Методическая статья

Неинвазивная оценка сердечной патологии в экспериментальном аутоиммунного миокардита при магнитно-резонансной микроскопии изображений в мышь

9.5K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/51654

⸱

20 июня 2014 г.

 ,  ,  ,  ,  , 
1School of Veterinary Medicine and Biomedical Sciences, University of Nebraska-Lincoln, 2Department of Biological Systems Engineering, University of Nebraska-Lincoln

* These authors contributed equally

В этой статье

Краткое содержание

Это исследование демонстрирует успешное внедрение магнитно-резонансной микроскопии в качестве неинвазивного инструмента для оценки сердечных аномалий у мышей, страдающих аутоиммунным миокардитом. Данные указывают на то, что этот метод может быть использован для мониторинга прогрессирования заболевания у живых животных.

Аннотация

Миокардит это воспаление миокарда, но только ~ 10% из тех, пострадавших шоу клинических проявлений заболевания. Для изучения иммунных события миокарда травм, различные модели мыши миокардита были широко использованы. Это исследование включало экспериментального аутоиммунного миокардита (EAM), индуцированных сердечной тяжелой цепи миозина (MyHC)-α 334-352 в / J мышей; пораженные животные развивать лимфоцитарный миокардит, но без явных клинических признаков. В этой модели, полезность магнитно-резонансной микроскопии (MRM) как неинвазивного модальности определить сердечные структурные и функциональные изменения у животных, иммунизированных MyHC-α 334-352 показана. EAM и здоровые мыши были обследованы с использованием 9,4 T (400 МГц) 89 мм по вертикали ядро ​​отверстие сканера оснащен радиочастотным датчиком изображения 4 см многоножки и 100 г / см тройных градиентов оси. Сердечные изображения были получены с наркозом животных используется последовательность импульсов киношный градиент-эхо на базе, и АнимаLs контролировались дыхания и пульсоксиметрии. Анализ показал увеличение толщины стенки желудочка у мышей EAM, с соответствующим уменьшением внутреннего диаметра желудочков, по сравнению с здоровых мышей. Эти данные свидетельствуют о том, что морфологические и функциональные изменения в воспаленных сердцах может быть неинвазивным контролируется MRM в живых животных. В заключение MRM обеспечивает преимущество оценки прогрессирования и регрессии миокарда травм в заболеваний, вызванных инфекционными агентами, а также ответ на терапию.

Введение

Сердечная недостаточность является ведущей причиной смерти и миокардит является одним основной причиной сердечной недостаточности у молодых подростков 1. Большинство пациентов страдают от миокардита, симптомов заболевания болезнь спонтанно решил 2. Тем не менее, 10-20% из них могут развиваться хронические заболевания, что приводит к дилатационной кардиомиопатии (DCM) 3. Различные модели на животных были разработаны для изучения иммунной патогенез миокардита. Заболевание может быть вызвано в миокардит подвержены A / J и линии BALB / C мышей путем иммунизации животных с сердечной тяжелой цепи миозина (MyHC)-α или его пептидные фрагменты иммунодоминантные или заражение патогенами, как Коксаки В3 4-9. Это исследование включает MyHC-α 334-352-индуцированный миокардит в / J мышей. Несмотря на показ миокарда проникновение, миокардит пострадавших животных появляются клинически здоровыми; Диагноз основывается на гистологического исследования сердца для воспаления 7 ай эхокардиография 10.

Магнитно-резонансная микроскопия (MRM) является широко используемым методом получения сердечно-сосудистой визуализации с высоким разрешением трехмерных плоскостей, что позволяет оценку функциональных деталей до уровня мелких кровеносных сосудов (диаметр до 10 мкм), но этот уровень разрешающей способности является недостижимо при рутинной магнитно-резонансной томографии (МРТ) процедуры сканирования, в котором, разрешение, как правило, полученного до 1 мм 11-14. MRM имеет преимущество, так как позволяет приобретение изображений с высоким разрешением, а также для получения параметров производительности в ранние моменты времени процесса болезни 14. Клинически изображений МРМ была широко применяются для изучения функциональных параметров больного сердца, легких или мозга 15-17. В этом исследовании, использование в технике MRM как неинвазивного инструмента для выяснения сердечные аномалии в / J мышей, пораженных аутоиммунного миокардита показано. В частности, тон MRM изображения позволяет количественное функциональных параметров, таких как левого желудочка (ЛЖ) конечно-диастолического объема и фракции выброса (ФВ) с достаточной степенью точности 18. Определения соответствующих параметров: LV конец диастолический объем, объем крови в левом желудочке в конце диастолической цикла и фракции выброса, ударный объем / конечный диастолический объем. Анализ данных выполняется с использованием свободно распространяемого программного обеспечения сегмента, разработанный для обработки DICOM-совместимых сердечно-сосудистых изображений, полученных с помощью магнитных резонансных сканеров 19. Данные показали увеличение толщины стенки ЛЖ в миокардитического животных, что соответствует уменьшению Л.В. конечного диастолического объема, ударного объема и фракции выброса, по сравнению с этими функциональными параметрами у здоровых мышей.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

