Трансплантация кожи хвоста изучать Аллогенная лимфоцитов CD4 ответов у мышей

Mathias Schmaler; Maria A. S. Broggi; Simona W. Rossi

doi:10.3791/51724

Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Трансплантация кожи хвоста изучать Аллогенная лимфоцитов CD4 ответов у мышей

13.1K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/51724

⸱

25 июля 2014 г.

Mathias Schmaler^*¹ , Maria A. S. Broggi^*¹ , Simona W. Rossi¹

¹Department of Biomedicine, Immunoregulation, University of Basel and University Hospital Basel

^* These authors contributed equally

В этой статье

Краткое содержание

Трансплантация кожи хвоста является мощной моделью для изучения зависимого от Т-клеток отторжения и индукции толерантности во время аллогенных иммунных реакций у мышей. Преимуществами этого протокола являются незначительная инвазивная хирургия и простота мониторинга без необходимости жертвовать мышью-реципиентом.

Аннотация

Изучение реакций Т-клеток и их последствий во время распознавания аллоантигена требует модели, которая позволяет различать донорские и хозяйские Т-клетки, легко контролировать трансплантат и адаптировать систему для ответа на различные иммунологические вопросы. Медавар и его коллеги установили аллогенную трансплантацию кожи хвоста у мышей в 1955 году. С тех пор модель трансплантации кожи постоянно модифицировалась и адаптировалась для ответа на конкретные вопросы. Использование кожи хвоста делает эту модель легкой для оценки отторжения трансплантата, не требует ни обширной подготовки, ни глубокой анестезии, применима к животным с любым генетическим фоном, препятствует ишемическому некрозу и позволяет проводить химическое и биологическое вмешательство.

В общем, аллогенные Т-клетки CD4⁺ и CD8⁺ ответственны за отторжение аллотрансплантатов, поскольку они распознают несовпадающие основные антигены гистосовместимости из разных линий мышей. Было описано несколько моделей активации аллогенных Т-клеток у мышей, которым пересадили кожу. Идентификация молекул главного комплекса гистосовместимости (MHC) классов I и II у различных линий мышей, включая мышей C57BL/6, стала важным шагом на пути к пониманию и изучению Т-клеточных аллореакций. В описанной здесь модели трансплантации кожи хвоста трехточечной мутации (I-A^bm12) в антигенпрезентирующей борозде молекулы MHC класса II (I-A^b) достаточно, чтобы индуцировать сильную аллогенную активацию CD4⁺ Т-клеток у мышей C57BL/6. Кожные трансплантаты от мышей I-A^bm12 на мышах C57BL/6 отторгаются в течение 12-15 дней, в то время как сингенные трансплантаты принимаются в течение 100 дней. Отсутствие Т-клеток (у мышей CD3^-/- и Rag2^-/-)позволяет кожному трансплантату приживаться до 100 дней, что может быть преодолено путем переноса 2 x 10⁴ диких или трансгенных Т-клеток. Адоптивно перенесенные Т-клетки пролиферируют и продуцируют ИФН-γ у мышей, трансплантированных^{I-A bm12} Rag2^-/-.

Введение

Трансплантация твердых органов, таких как кожа, сердце и почки в настоящее время является стандартной процедурой в медицинской практике во всем мире ^1. Успешно пересаженные органы могут быть отвергнуты активации получателя иммунной системы, в которой признается основные антигены гистосовместимости донора. Поэтому пересаженные пациентам необходимо лечение с иммуносупрессивных препаратов ^2. Аллогенная трансплантация кожи у мышей было установлено Medawar и коллегами в 1955 году и был полезен для выявления целевых молекул позже описаны как главный комплекс гистосовместимости (МНС) класса I и II. С тех пор модель пересадка кожи была постоянно модифиц....