Определение опорожнения желудка с помощью неинвазивных [ 13 C]-октановой кислоты дыхательный тест для отслеживания гастропареза в женской NOD мышей LTJ.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Оценка опорожнения желудка не страдающих ожирением мышей с диабетом Использование [
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Опорожнения желудка исследованиях на мышах были ограничены неспособность следовать опорожнения желудка изменениями в то же животное, так как наиболее часто используемые методы требуют убийства животных и посмертное восстановление еды 1,2. Такой подход предотвращает продольные исследования с целью определения изменений в опорожнения желудка с возрастом и прогрессирование заболевания. Обычно используется [13 C]-октановой кислоты дыхательный тест для людей 3 была модифицирована для использования в 4-6 мышей и крыс 7, и мы ранее показали, что этот тест является надежным и реагировать на изменения в опорожнения желудка в ответ на наркотики и во время диабетической прогрессирования заболевания 8. В этом видео-презентация принципа и практическая реализация этого модифицированного теста объяснил. Как и в предыдущем исследовании, NOD мышей LTJ использовании модели сахарного диабета 1 типа 9. Доля этих мышей развиваются симптомы гастропареза, осложнение СДES характеризуется задержкой опорожнения желудка без механического препятствия желудка 10.
Эта статья демонстрирует, как обучение мышей для тестирования, как готовить еду тест и получить 4 часа опорожнения желудка данные и как анализировать полученные данные. Анализатор изотопа углерода, используемые в настоящем исследовании подходит для автоматической выборки проб воздуха на расстоянии до 12 мышей в то же время. Эта техника позволяет продольные наблюдения за опорожнение желудка от больших групп мышей с диабетом или другими давней болезни.
Введение
Эта рукопись описывает технические и методологические соображения, связанные с неинвазивного измерения опорожнение желудка у мышей. Следуя методике, описанной здесь, следователи могут надежно и воспроизводимо следить за изменениями в опорожнения желудка за счет развития заболеваний, изучение влияния фармакологических препаратов на опорожнение желудка и последующей реакции опорожнения желудка для лечения основного заболевания или дефекты, 6,8, 11,12. В предыдущих публикациях, применения 13 C октановой кислоты тесты дыхание было показано, быть полезным способом измерения опорожнение желудка у человека и животных 3,8. Эта статья подробно....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
1. Обучение и привыкание Мыши
- Перед проведением анализа, поставить всех мышей в тестировании камеры в течение 2-4 часов с постоянным воздуха для того, чтобы приучить их к тестированию условиях. Это заметно снижает уровень стресса, которые могли бы привести к аберрантной обнаружения задержкой опорожнения желудка. Лечение мышей так же, как если опорожнение желудка эксперимент был запущен. Подготовка яичным желтком (см. далее) без добавления октановой кислоты и 0,2 г корм для каждой мыши.
- Повторите этот процесс до мышей достаточную подготовку (обычно 2-3 раза). Мыши обычно легко привыкли тех пор, пока условия окружающей среды сохраняются.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
Представитель набор данных с трех разных мышах показано на рисунке 2. Черная графика представляет точек данных от мыши с нормальным опорожнения желудка. Он показывает, доля 13 C, который подлежит возврату в выдыхаемом воздухе выражается в процентах от введенной дозы в час выражена как функция времени. Синяя кривая от мышей с ускоренным опорожнения желудка с T значение половине 40 мин, а красная кривая от мыши с задержкой опорожнения желудка с T значение половине 168 мин. Как установлено в ход.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
Описанная методика позволяет здесь для многократного и неинвазивные в естественных условиях измерений твердых опорожнения желудка у мышей. Эта система имеет то преимущество, что животные не стеснены в измерительной камере, что позволяет им двигаться и вращаться свободно. Так как это незнакомой обстановке, мыши все еще должны быть обучены и привыкли к тестированию камер, чтобы предотвратить влияние стресса на опорожнение желудка. В общем, мы предполагаем, что опорожнение желудка данные являются достоверными, есл.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
Авторы заявляют, что у них нет конкурирующих финансовых интересов.
Благодарности
Это видео публикация стала возможной благодаря финансированию из Национального института диабета, желудочно-кишечных и почечных заболеваний (NIDDK) по программе гранта "патобиологии кишечной системы" DK 68055. Кристофер Т. Creedon была поддержана общественностью Rochester Программа наставничества школы.
Мы благодарим г-н Гэри Штольц для оказания технической помощи, г-жа Кристи Zodrow на секретарскую помощь и д-р Дуглас Baer из Лос-Gatos Research, Inc (Mountain View, CA).
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| NAME | КОМПАНИЯ | CAT НОМЕР | КОММЕНТАРИИ |
| Источник постоянного воздушного питания, потока, а также состав | центральная подача воздуха в научно-исследовательский центр | ||
| 130 мл выборки камеру, которая имеет воздуха, отвод воздуха, пищи и открытия администрации Пластиковые трубы для подачи воздуха | В доме, построенном | ||
| Октановая кислота | Cambridge изотопных лабораторий (Andover, MA) | CLM-293-1 | |
Для приготовления яйца пищи:
| Любой поставщик | Попробуйтесогласовываться с яйцом поставщика, так как питательную ценность и вкусовые качества яиц может повлиять прием пищи и опорожнение желудка от приема пищи | |
| Диоксид углерода изотопа анализатора | Los Gatos исследований Inc (Mountain View, CA) |
Ссылки
- Yeung, C. K., McCurrie, J. R. A simple method to investigate the inhibitory effects of drugs on gastric emptying in the mouse in vivo. J. Pharmacol. Toxicol. Methods. 45, 235-240 (2001).
- Osinski, M. A., Seifert, T. R., Cox, B. F., Gintant, G. A.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