ЭТИКА ЗАЯВЛЕНИЕ:

Все животные процедуры были проведены в соответствии с руководящими принципами для уходу и использованию лабораторных животных и одобрены Университета Небраска-Линкольн, Lincoln, NE.

1. Индукция экспериментального аутоиммунного Миокардит

  1. Готовят раствор пептида путем растворения MyHC-α 334-352 в 1x забуференном фосфатом физиологическом растворе до конечной концентрации 2 mg/1.5 мл.
  2. Подготовьте коклюшный токсин (РТ) путем добавления 1 мл стерильной PBS 1x во флакон, содержащий 50 мкг лиофилизированного PT, чтобы получить концентрацию запас 50 нг / мкл. Возьмем 20 мкл запаса в стерильный 1,5 мл пробирку и добавить 980 мкл стерильной PBS 1x получить рабочую концентрацию 1 нг / мкл.
  3. Подготовка полном адъюванте Фрейнда (CFA), добавив 40 мг микобактерий туберкулеза H37Rv (MTB) экстракт в 10 мл CFA, чтобы получить конечную концентрацию5 мг / мл.
  4. Подготовка эмульсии пептид-CFA. ПРИМЕЧАНИЕ: Для индукции EAM, эмульсия пептид-КФА вводили в 150 мкл, содержащих 100 мкг MyHC-α 334-352 на одно животное. Например, для иммунизации мышей десять используют 1,5 мл пептида-CFA эмульсии, содержащей 1 мг MyHC-α 334-352.
    1. Для подготовки 1,5 мл эмульсии, аликвоту 750 мкл MyHC-α 334-352 раствор пептида в одном 1,5 мл трубки и КФА дополнен MTB в другую 1,5 мл трубки. Использование 3 мл Luer-Lok шприц, нарисуйте раствор пептида первый, а затем экстракта КФА / MTB.
    2. Прикрепите шприц к 3-ходовой кран, а другой выход из крана в пустую 3 мл шприц. Регулировка проходимость крана поэтому смесь пептид-CFA течет из одного шприца в другой с достаточно хорошим сопротивлением.
    3. Смешайте нажав содержимое из одного шприца в другой раз в течение ~ 1 мин, а затем поместите всю сборку на льду в течение ~ 3 мин. Повторите этоПроцедура минимум в 10 раз.
    4. Определите последовательность эмульсии, осторожно поместив крошечный капельку на стоячей воде в 100 мл стеклянный стакан. Капелька не ожидается расходятся в воду. Если это так, продолжить перемешивание до нужной консистенции не будет достигнута.
    5. Передача содержимого эмульсии с 3 мл шприцев в 1 мл Luer-Lok шприцы путем замены одного из двух 3-мл шприцы, прикрепленных к запорным краном с 1-мл шприц, и прикрепить иглу 27 G ½ до 1 мл шприца.
  5. Введите 150 мкл эмульсии пептид-CFA в Сплите доз подкожно в двух паховых областях шесть-восемь недель женщину / J мышей (~ 75 мкл каждой).
  6. Администрирование 100 мкл PT суспензии (100 нг) внутрибрюшинно каждому животному в день 0 и день после иммунизации 2.
  7. Повторите процедуру иммунизации на 7 день путем введения 150 мкл пептид-КФА эмульсии в Сплите дозах подкожно в обе стороны от тон грудины (~ 75 мкл каждой). Подготовка этой эмульсии свежий, как указано выше. Затем, на 21-й день, подвергать животных в визуализации MRM, см. шаг 3.

