$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Микробы, как правило, живут в общинах. Пространственной организации клеток внутри сообщества, как полагают, влияют на выживание и функционирование сообщества 1. Оптические методы секционирования, в том числе конфокальной и двухфотонной микроскопии, доказали свою полезность для наблюдения пространственной организации бактерий и архей общинами 2,3. Сочетание конфокальной микроскопии и физического срезов дрожжевых колоний показало, внутренней организации клеток 4. Тем не менее, прямых оптических срезов с помощью конфокальной или двух-фотонного микроскопа были только способны достигать нескольких слоев клеток дрожжей в глубь колонии. Это ограничение, скорее всего, из-за сильного рассеяния света из дрожжевых клеток 4.
Здесь мы представляем метод, основанный на установлении и cryosectioning получить пространственное распределение флуоресцентных клеток внутри общины Saccharomyces CEREVISIAE. Мы используем метанол в качестве закрепителясохранить пространственное распределение клеток. Исправлена общины проникли с октября соединение, замороженные и cryosectioned в криостат. Флуоресценции из разделов раскрывает внутреннюю организацию флуоресцентные клетки внутри сообщества.
Примеры дрожжей общины, состоящей из штаммов выразив красного и зеленого флуоресцентного белка продемонстрировать потенциал cryosectioning метод выявления пространственного распределения флуоресцентные клетки, а также, что экспрессии генов в дрожжевых колоний 2,3. Хотя наш акцент был сделан на общины Saccharomyces CEREVISIAE тот же метод потенциально может быть применен для изучения других микробных сообществ.