хлористый калий

Рыболов

7447407

Хлористый натрий

EMD Химические вещества

7647145

Хлорид магния

Рыболов

7791186

Хлорид кальция

Рыболов

10035048

Бикарбонат натрия

EMD Химические вещества

144558

Натрия фосфат, Диаммоний

EMD Химическаяы

7558794

D-глюкозы

Рыболов

50997

Аскорбиновая кислота

Рыболов

50817

Сахароза

Рыболов

57501

 

 

 

Материалы

Продавец

Номер по каталогу

Углеродные волокна

Гудфеллоу Oakdale, Пенсильвания

Стеклянный капилляр

AM Системы Carlsborg штат Вашингтон. 602000

Серебряная проволока

-M Системы Carlsborg штат Вашингтон. 787000

Вольфрам стимулирующий электрод

Пластмассы Один из них, Роанок, Вирджиния

Платиновая проволока

Ведущий проволоки

Сквайрс Электроника, Корнилий, ИЛИ

Loctite 404 мгновенного клея

Hankal Корпорация Rocky Hill
CT.

Бритва

Всемирный точные инструменты Инк FL.

BD спинного игла

BD Medical Systems,
Franlin озеро, Нью-Джерси 		REF 405234

Хирургическое Клинка

Перо безопасную бритву Ко LTD. Япония

Программное обеспечение

Продавец

Номер по каталогу

TH программного обеспечения

ESA Inc, Челмсфорд, Массачусетс

Инструмент

Продавец

Номер по каталогу

Погружение камеры записи

Custom Научные, Denver, CO

Neorolog стимул изолятор

Digitmeter, Хартфордшир, Англия

Автоматический регулятор температуры

Warner Instrument Corporation

Микроскоп (SZX7)

Олимп

Микроскоп

Рыболов

Vibratome 3000 секционирования системы

Санкт-Луесть, МО.

Перфузии насоса

Уотсон Marlow Limited, Фалмут Корнуолл - Англия H110708

Микропипетки съемник

Narishige, Токио, Япония

ChemClamp потенциостате

Даган Корпорации,
Minneapolis, MN.

Ссылки

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Pike, C. M., Grabner, C. P., Harkins, A. B. Fabrication of Amperometric Electrodes. J. Vis. Exp. (27), e1040-e1040 (2009).
  2. Lack, A. K., Diaz, M. R., Chappell, A., DuBois, D. W., McCool, B. A. Chronic ethanol and withdrawal differentially modulate pre- a....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE

Запросить разрешение

Теги

Похожие статьи