Методическая статья

Измерение давления в левом желудочке в позднем эмбриональных и новорожденных мышей

DOI:

10.3791/3756

⸱

23 февраля 2012 г.

 ,  , 
1Department of Biomedical Engineering, Saint Louis University, 2Department of Internal Medicine, Washington University School of Medicine

В этой статье

Краткое содержание

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Измерение давления в левом желудочке (ЛЖ) в эмбриональных и новорожденных мышей описано. Давление измеряется путем введения иглы подключены к заполненной жидкостью датчика в LV под ультразвуковым контролем. Необходимо соблюдать осторожность, чтобы поддерживать нормальную функцию сердца в протоколе исследования.

Аннотация

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Артериальное давление значительно возрастает во время эмбрионального и постнатального развития у позвоночных животных. У мышей, кровоток первая обнаруживаются вокруг эмбриональных день (E) 8.5 1. Систолическое левого желудочка (ЛЖ) давление на 2 мм рт.ст. E9.5 и 11 мм рт.ст. в E14.5 2. На этих середине эмбриональной стадии, LV отчетливо видна через стенку грудной клетки для инвазивного измерения давления, так как ребра и кожи, не полностью разработана. Между E14.5 и родов (примерно E21) изображения методы должны быть использованы для просмотра LV. После родов, среднее артериальное давление повышается от 30 - 70 мм рт.ст. от послеродовой день (P) 2 - 35 3. Помимо P20, артериальное давление может быть измерено с твердотельными катетерами (т.е. Миллар или Scisense). Прежде, чем P20, эти катетеры являются слишком большими для развивающихся мыши артерий и артериальное давление должно быть измерено с помощью пользовательских вытащил пластиковый катетер прилагается к заполненной жидкостью датчики давления 3 или стеклянной микропипетки ATTболели в серво нулевой датчики давления 4.

Наши последние исследования показали, что наибольшее повышение артериального давления происходит в конце эмбрионального в раннем послеродовом периоде у мышей 5-7. Это большое повышение артериального давления может влиять на клетки гладкой мускулатуры (SMC) фенотип в развивающихся артерии и вызвать важные события механотрансдукции. У человека болезнь, при которой механические свойства развивающихся артерий скомпрометированы дефектов белки внеклеточного матрикса (синдром т.е. Марфана 8 и Supravalvular аортальный стеноз 9) быстрые изменения артериального давления в течение этого периода могут способствовать фенотип заболевания и тяжести через изменения в механотрансдукции сигналов. Таким образом, важно иметь возможность оценить изменения артериального давления во время конца эмбрионального и неонатального периода на мышах болезни человека.

Мы опишем метод для измерения давления LV в концеэмбриональные (E18) и раннем послеродовом (P1 - 20) мышей. Игла прикрепляется к заполненной жидкостью датчик давления вставляется в LV под ультразвуковым контролем. Принимаются меры для поддержания нормальной сердечной деятельности во время экспериментального протокола, особенно для эмбриональных мышей. Представитель данные представлены и ограничения протокола обсуждается.

Протокол

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. Ультразвук и давление в системе

  1. Начать ультразвуковой системы в соответствии с инструкциями производителя (Vevo 770 Visualsonics). Заполните соответствующую зонд (возраст E18 - модель P7 = 708, возраст> = P7 модели 707B) с дистиллированной водой и подключение к ультразвуковой системы. Поместите датчик в регулируемой подставкой на приблизительно ориентации, необходимых для получения Л. длинной оси зрения для мыши установлен на платформу изображения таким образом, что LV вершина указал на введение руки.
  2. Давление в системе состоит из заполненных жидкостью датчик давления, мост усилителя, системы сбора данных и записи данных программного обеспечен....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Протокол, представленные здесь предоставляет метод для измерения давления LV в конце эмбрионального и раннего неонатального мышей. Основным ограничением этого протокола является временным разрешением давления в системе. Давление сигнал затухает по мере продвижения от LV через иглу к датчику, и только среднее давление значения могут быть записаны. Затухание может быть сведено к минимуму с помощью крупнейшего иглы возможно, но игла должна вписываться в LV просвет для различных старых мышей. Потому что диастолическое давле.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Нет конфликта интересов объявлены.

Благодарности

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Эта работа финансировалась, в частности, путем грантов NIH HL087653 и HL105314. Некоторые из этих методов были разработаны в лаборатории д-ра Роберта Mecham в Вашингтонском университете в Школе медицины.

....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Название реагента / оборудование Компания Номер по каталогу Комментарии
Высокое разрешение ультразвуковая система Visualsonics Vevo 770 Или другой соответствующей системы ультразвукового
Высокие частоты ультразвука зондов Visualsonics 708 и 707B
Платформа изображений и введение руки Visualsonics Изображений Station 2 При ЭКГ и температуры обратной связью платформы
Датчик давления AD инструменты MLT 844
Мост усилитель AD инструменты ML221
Система сбора данных AD инструменты ML866
Запись данных программного обеспечения AD инструменты LabChart
Кольцо стоять и зажим Различные поставщики Для проведения датчик давления при измерении
3-полосная краны с Luer соединениями, мужской замок Коул Parmer 30600-02
1/16 "ID Tygon труб Коул Parmer 06408
Мужчина и женщина luers Вт / 1/16 "штуцером для шланга Коул Parmer 45510-50 45510-00
24 "трубка с мужскими и женскими Luer на каждом конце Коул Parmer 30600-60
3 и 10 мл шприцев BD Biosciences
30 и 25G иглы BD Biosciences 1.5 дюйма в длину
Биг Бен манометр Riester 1456-100
Солевой Различные поставщики
Гепарин Различные поставщики
Ультразвуковой гель Паркер Aquasonic 100
Лосьон для удаления волос Наир

Ссылки

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Ji, R. P. Onset of cardiac function during early mouse embryogenesis coincides with entry of primitive erythroblasts into the embryo proper. Circ. Res. 92 (2), 133-135 (2003).
  2. Ishiwata, T., Nakazawa, M., Pu, W. T., Tevosian, S. G., Izumo, S.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE

Запросить разрешение

Теги

Похожие статьи