2. Животное Обращение

  1. Место каждого мышь в анестезирующего индукции камеры, содержащей 2% изофлуран-воздушной смеси с грелку помещен под поддерживать тепло, и передать животное специально разработанной держателя животных (рис. 1).
  2. Остановите животное в положении лежа на держателе животного так что его морда вписывается в носовом обтекателе для поддержания анестезии (рис. 1). Закрепите голову мыши с укуса-баром, прикрепленной к передним зубам мыши.
  3. Включите воздуха удар нагревателя с выпускной шланг, вставленный в вертикальный канал сканера для поддержания температуры тела животного во время эксперимента.
  4. Поддержание анестезии у 0,5 до 2% изофлуран при скорости потока 2 мл / мин в течение всего сеанса изображения. Подтверждатьанестезия с использованием метода носок щепотку, никакого движения не ожидал.
  5. Настройка пневматический датчик подушек, мыши хвост / лодыжки датчик оптоволоконный пульсоксиметрии и ректальное датчик температуры для контроля дыхания, частоты сердечных сокращений и температуры тела, соответственно (рис. 1). Примечание: Сердечная стробирования осуществляется через пульсоксиметрии, что позволяет неинвазивный мониторинг насыщения артериальной крови кислородом крови. Датчик оксиметрию импульса должна быть прикреплена к левой лодыжке, и нога должны быть закреплены с резьбой петли и в записи, чтобы поддерживать лодыжку в датчике. Изображений MRM достигается путем стробирования дыхания и сердечных сигналы без использования каких-либо контрастных агентов.

3. Приобретение изображения

  1. После подготовки животного (рис. 1), поместите курсор в центре MRM сканера с сердцем, расположенным в центре поля зрения (FOV), где магнитное поле однородность максимальна. ПРИМЕЧАНИЕ: широким отверстием(89 мм) 9,4 T с вертикальным отверстием магнит снабжен тройной оси градиентов 100 г / см и 4 см радиочастотной (РЧ) изображений катушки должна быть использована для получения высокого разрешения трехмерное (3D) изображения. Примечание: Убедитесь, что немагнитных материалов при использовании сканера МРТ.
  2. Запустить интерфейс визуализации и выберите пункт "новое исследование" из меню "изучение вариантов". Наберите "mtune" в командной строке и запустите его, чтобы подтянуть "Tune GUI". Затем выберите "Пуск Probe Tune" и нажмите на кнопку "AutoScale". Настройтесь GUI изменится, чтобы показать RFsignal. Используйте пульт ручки настройки / матч в конце катушки для настройки РФ катушки к протонной резонансной частоте (400 МГц). На вкладке "Пуск" перейдите на страницу "время предварительного" для запуска калибровки частоты и мощности, нажав на соответствующие кнопки. Нажмите кнопку XYZ (быстро) на "" вкладке "Шим изучения» вкладку, чтобы подтянуть страницу прокладок.Перейти на страницу прокладки, выберите все итераций, и нажмите кнопку прокладок для выполнения автоматического прокладок.
  3. Выберите последовательность разведчик на вкладке "Исследование" интерфейса визуализации локализации сердце мыши. На вкладке "приобрести" изменить FOV до 35 мм 2 и сохранить настройки по умолчанию аппарата. Нажмите кнопку Пуск, чтобы запустить последовательность; отрегулировать положение держателя животного, если сердце не в центре поля зрения, заново настроить РФ катушку и получить разведчиков изображения снова.
  4. Нажмите кнопку "самоцветов" кнопку последовательности на вкладке "Исследование" введите параметры измерения на соответствующей закладке "приобрести" для получения двух ортогональных плоскостях вдоль короткой оси и длинной оси сердца 20,21. ПРИМЕЧАНИЕ: Типичные параметры сбора для градиентной эхо сканирования являются: толщина среза, 1 мм; время повторения (TR), 200 мс; время эхо (TE), 2,67 мс (минимум); флип угол, 25 °; Размер матрицы в одной плоскости, 128 х 128; Поле зрения, 22 мм2; количество приобретений, 4; и ориентировочное время приобретение 1 мин и 30 сек.
  5. На вкладке "АДВ" выберите "CINE" последовательность собрать пульсоксиметрия закрытого короткой оси киношных МРТ для измерения анатомических и функциональных параметров LV. Отрегулируйте положение и угол ломтиков изображений, основанный на перспективе оси сердца при наведении мыши и перетаскивая. Введите следующие параметры изображения на вкладке "приобрести" для получения градиента эхо последовательность киношный: TR, 500 мс; Т.Е., 5 мс; Поле зрения, 22 мм 2; Матрица сбора данных, 256 х 256; толщина среза, 1 мм; количество приобретений, 8; Число кадров, 6; и время приобретение ~ 17 мин. Нажмите кнопку Пуск, чтобы начать приобретение.
  6. Преобразование полученные изображения в формате DICOM, используя клавишу "I / O" в ПО для обработки изображений и передачи соответствующих файлов в центр обработки данных для обработки.
  7. В конце процедуры визуализации, всевл мышей возможность отойти от анестезии в течение фильтр верхних-клетках. Не оставляйте без присмотра мышей, пока они не восстановить достаточную сознание поддерживать грудины лежачее положение и держать их для дальнейших исследований по мере необходимости.

