Модель мыши эндоскопической основания черепа реконструкции человеческого была разработана, что создает полупроницаемую интерфейс между мозгом и носа с использованием слизистой оболочки носа трансплантатов. Этот метод позволяет исследователей изучать доставку в центральной нервной системе высоких терапевтических молекулярной массой, которые в противном случае исключенных гематоэнцефалический барьер при системном введении.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Гетеротопическая слизистой Процедура прививку для прямого доставки лекарств в мозг у мышей
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Доставка терапии в мозг препятствует присутствии гематоэнцефалического барьера (ГЭБ), который ограничивает прохождение полярных и высокомолекулярных соединений из крови и в ткани головного мозга. Некоторые прямой успех доставка в людях было достигнуто с помощью имплантации транскраниальной катетеров; Однако этот метод является высоко инвазивными и связано с многочисленными осложнений. Менее инвазивные альтернативы можно было бы дозировать мозг через хирургически имплантированных, полупроницаемую мембрану, таких как слизистой оболочки носа, которая используется для ремонта основания черепа дефекты следующие эндоскопической трансназальной опухоли операции по удалению у человека. Передача Drug хотя эта мембрана будет эффективно обойти гематоэнцефалический барьер и диффундировать непосредственно в мозг и цереброспинальной жидкости. Вдохновленный этим подходом, хирургический подход у мышей была разработана, который использует мембраны донором перегородки слизистой насаждаемое над экстракраниального хирургического BBB дефекта. Эта модель, как было показано эффективноразрешить прохождение высокомолекулярных соединений в мозге. Поскольку многочисленные лекарств-кандидатов не способны пересекать ГЭБ, эта модель является ценным для выполнения доклинических испытаний новых методов лечения неврологических и психиатрических заболеваний.
Введение
Лечение неврологических и психиатрических заболеваний сильно затруднено наличием гематоэнцефалического барьера (ГЭБ), который предотвращает более 95% всех потенциальных фармацевтических средств от достижения на центральную нервную систему 1-3. Например, глиальных нейротрофического фактора (GDNF), как было показано быть эффективным при лечении болезни Паркинсона при введении непосредственно в мозг, однако не работает, если доставляется системно, поскольку она не может проникнуть через ВВВ 4-6.
Многочисленные подошел были разработаны, чтобы попытаться обойти эту проблему. Улучшение системной доставки neurotheraputics б....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
До операции убедитесь, что все процедуры, которые необходимо сделать утверждаются IACUC и любые дополнительные этических или юридических органов и использовать гуманные методы лечения животных. Это включает в себя использование стерильных условий хирургии, анестезии мышь с помощью IACUC утвержден метод, смазочные мышей глаза ветеринара мази во время операции, а также предоставление послеоперационный уход. Не приступайте к операции, если есть какие-либо вопросы, будут ли утверждены аспекты процедуры. Все процедуры, проводимые здесь были утверждены Комитетом Бостонского университета Институциональные уходу и использованию животных в.
1. Подго....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
Получение достаточно большой носовой перегородки эксплантов имеет решающее значение для последующих стадиях. Это может быть достигнуто путем бурения на месте на черепа мыши-донора в показано на фиг.1А. Режущий по этому пути будет производить эксплантов достаточного размера, как показано на рисунке 1b. Если глубина бурения не достаточно глубоко, трансплантат будет усеченным, и это будет трудно получить достаточно большую мембрану, чтобы покрыть поверхность мозга. Бурение более многосторо.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
Самым сложным этапом процедуры, описанной в настоящем документе, успешная передача из мембраны адекватного размера слизистой на поверхность мозга. Этот шаг сделан значительно легче, если собирают носовой перегородки достаточно большой и убираются хорошо. Если брюшной участок перегородки обрезано, новый трансплантат должна быть получена. Угол бурение должно быть перпендикулярно к головке мыши, чтобы гарантировать, что мембрана слизистой оболочки не повреждены сверла. Если шире, чем рекомендовано бурение путь берется это .......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
Бенджамин С. Блейер MD является ведущим изобретателем временных методов патент покрывая доставки лекарств к центральной нервной системе.
Благодарности
Это исследование финансировалось Mcihael Дж. Фокс Фонд исследований 2011 Innovations Быстрого Реагирования Паркинсона Награды программы. Доноры не участвовал в разработке дизайна исследования, сбора и анализа данных, решение о публикации или подготовки рукописи.
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Мыши | Taconic | C57BL/6 | |
| Изофлуран | Пирамал Здравоохранение | ||
| Студенческие тонкие ножницы | Тонкие научные инструменты | 91461-11 | |
| Пневматическая дрель | MTI Dental | 333-CB | |
| Сверло | |||
| Щипцы | Тонкие научные инструменты | 91106-12 | |
| 0,9% Хлорид натрия для инъекций USP | Abbott Laboratories | 4925 | |
| Чашка Петри из полистирола | Fisher | 08-757-12 | для временного хранения прививки |
| Стерилизатор бусин | Fine Science Tools | 18000-45 | |
| Система кислорода/изофлурана | SurgiVet | V720100 | |
| Система контроля температуры | Physitemp | TCAT-2LV | |
| Мелкое животное стереотаксический инструмент | KOPF | Модель 940 | |
| Глазная мазь | |||
| Электробритва | |||
| Аппликаторы с ватным наконечником | Fisher | 23-400-106 | |
| 7,5% Провидон йод | Бетадин хирургический скраб | ||
| 70% этанол | |||
| Хирургическое лезвие нержавеющее | перо | 2976#10 | |
| Ручка скальпеля - #3 | Fine Science Tools | 10003-12 | |
| 3% Перекись | для чистки черепа | ||
| Vetbond тканевый клей | 3M | 1469SB | |
| Иглы | Becton, Dickinson and Company | 305176 | кончик иглы отрезан и используется также |
| Шприцы | Becton, Dickinson and Company | 309597 | |
| Нитриловые перчатки | Denville Scientific Inc | G4162 | для закрытия колодца и защиты трансплантата |
| 5-0 Нейлоновая шовная нить | |||
| Студент Хэлси иглодержатель | Fine Science Tools | 91201-13 | |
| Цианоакрилатный клей | коммерчески доступен супер клей | ||
| Стоматологический цемент набор, 1 lb, розовый непрозрачный | Stoelting | 51458 | |
| Изобутан (2-метилбутан) | Aldrich | M32631 | для ванны с сухим |
| льдом Сухой лед |
Ссылки
- Cardoso, F. L., et al. Looking at the blood-brain barrier: Molecular anatomy and possible investigation approaches. Brain Res. Rev. 64, 328-363 (2010).
- Pardridge, W. M. Drug transport across the blood-brain barrier. J. Cereb. Blood Flow Metab
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
