Методическая статья

Формирование упорядоченных биомолекулярных структур по самосборки коротких пептидов

DOI:

10.3791/50946

⸱

21 ноября 2013 г.

 , 
1Institute of Chemistry and The Center for Nanoscience and Nanotechnology, The Hebrew University of Jerusalem

В этой статье

Краткое содержание

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Эта статья описывает формирование высокоупорядоченных на основе пептидов структур по стихийного процесса самосборки. Метод использует имеющиеся в продаже пептиды и общего лабораторного оборудования. Этот метод может быть применен к большому разнообразию пептидов и может привести к обнаружению новых основе пептидов сборок.

Аннотация

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

В природе, сложные функциональные структуры образованы самосборки биомолекул в мягких условиях. Понимание силы, которые управляют самосборки и имитировать этот процесс в пробирке будет привести к значительным достижениям в области материаловедения и нанотехнологий. Среди доступных биологический строительных блоков, пептиды имеют ряд преимуществ, как они представляют значительную разнообразие, их синтез в больших масштабах проста, и они могут быть легко изменены с биологических и химических образований 1,2. Несколько классов, предназначенных пептидов, таких как циклические пептиды, амфифильные пептиды и конъюгаты пептида самосборке в упорядоченные структуры в растворе. Homoaromatic дипептиды, представляют собой класс коротких самособирающихся пептидов, которые содержат всю молекулярную информацию, необходимую для формирования упорядоченные структуры, такие как нанотрубки, сфер и фибрилл 3-8. Большое разнообразие этих пептидов является коммерчески доступным. 9 Протоколы представленные здесь могут быть адаптированы к другим классам пептидов или биологическая строительных блоков и потенциально может привести к открытию новых пептидных структур на основе и лучше контролировать их сборки.

Введение

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Природа формы заказаны и функциональных структур в процессе биомолекулярной самостоятельной сборки. Понимание силы, которые управляют этой стихийный процесс может привести к способности имитировать самосборки в пробирке и, следовательно, к значительному прогрессу в области материаловедения 10,11. Пептиды, в частности, весьма перспективны в качестве биомолекул строительного блока, так как они представляют большой структурное разнообразие, простоту химического синтеза, и может быть легко функционализированных биологических и химических образований. Поле пептидной самосборки был впервые Гадири и его коллег, которые продемонстрировали самосборки пептидных нанотрубок циклических пептидов с чередующимися D-и L-аминокислоты 12. Другие успешные подходы к проектированию пептидных сборок включают линейные bolaamphiphile пептиды 5, амфифилы (AP) 6, несопряженные самодополнительных ионные пептиды 13, поверхностно-как пептиды 4,14, и диблочный copolypeptides 15.

В последнее время подход включает самосборки коротких ароматических пептидов, называется homoaromatic дипептиды. Эти пептиды содержат только две аминокислоты с ароматический характер (например Phe-Phe, трет-бутилдикарбоната (Boc)-Phe-Phe) 7,8,16-21. Структуры, образованные этими homoaromatic пептидов включают трубчатые структуры, сферы, листообразных узлов и волокон 6,8,15,21-32. Волокна в некоторых случаях генерировать фибрилл сетку, который дает гидрогель 33-37. Эти сборки были использованы для применений биодатчиков, доставки лекарств, молекулярной электроники и т.д.. 38-45

Эта статья описывает экспериментальные шаги, необходимые для того, чтобы начать спонтанное самосборки homoaromatic пептидов. Кроме того, он представляет процесс пептида coassembly. Этот процесс включает в самосборки более чем одного типа пептидамономер.

