Этот протокол описывает выделение жировой ткани стромальных клеток, полученных из lipoaspirate и создание 4 мм критического размера дефекта свода черепа для оценки скелетных регенерации.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Ремонт критического размера дефекта свода черепа Модель Используя полученные из жировой ткани стромальных клеток, полученных из Lipoaspirate
* These authors contributed equally
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Черепно-лицевой скелет ремонт и восстановление открывает перспективы De Novo ткани образование через ячейку подход, основанный на использовании стволовых клеток. Жировая стромальных клеток, полученных (ИСС) оказались богатым источником мультипотентных стволовых клеток, способных к остеогенной, хондрогенной, адипогенной, и миогенной дифференциации. Многие исследования изучили остеогенных потенциал этих клеток в естественных условиях с использованием различных биоматериалов леса для сотовых доставки. Было показано, что, используя остеокондуктивные, гидроксиапатит покрытые поли (молочной-со-гликолевой кислоты) (HA-PLGA) эшафоте семенами с ИСС, критический размер дефекта свода черепа, дефект, который определяется его неспособностью спонтанному исцеление в течение всего срока животного, могут быть эффективно показать надежные костной регенерации. Это, в естественных условиях модель демонстрирует основы поступательного подходов, направленных на регенерацию костной ткани - сотовыйкомпоненты и биологические матрицы. Этот метод служит моделью для окончательного клинического применения клеток-предшественников к ремонту конкретного дефекта ткани.
Протокол
1. Изолятор и расширения
- Все согласия пациента и экспериментальные протоколы были рассмотрены и одобрены Стэнфордского университета Институциональные Review Board (протокол № 2188 и № 9999).
- Получить человека подкожной жировой ткани от выборных процедур липоаспирация под местной / общей анестезии.
- Там будет два слоя в lipoaspirate (рис. 1А). Супернатант содержит подавляющее большинство обработанных клеточного материала. Нижний слой правило, инъекции физиологического раствора. Полученные из жировой ткани стромальные клетки могут быть собраны из любого слоя, но доходность значительно больше, из супернатанта.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
С изоляцией из жировой ткани стромальные клетки 2 от lipoaspirate, эти клетки были дифференцированы на широкий спектр клеточных линий. Жировая ткань из мезодермальных происхождение и, следовательно, мультипотентных полученных из жировой ткани стромальные клетки, вероятно, будет наиболее эффективным в применении к мезодермального происхождения. Способность генерировать скелетных тканей особенно важно в условиях дефицита донорских участков для аутотрансплантата и ограничений, присущих синтетическим материалом, .......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
Нет конфликта интересов объявлены.
Благодарности
Мы хотели бы поблагодарить д-р Джордж общин и доктор Дин Vistnes за их поддержку и сотрудничество наших исследований. Работа выполнена при поддержке Национального института стоматологических и черепно-лицевых исследований дает 1 DE019274 R21-01, R01EB009689 и RC2 DE020771-02, Oak Foundation и Hagey лаборатории детской регенеративной медицины в MTL д-р Хен поддерживается Saint Joseph Mercy Hospital GME .
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Название реагента: | Компания | Номер в каталоге | Комментарии (по желанию) |
| Lipoaspirate Harvest | |||
| PBS | Gibco | 10010-023 | |
| Сбалансированный солевой Хэнка решение | Cellgro | 21-023-CV | |
| Коллагеноз | Сигма | C6885-500мг | |
| Сотовый фильтр 100 мкм | BD Falcon | 352360 | |
| Steri-топ-500 мл 0,22 мкм фильтр | Millipore | SCGPT05RE | |
| Дефект свода черепа | |||
| Z500 безщеточный MicromotorsUM50C | NSK | NSKZ500 | |
| Циркулярный нож 4,0 мм | Xemax хирургические | CK40 |
Ссылки
- Levi, B., James, A. W., Nelson, E. R. Human adipose-derived stromal cells heal critical size mouse calvarial defect. PLoS One. 5, (2010).
- Zuk, P. A., Zhu, M., Ashjia, P. Human adipose tissue is a source of multipotent stem cells. Mol. Biol. Cell. 13, 42....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