4. Анализ данных Сердечной Magnetic Resonance микроскопии изображений

  1. Использование программного обеспечения Segment проанализировать анатомические и функциональные параметры LV 19. По загрузке DICOM формата киношных образов в программное обеспечение с помощью "Открыть файл (ы) изображения" подменю из меню «Файл». На GUI выберите 'MRGE' в качестве метода визуализации, «Cine» как тип изображения и «короткой оси середине желудочка» как вид изображения плоскости.
  2. Укажите сроки, которые будут использоваться на конец диастолы и конечного систолы через "Установить текущий таймфрейм покончим диастолы" и "Установить текущий таймфрейм покончим систолы" подменю в меню "Правка" соответственно.
  3. Во-первых нажмите кнопку команды "LV", а затем "ENDO" и "EPI" команда кнопки на правом нижнем панели вручную рисовать левого желудочка эндокард и эпикарда соответственно. Удалить папиллярных мышц, нажав на соответствующую кнопку команды для того, чтобы повысить точность расчетов.
  4. Прочитайте количественных параметров LV такие как диастолического объема, объема систолического, ударного объема и фракции выброса на правом верхнем панели. Щелкните левой кнопкой мыши "Разное", а затем кнопку команды "Измерение суппорт" для измерения параметров LV такие как толщины стенок и диаметра желудочка 22.
  5. Нажмите "Сохранить Оба стеки и сегментация" подменю в меню "Файл" для сохранения изображений, в том числе сегментации, в формате '. Мат' переработать изображения по мере необходимости.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

В этом докладе, полезность MRM технику как неинвазивного модальности, чтобы определить структурные и функциональные изменения в сердцах животных, пораженных EAM показано. Миокардит вызывали в / J мышей путем иммунизации животных с MyHC-α 334-352 в CFA 7, и животные были подвергнуты MRM экспериментов на 21-й день после иммунизации. Изображений MRM проводили на живых животных под наркозом изофлуран на 9,4 Т (400 МГц для протонов) с использованием 89 мм вертикального вала магнит, оборудованный тройных градиентов...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Это исследование описывает процедуру MRM и его полезность в качестве неинвазивного инструмента для установления нарушения сердечной у мышей, пораженных аутоиммунного миокардита. С гистологические особенности EAM напоминают Постинфекционный миокардит из людей, мышиные модели обычно используются, чтобы очертить иммунные механизмы миокарда травм 23-25. Тем не менее, животные страдают от миокардита появляются клинически здоровыми, и диагноз поставлен на основании гистологии при прекращении опытов 7. Жи...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

О конфликте интересов заявлено не было.