Наша демонстрация включает coassembly двух коммерчески доступных пептидов: дифенилаланин пептид (NH 2-Phe-Phe-COOH) и его Вос-защищенный аналог (Boc-Phe-Phe-OH). Каждый из пептидов объединяющаяся в надмолекулярной структурой: дифенилаланин пептидные форм трубчатые сборками и Вос-Phe-Phe-OH пептидные объединяющаяся в либо сфер или волокон в зависимости от растворителя 7,17,46. Мы смешал два пептида в определенных соотношениях и характеризуется приведенных сборок с помощью электронной микроскопии, силовой микроскопии и ИК-спектроскопии. Методы продемонстрировали формирование структуры на основе пептидов, которая состоит из сферических элементов с диаметром в несколько микрон (1-4 мкм), которые соединены удлиненных сборок с диаметром несколько сотен нанометров (~ 300-800 нм) . Сборки напоминают бисером строк в их морфологии, а сферические структуры, кажется, с резьбой наудлиненные сборки. Поэтому мы назвали эти сборки "биомолекулярные ожерелья". В "биомолекулярные ожерелья" может служить в качестве нового биоматериала, как доставки лекарств агента или в качестве каркаса для электронных приложений. Кроме того, процесс, который приводит к самосборке пептидов могут быть использованы с другими классами пептидов и биомолекул. Это может привести к лучшему пониманию сил, участвующих в самостоятельной сборки и формирования новых упорядоченных структур.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. Самосборка Homoaromatic дипептидов

  1. Взвесить желаемый пептид в лиофилизированной форме (например, NH 2-Phe-Phe-OH, Boc-Phe-Phe-COOH) и Подготовка исходного раствора путем растворения пептида в 1,1,1,3,3,3-гексафтор -2-пропанол (HFP) до соответствующей концентрации (например, 100 мг / мл для NH 2-Phe-Phe-OH и Boc-Phe-Phe-COOH) 7,17,46.
  2. Смешайте раствор с помощью вихря и место на скамейке, пока пептид полностью не растворится и раствор кажется очевидным (несколько минут).
  3. Развести маточного раствора пептида, в подходящем растворителе, до соответствующей концентрации (например, 2 мг / мл NH 2-Phe-Phe-OH в тройной дистиллированной воде (TDW) для формирования нанотрубок; добавлением 2 мкл пептида Исходный раствор до 98 мкл TDW, 5 мг / мл Вос-Phe-Phe-COOH в этаноле для формирования сферических структур).
  4. Держите раствора при комнатной температуре в течение 24ч.
  5. Для того чтобы избежать любого preaggregation, готовят свежие растворы для каждого эксперимента.

2. Coassembly о двух Homoaromatic дипептидов

  1. Готовят раствор 50%-ного этанола путем смешивания равных объемов TDW и абсолютного этанола. Используйте вихрь смешивать два решения.
  2. Взвесить 2 мг пептида NH 2-Phe-Phe-OH и 1 мг пептида Boc-Phe-Phe-OH. Растворить каждого пептида в HFP до концентрации 100 мг / мл.
  3. Смешайте пептиды растворы с использованием вихрь и разместить их на скамейке, пока пептиды не полностью растворяются и решения кажутся понятными.
  4. Смесь пептидов растворы в желаемом соотношении. В этом конкретном эксперименте смесь 10 мкл пептида NH 2-Phe-Phe-OH с 6 мкл пептида Boc-Phe-Phe-OH (до конечной соотношении 5:03 соответственно). В связи с высокой волатильностью растворителя HFP, рекомендуется подготовить большое количество этого раствора (на лугул 10 мкл).
  5. Используйте вихрь смешивать смешанные пептиды маточного раствора.
  6. Развести смешанные пептиды исходного раствора с 50%-ным этанолом до желаемой конечной концентрации. В этом конкретном эксперименте, чтобы получить конечную концентрацию 5 мг / мл в течение NH 2-Phe-Phe-OH и 3 мг / мл в течение Boc-Phe-Phe-OH соответственно, добавляют 8 мкл смешанного раствора пептидов до 92 мкл 50% раствора этанола. Используйте пипетку, чтобы мягко перемешать раствор.
  7. Хранить раствор при комнатной температуре в течение 24 часов.
  8. Следует отметить, что в связи с высоко летучей природы растворителя, эксперименты чувствительны к небольшим изменениям концентрации пептидов. Поэтому свежие растворы должны быть готовы для каждого эксперимента.

