В этом выпуске Эстрейхер (Oestreicher) и соавторы показывают, как выделить магнитотактические бактерии из проб пресной воды и сконцентрировать их на одном конце стеклянного капилляра. Затем магнитотактические бактерии можно визуализировать с помощью световой и просвечивающей электронной микроскопии, а также использовать в различных других анализах. Также в выпуске за ноябрь 2012 года Боланд (Boland) и соавторы демонстрируют, как перепрограммировать фибробласты в индуцированные плюрипотентные стволовые клетки (иПСК) и как изолировать линии иПСК для введения в тетраплоидные бластоцисты, как это было показано ранее в JoVE. Хотя пипетирование ртом обычно не рекомендуется из-за возможных негативных последствий, данный протокол требует применения этой техники (при условии осторожного выполнения) для манипуляций с эмбрионами. Это один из редких случаев, когда пипетирование ртом в лаборатории допустимо. Если индуцированные клетки полностью плюрипотентны, они могут привести к развитию полноценных мышей, полностью производных от иПСК. В JoVE Neuroscience Херманн (Heermann) и Кригльштайн (Krieglstein) демонстрируют метод визуализации развития шванновских клеток вдоль растущих аксонов. Для этого авторы культивируют эксплантаты шейных ганглиев на коллагеновых матрицах и обрабатывают их фактором роста нервов или другими веществами. Затем коллагеновые гели можно визуализировать с помощью таймлапс-съемки при флуоресцентной или светлопольной микроскопии, наблюдая за миграцией клеток вдоль аксонов к периферии. Также в JoVE Neuroscience Хоффманн (Hoffmann) и соавторы надевают крошечные наушники на певчих птиц, чтобы изучить, как те используют слуховую обратную связь для корректировки своего пения. Авторы демонстрируют, как сконструировать наушники и закрепить их на голове птицы; затем, регулируя акустический сигнал, они могут изучать вычислительные и нейрофизиологические основы вокального обучения у птиц. В JoVE Clinical & Translational Medicine Иенгар (Iyengar) и соавторы используют модель опухоли на zebrafish (данио-рерио) для изучения генов, которые могут модифицировать патогенез меланомы. Это осуществляется путем создания трансгенных zebrafish, экспрессирующих интересующий ген. Затем можно провести различные анализы, чтобы изучить, как разные гены влияют на меланому, включая время её возникновения, инвазию и трансплантируемость. В JoVE Bioengineering Мартин (Martin) и соавторы демонстрируют метод скольжения для измерения изгибной жесткости биополимеров (например, микротрубочек). Закрепляя моторные белки на предметном стекле микроскопа и добавляя меченные флуоресцентом микротрубочки, авторы могут анализировать динамику цитоскелетных полимеров. В данном обзоре представлены лишь некоторые из примечательных видеостатей в выпуске JoVE за ноябрь 2012 года. Посещайте наш ресурс в течение ноября, чтобы ознакомиться с полными версиями этих и многих других статей. и др. показывают, как выделить магнетотактические бактерии из проб пресной воды и сконцентрировать их на одном конце стеклянного капилляра. Затем магнетотактические бактерии можно визуализировать с помощью световой и просвечивающей электронной микроскопии, а также использовать в различных других анализах.
Также в выпуске за ноябрь 2012 года Boland et al. демонстрируют, как перепрограммировать фибробласты в индуцированные плюрипотентные стволовые клетки (iPSCs), и как изолировать линии iPSCs для инъекции в тетраплоидные бластоцисты, как было показано ранее в JoVE. Хотя пипетирование ртом обычно не рекомендуется из-за возможных негативных последствий, данный протокол требует применения этой техники при условии осторожного выполнения для манипуляций с эмбрионами. Это один из редких случаев, когда пипетирование ртом в лаборатории допустимо. Если индуцированные клетки полностью плюрипотентны, в результате могут быть получены полноценные мыши, полностью производные от iPSCs.
В JoVE Neuroscience Heermann и Krieglstein демонстрируют метод визуализации развития клеток Шванна вдоль растущих аксонов. Для этого авторы культивируют экспланты шейных ганглиев на коллагеновых матрицах и обрабатывают экспланты фактором роста нервов или другими веществами. Затем коллагеновые гели можно визуализировать с помощью таймлапс-съемки при флуоресцентной или светлопольной микроскопии, наблюдая за миграцией клеток вдоль аксонов к периферии.
Также в JoVE Neuroscience Хоффманн и др. надели на певчих птиц крошечные наушники, чтобы изучить, как они используют слуховую обратную связь для корректировки своего пения. Авторы демонстрируют, как сконструировать наушники и закрепить их на голове птицы; затем, регулируя акустический сигнал, они могут изучать вычислительные и нейрофизиологические основы вокального обучения у птиц.
В JoVE Clinical & Translational Medicine Iyengar et al. используют модель опухоли на рыбках данио-рерио для изучения генов, способных модифицировать патогенез меланомы. Это осуществляется путем предварительного создания трансгенных данио-рерио, экспрессирующих интересующий ген. Затем можно провести различные анализы, чтобы изучить, как разные гены влияют на меланому, включая ее возникновение, инвазию и трансплантабельность.
В JoVE Bioengineering Martin et al. демонстрируют метод анализа скольжения для измерения изгибной жесткости биополимеров (таких как микротрубочки). Прикрепляя моторные белки к предметному стеклу микроскопа и добавляя флуоресцентно меченные микротрубочки, авторы могут анализировать динамику полимеров цитоскелета.
В этом превью представлены лишь некоторые примечательные видеостатьи из выпуска JoVE за ноябрь 2012 года. Заходите к нам в течение ноября, чтобы ознакомиться с полными версиями этих и многих других статей.