Благодарности

Эта работа была поддержана Национальным институтом здравоохранения (HL114669). CM является получателем гранта на постдокторскую исследовательскую стипендию, присуждаемого Фондом миокардита, штат Нью-Джерси.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Myhc-a 334-352 (DSAFDVLSFTAEEKAGVYK)Neopeptide, Cambridge, MAStore at 4 ° C
CFASigma Aldrich, Сент-Луис, Миссури5881Магазин по адресу 4 ° C
MTB H37Rv экстрактDifco Laboratories, Детройт, Мичиган231141Store at 4 ° C
PTList Biologicals Laboratories, Campbell, CA181Магазин at 4 ° C
1x PBSCorning, Манассас, Вирджиния21-040-CVМагазин по адресу 4 ° C
IsofluranePiramal Healthcare, Мумбаи, ИндияNDC66794-013-25
Самки мышей A/JJackson Laboratories, Bar Harbor, ME646
Luer-lok стерильный 1 мл сиррингBD, Франклин Лейкс, Нью-Джерси309628
Luer-lok стерильный 3 мл сиррингBD, Франклин Лейкс, Нью-Джерси309657
Стерильная игла, 18 гBD, Франклин Лейкс, Нью-Джерси
Стерильная игла, 27 1/2 GBD, Франклин Лейкс, Нью-Джерси305109
3-ходовой запорный кранSmiths Medical ASD, Inc. Дублин, ОгайоMX5311L
Kerlix марлевая повязка в рулонахCovidien, Мэнсфилд, Массачусетс6720
KimwipesKimberly-Clark Professional, Розуэлл, Джорджия34155
Protouch StockinetteMedline Промышленность, Мунделейн, Иллинойс30-1001
Стерильные хирургические ножницы и щипцыINOX инструмент Корпорация
МикропечьGE Healthcare, 
Система горячей и холодной терапии ThermiPAQ Theramics Corporation, Спрингфилд, Иллинойс
Рептильная нагревательная лампаEnergy Savers Unlimited, Inc. Карсон, Калифорния
3M Транспорные лентыTarget Corporation, MN
Up and Up Polymyxin B сульфат/Бацитрацин/Неомицин сульфат антибиотикмазь Target Corporation, MN
North Safety DeciDamp-2PVC поролоновые берушиNorth Safety Продукты, Smithfield, RI
Аппликатор с хлопковым наконечником, 6' ’ деревянный стержень Jorgensen Laboratories, Inc. Лавленд, Колорадо
Индукционная камера для анестезии Summit Anesthesia Solutions, Энн-Харбор, MI
Summit Anesthesia Support система для регулирования потока анестезии Summit Anesthesia Solutions, Энн-Харбор, Мичиган
Специально разработанный держатель для животныхAgilent Technologies, Санта-Клара, Калифорния
Бикфорд  Omnicon F/Air  Фильтрующий блок для анестезииA.M. Bickford, Inc. Wales Center, NY
Модуль пульсоксиметра, совместимый с МРТ системой мониторинга мелких животных и стробирования Small Animal Instruments, Inc. Стоуни Брук, Нью-Йорк
Кислородный баллон Matheson-Tri Gas, Северо-Центральная зона, Линкольн, NE
Газовый регулятор Western Medica, Уэст-Лейк, Огайо
Модуль прерывания сигнала, совместимая с МРТ система мониторинга мелких животных и стробированияSmall Animal Instruments, Inc. Стоуни-Брук, Нью-Йорк
9,4 Т (400 МГц) 89 мм Вертикальный диаметр отверстия МРТ сканерAgilent Technologies, Санта-Клара, Калифорния
Микровизуализационная радиочастотная катушка 4 см МногоножкаAgilent Technologies, Санта-Клара, Калифорния
Монитор SAM PCSmall Animal Instruments, Inc. Стоуни-Брук, Нью-Йорк
Программное обеспечение для количественного анализа медицинских изображенийhttp://segment.heiberg.se;   Сегмент v1.8 R1430,  Медвизо, регион Оресунн, Швеция
Программное обеспечение MatlabThe Mathworks, Inc. Натик, Массачусетс
Компьютер-Операционная система
305195 Unix