3. Характеристика из самоорганизующихся структур с помощью сканирующей электронной микроскопии (SEM)

  1. Через 24 ч инкубации наносить каплю 10 мкл раствора пептидов на стеклянной бухтыг скольжения и сухой при комнатной температуре.
  2. Пальто образец на стекло с тонким слоем золота (несколько нанометров) с использованием покрыти распылением в течение 90 сек.
  3. Изображение сборки с использованием СЭМ работает на 10-20 кВ.

4. Характеристика из самоорганизующихся структур с помощью просвечивающей электронной микроскопии (ПЭМ)

  1. Поместите каплю 10 мкл пептидов раствора на 200 меш медную сетку, покрытой углеродом и стабилизированной опоры полимерной пленки.
  2. После 1 мин удалить лишнюю жидкость с использованием фильтровальной бумаги.
  3. Приготовьте раствор 2% уранилацетатом в TDW. Фильтр решение с помощью блока фильтров 0,22 мкм.
  4. Чтобы окрасить образец (отрицательный окрашивания), поместите каплю 10 мкл уранилацетатом решения по сетке.
  5. После 30 сек удалить лишнюю жидкость с помощью фильтровальной бумаги. Следует отметить, что, хотя отрицательный окрашивание повышает контрастность изображений, это не является необходимым во всех случаях.
  6. Изображение образец на гоэ сетки с помощью ПЭМ, работающих на 120 кВ.

5. Трехмерная Характеристика Ассамблей атомно-силовой микроскопии (АСМ)

  1. Подготовка пробы для анализа АСМ с использованием процедуры, описанной в пункте 3.1.
  2. Проанализируйте пробу на стекле с помощью инструмента АСМ работает в режиме переменного тока. Использование кремниевых кантилеверов с пружины 3 н / м и резонансной частотой 75 кГц.
  3. Начните путем сканирования большую площадь сетки, чтобы найти желаемую структуру. Тогда сосредоточиться на конкретной меньшей площади и сканирования (размер сканирования составляла 2,5 мкм х 2,5 мкм для изображения, включенные в этой рукописи).

6. Характеристика вторичной структуры по ИК-Фурье

  1. Нанесите каплю 30 мкл раствора пептидов к окну CaF 2.
  2. Разрешить решение сохнуть при комнатной температуре.
  3. Адсорбция воды в спектре ИК в 1650 см -1.Этот пик в центре амидной группы I пептидной связи. Это также типичная пик α-спиральные структуры пептидов и белков 47. Для того чтобы преодолеть эту проблему и избежать сигнал воды, обмен водорода к дейтерия должна быть выполнена. Поместите каплю оксида дейтерия (D 2 O) на высушенного образца пептида. Падение должно быть достаточно большим, чтобы полностью покрыть пептида депозит на окне.
  4. Разрешить образец сушить под вакуумом.
  5. Повторите шаги 6.3 и 6.4 2x для обеспечения максимального обмена водорода к дейтерия. Сохранить образец под вакуумом до ее анализа.
  6. Запишите спектры ИК-Фурье с использованием дейтерированного триглицинсульфата (DTGS) детектора. Система FT-ИК-спектр включает генератор продувочного газа, чтобы предотвратить влажности в среде образца. Для образцов коротких пептидов, то лучше для сканирования образца 2000 х при разрешении 4 см -1. Пропускание минимальные значения могут быть определены таким образомftware поставляется вместе с прибором.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Эта статья описывает способ формирования упорядоченных структур в нано-и микронных масштабах по самосборки пептидов. Для того чтобы продемонстрировать это простой процесс, мы представляем и охарактеризовать coassembly двух простых ароматических пептидов (рис. 1). Один из пептидов является NH 2-Phe-Phe-OH (дифенилаланин) пептид, который может самосборке в водном растворе в полых трубчатых структур нанометровых размеров с 7. Другой пептид является его Вос-защищенный аналог, Boc-Phe-P...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Таким образом, эта статья демонстрирует легкость, в котором на основе пептидов сборки могут быть сформированы в пробирке. Процесс включает в себя коммерчески доступные пептиды и растворители, и это происходит спонтанно в условиях окружающей среды, при добавлении полярном растворителе в пробирке. Очень важно использовать HFP качестве растворителя пептидов, из-за низкой растворимости пептидов в других органических растворителей. Кроме того, из-за высокой летучести HFP необходимо готовить свежий исходный раствор д...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Авторы заявляют, что они не имеют конкурирующие финансовые интересы.

Благодарности

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Эта работа была поддержана Марии Кюри Международного реинтеграции Грант и Фондом немецко-Израиль. Мы признаем, г-Яир Razvag для анализа АСМ.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
NH2-Phe-Phe-OHBachemG-2925.0001
Boc-Phe-Phe-OHBachemA-3205.0005
1,1,1,3,3,3-гексафтор-2-пропанолSigma-Aldrich52512-100ML
Этанол абсолютный (обезвоженный) AR стерильныйBio-Lab Ltd.52555Смешивание с TDW для приготовления 50% раствора
уранилацетатаSigma-Aldrich73943Для негативного окрашивания. Есть возможность работать и без него.
Стеклянная крышкаМариенфельд Лабораторная посуда110590
TEM сеткиЭлектронная микроскопия наукиFCF200-Cu-50Формвар/Углерод 200 меш, Cu
Количественная фильтровальная бумагаВатман1001055
оксид дейтерия (D<суб>2O)Sigma-Aldrich151882-100G99,9 атом % D
CaF<суб>2 окноPIKE Technologies160-1212окно 25 мм х 2 мм. Для ИК-Фурье измерений
АСМ-наконечникиNanoScience InstrumentsCFMRAspire зонды, фильтрующие блоки CFMR-25
MilliporeSLGV033RSMillex-GV, 0,22 μ m, PVDF, 33 мм, гамма стерилизованный
SEM FEIQuanta 200 ESEM
TEMFEITecnai T12 G2 Spirit
AFMJPK InstrumentsA JPK NanoWizard3
FT-IRThermo Fisher ScientificNicolet 6700 усовершенствованный золотой спектрометр
FT-IR PurgeParkerBALSTON FT-IR Генератор продувочного газа модель 75-52
Программное обеспечение OMNIC (Nicolet)Thermo Nicolet CorporationДля анализа ИК-Фурье спектров
Вихревой смесительWisd Лабораторное оборудованиеViseMix VM
WeightMettler ToledoNewClassic MS
Sputter CoaterPolaronSC7640 Sputter Coater