Ссылки

  1. Heidenreich, P. A., et al. Forecasting the future of cardiovascular disease in the United States: a policy statement from the American Heart Association. Circulation. 123 (8), 933-944 (2011).
  2. Fujinami, R. S., et al. Molecular mimicry, bystander activation, or viral persistence: infections and autoimmune disease. Clin Microbiol Rev. 19 (1), 80-94 (2006).
  3. Cihakova, D., Rose, N. R. Pathogenesis of myocarditis and dilated cardiomyopathy. Adv Immunol. 99, 95-114 (2008).
  4. Donermeyer, D. L., et al. Myocarditis-inducing epitope of myosin binds constitutively and stably to I-Ak on antigen-presenting cells in the heart. J Exp Med. 182 (5), 1291-1300 (1995).
  5. Gangaplara, A., et al. Coxsackievirus B3 infection leads to the generation of cardiac myosin heavy chain-alpha-reactive CD4 T cells in A/J mice. Clin Immunol. 144 (3), 237-249 (2012).
  6. Huber, S. A., Lodge, P. A. Coxsackievirus B-3 myocarditis in Balb/c mice. Evidence for autoimmunity to myocyte antigens. Am J Pathol. 116 (1), 21-29 (1984).
  7. Massilamany, C., et al. Identification of novel mimicry epitopes for cardiac myosin heavy chain-alpha that induce autoimmune myocarditis in A/J mice. Cell Immunol. 271, 438-449 (2011).
  8. Pummerer, C. L., et al. Identification of cardiac myosin peptides capable of inducing autoimmune myocarditis in BALB/c mice. J Clin Invest. 97 (9), 2057-2062 (1996).
  9. Rose, N. R., Hill, S. L. The pathogenesis of postinfectious myocarditis. Clin Immunol Immunopathol. 80, (1996).
  10. Saraste, A., et al. Coronary flow reserve and heart failure in experimental coxsackievirus myocarditis. A transthoracic Doppler echocardiography study. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 291, (2006).
  11. Altes, T. A., et al. Hyperpolarized 3He MR lung ventilation imaging in asthmatics: preliminary findings. J Magn Reson Imaging. 13 (3), 378-384 (2001).
  12. Driehuys, B., et al. Small animal imaging with magnetic resonance microscopy. ILAR J. 49 (1), 35-53 (2008).
  13. Smith, B. R. Magnetic resonance microscopy with cardiovascular applications. Trends Cardiovasc Med. 6 (8), 247-254 (1996).
  14. Potter, K. Magnetic resonance microscopy approaches to molecular imaging: sensitivity vs specificity. J Cell Biochem Suppl. 39, 147-153 (2002).
  15. Benveniste, H., Blackband, S. MR microscopy and high resolution small animal MRI: applications in neuroscience research. Prog Neurobiol. 67, 393-420 (2002).
  16. Epstein, F. H., et al. MR tagging early after myocardial infarction in mice demonstrates contractile dysfunction in adjacent and remote regions. Magn Reson Med. 48 (2), 399-403 (2002).
  17. Gewalt, S. L., et al. MR microscopy of the rat lung using projection reconstruction. Magn Reson Med. 29 (1), 99-106 (1993).
  18. Kern, M. J. The cardiac catheterization handbook., Edn 5th. , (2011).
  19. Heiberg, E., et al. Design and validation of Segment--freely available software for cardiovascular image analysis. BMC Med Imaging. 10, (2010).
  20. Cranney, G. B., et al. Left ventricular volume measurement using cardiac axis nuclear magnetic resonance imaging. Validation by calibrated ventricular angiography. Circulation. 82 (1), 154-163 (1990).
  21. Hiba, B., et al. Cardiac and respiratory double self-gated cine MRI in the mouse at 7 T. Magn Reson Med. 55 (3), 506-513 (2006).
  22. Bryant, D., et al. Cardiac failure in transgenic mice with myocardial expression of tumor necrosis factor-alpha. Circulation. 97 (14), 1375-1381 (1998).
  23. Neu, N., et al. Cardiac myosin-induced myocarditis as a model of postinfectious autoimmunity. Eur Heart J. 12 Suppl D, 117-120 (1991).
  24. Neumann, D. A., et al. Induction of multiple heart autoantibodies in mice with coxsackievirus B3- and cardiac myosin-induced autoimmune myocarditis. J Immunol. 152 (1), 343-350 (1994).
  25. Rose, N. R., et al. Postinfectious autoimmunity: two distinct phases of coxsackievirus B3-induced myocarditis. Ann N Y Acad Sci. 475, 146-156 (1986).
  26. Farmer, J. B., Levy, G. P. A simple method for recording the electrocardiogram and heart rate from conscious animals. Br J Pharmacol Chemother. 32 (1), 193-200 (1968).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE

Запросить разрешение

Теги

Segment

Похожие статьи