Ссылки

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Rajagopal, K., Schneider, J. P. Self-assembling peptides and proteins for nanotechnological applications. Curr. Opin. Struc. Biol. 14, 480-486 (2004).
  2. Ulijn, R. V., Smith, A. M. Designing peptide based nanomaterials. Chem. Soc. Rev. 37, 664-675 (2008).
  3. Bong, D. T., Clark, T. D., Granja, J. R., Ghadiri, M. R. Self-assembling organic nanotubes. Angew. Chem. Int. Ed. 40, 988-1011 (2001).
  4. Vauthey, S., Santoso, S., Gong, H. Y., Watson, N., Zhang, S. G. Molecular self-assembly of surfactant-like peptides to form nanotubes and nanovesicles. P. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 99, 5355-5360 (2002).
  5. Matsui, H., Gologan, B. Crystalline glycylglycine bolaamphiphile tubules and their pH-sensitive structural transformation. J. Phys. Chem. B. 104, 3383-3386 (2000).
  6. Hartgerink, J. D., Beniash, E., Stupp, S. I. Self-assembly and mineralization of peptide-amphiphile nanofibers. Science. 294, 1684-1688 (2001).
  7. Reches, M., Gazit, E. Casting metal nanowires within discrete self-assembled peptide nanotubes. Science. 300, 625-627 (2003).
  8. Reches, M., Gazit, E. Molecular self-assembly of peptide nanostructures: mechanism of association and potential uses. Curr. Nanosci. 2, 105-111 (2006).
  9. Yuran, S., Razvag, Y., Reches, M. Coassembly of Aromatic Dipeptides into Biomolecular Necklaces. ACS Nano. 6, 9559-9566 (2012).
  10. Zhang, S. G. Emerging biological materials through molecular self-assembly. Biotechnol. Adv. 20, 321-339 (2002).
  11. Zhang, S. G. Fabrication of novel biomaterials through molecular self-assembly. Nat. Biotechnol. 21, 1171-1178 (2003).
  12. Hartgerink, J. D., Granja, J. R., Milligan, R. A., Ghadiri, M. R. Self-assembling peptide nanotubes. J. Am. Chem. Soc. 118, 43-50 (1996).
  13. Holmes, T. C., et al. Extensive neurite outgrowth and active synapse formation on self-assembling peptide scaffolds. P. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 97, 6728-6733 (2000).
  14. Santoso, S., Hwang, W., Hartman, H., Zhang, S. G. Self-assembly of surfactant-like peptides with variable glycine tails to form nanotubes and nanovesicles. Nano Lett. 2, 687-691 (2002).
  15. Bellomo, E. G., Wyrsta, M. D., Pakstis, L., Pochan, D. J., Deming, T. J. Stimuli-responsive polypeptide vesicles by conformation-specific assembly. Nat. Mater. 3, 244-248 (2004).
  16. Reches, M., Gazit, E. Formation of closed-cage nanostructures by self-assembly of aromatic dipeptides. Nano Lett. 4, 581-585 (2004).
  17. Reches, M., Gazit, E. Self-assembly of peptide nanotubes and amyloid-like structures by charged-termini-capped diphenylalanine peptide analogues. Isr. J. Chem. 45, 363-371 (2005).
  18. Park, J., Kahng, B., Kamm, R. D., Hwang, W. Atomistic simulation approach to a continuum description of self-assembled beta-sheet filaments. Biophys. J. 90, 2510-2524 (2006).
  19. Yan, X., et al. Reversible transitions between peptide nanotubes and vesicle-like structures including theoretical modeling studies. ChemEur. J. 14, 5974-5980 (2008).
  20. Yan, X., et al. Transition of cationic dipeptide nanotubes into vesicles and oligonucleotide delivery. Angew. Chem. Int. Ed. 46, 2431-2434 (2007).
  21. Burkoth, T. S., et al. Structure of the beta-amyloid (10-35) fibril. J. Am. Chem. Soc. 122 (10-35), 7883-7889 (2000).
  22. Aggeli, A., et al. Hierarchical self-assembly of chiral rod-like molecules as a model for peptide beta-sheet tapes, ribbons, fibrils, and fibers. P. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 98, 11857-11862 (2001).
  23. Hamley, I. W. Peptide fibrillization. Angew. Chem. Int. Ed. 46, 8128-8147 (2007).
  24. Maji, S. K., Haldar, D., Drew, M. G. B., Banerjee, A., Das, A. K. Self-assembly of beta-turn forming synthetic tripeptides into supramolecular beta-sheets and amyloid-like fibrils in the solid state. Tetrahedron. 60, 3251-3259 (2004).
  25. Jahn, T. R., Parker, M. J., Homans, S. W., Radford, S. E. Amyloid formation under physiological conditions proceeds via a native-like folding intermediate. Nat. Struct. Mol. Biol. 13, 195-201 (2006).
  26. Shimada, T., Sakamoto, N., Motokawa, R., Koizumi, S., Tirrell, M. Self-assembly process of peptide amphiphile worm-like micelles. J. Phys. Chem. B. 116, 240-243 (2012).
  27. Sedman, V. L., et al. Surface-templated fibril growth of peptide fragments from the shaft domain of the adenovirus fibre protein. Protein Pept. Lett. 18, 268-274 (2011).
  28. Choi, S. -j, et al. Differential self-assembly behaviors of cyclic and linear peptides. Biomacromolecules. 13, 1991-1995 (2012).
  29. Ghosh, S., Reches, M., Gazit, E., Verma, S. Bioinspired design of nanocages by self-assembling triskelion peptide elements. Angew. Chem. Int. Ed. 46, 2002-2004 (2007).
  30. Li, L. C., et al. Self-assembling nanotubes consisting of rigid cyclic gamma-peptides. Adv. Funct. Mater. 22, 3051-3056 (2012).
  31. Krysmann, M. J., et al. Self-assembly of peptide nanotubes in an organic solvent. Langmuir. 24, 8158-8162 (2008).
  32. Segman-Magidovich, S., et al. Sheet-like assemblies of charged amphiphilic alpha/beta-peptides at the air-water interface. ChemEur. J. 17, 14857-14866 (2011).
  33. Jayawarna, V., et al. Nanostructured hydrogels for three-dimensional cell culture through self-assembly of fluorenylmethoxycarbonyl-dipeptides. Adv. Mater. 18, 611-614 (2006).
  34. Mahler, A., Reches, M., Rechter, M., Cohen, S., Gazit, E. Rigid, self-assembled hydrogel composed of a modified aromatic dipeptide. Adv. Mater. 18, 1365-1368 (2006).
  35. Ryan, D. M., Doran, T. M., Anderson, S. B., Nilsson, B. L. Effect of C-terminal modification on the self-assembly and hydrogelation of fluorinated Fmoc-Phe derivatives. Langmuir. 27, 4029-4039 (2011).
  36. Jung, J. P., Gasiorowski, J. Z., Collier, J. H. Fibrillar peptide gels in biotechnology and biomedicine. Biopolymers. 94, 49-59 (2010).
  37. Xing, B. G., et al. Hydrophobic interaction and hydrogen bonding cooperatively confer a vancomycin hydrogel: A potential candidate for biomaterials. J. Am. Chem. Soc. 124, 14846-14847 (2002).
  38. Gore, T., Dori, Y., Talmon, Y., Tirrell, M., Bianco-Peled, H. Self-assembly of model collagen peptide amphiphiles. Langmuir. 17, 5352-5360 (2001).
  39. Ashkenasy, N., Horne, W. S., Ghadiri, M. R. Design of self-assembling peptide nanotubes with delocalized electronic states. Small. 2, 99-102 (2006).
  40. Mizrahi, M., Zakrassov, A., Lerner-Yardeni, J., Ashkenasy, N. Charge transport in vertically aligned, self-assembled peptide nanotube junctions. Nanoscale. 4, 518-524 (2012).
  41. Ryu, J., Lim, S. Y., Park, C. B. Photoluminescent peptide nanotubles. Adv. Mater. 21, 1577-1581 (2009).
  42. Ryu, J., Kim, S. -W., Kang, K., Park, C. B. Synthesis of diphenylalanine/cobalt oxide hybrid nanowires and their application to energy storage. ACS Nano. 4, 159-164 (2010).
  43. Yan, X., Zhu, P., Li, J. Self-assembly and application of diphenylalanine-based nanostructures. Chem. Soc. Rev. 39, 1877-1890 (2010).
  44. Amdursky, N., et al. Blue luminescence based on quantum confinement at peptide nanotubes. Nano Lett. 9, 3111-3115 (2009).
  45. Maity, S., Jana, P., Maity, S. K., Haldar, D. Mesoporous vesicles from supramolecular helical peptide as drug carrier. Soft Matter. 7, 10174-10181 (2011).
  46. Adler-Abramovich, L., et al. Self-assembled organic nanostructures with metallic-like stiffness. Angew. Chem. Int. Ed. 49, 9939-9942 (2010).
  47. Pelton, J. T., McLean, L. R. Spectroscopic methods for analysis of protein secondary structure. Anal. Biochem. 277, 167-176 (2000).
  48. Haris, P. I., Chapman, D. The conformational analysis of peptides using fourier-transform IR spectroscopy. Biopolymers. 37, 251-263 (1995).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE

Запросить разрешение

Теги

Похожие статьи