Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Латерализованные Запах модель обучения у новорожденных крыс для Пройдя Формирование нервной схемы Основополагающее памяти

8.4K просмотров

DOI:

10.3791/51808

18 августа 2014 г.

* These authors contributed equally

В этой статье

Краткое содержание

Этот протокол вводит латерализованное раннее обучение предпочтениям запахов у крыс с использованием острой одиночной окклюзии носа. Латерализованное обучение позволяет изучать поведенческие результаты и лежащие в основе биологические механизмы у одних и тех же животных, уменьшая дисперсию, вызванную дизайном между животными. Этот протокол может быть использован для исследования молекулярных механизмов, лежащих в основе раннего изучения запахов.

Аннотация

Крысята в критический постнатальный период (≤ 10 дней) легко отдают предпочтение запаху, который ассоциируется со стимулами, имитирующими материнский уход. Такая память предпочтений может длиться от часов, до дней, даже на всю жизнь, в зависимости от параметров тренировки. Раннее обучение предпочтениям запахов дает нам модель, в которой критические изменения для естественной формы обучения происходят в обонятельной схеме. Еще одной особенностью, которая делает его мощным инструментом для анализа процессов памяти, является то, что раннее обучение предпочтениям запахов может быть латерализовано через одну окклюзию ноздря в течение критического периода. Это связано с отсутствием зрелых передних спаечных связей обонятельных полушарий в столь раннем возрасте. В этой работе изложены поведенческие протоколы для изучения латерализованного запаха с помощью затычек для носа. Острая, обратимая окклюзия ноздревого знозаря сводит к минимуму повреждения тканей и нейронов, связанные с длительной окклюзией и более агрессивными методами, такими как прижигание. Латерализованная модель обучения запаху позволяет проводить сравнение внутри животных, тем самым значительно уменьшая дисперсию по сравнению с конструкциями между животными. Этот метод был успешно использован для зондирования изменений схемы в обонятельной системе, полученных в результате обучения. Будущие направления включают изучение молекулярных основ памяти обоняния с использованием этой латерализованной модели обучения; и корреляция физиологических изменений с силой и продолжительностью памяти.

Введение

Обоняние является основным сенсорной модальности у грызунов, без которых они не смогли бы успешно ориентироваться или выжить в их среде. Это особенно важно для новорожденных щенков, которые не могут ни видеть, ни слышать во время первого послеродовой недели, чтобы использовать обоняние для того, чтобы найти свою мать, чтобы прокормить 1. В результате, неонатальные крысят может быть обусловлено, предпочитают запахи с простых экспериментальных манипуляций. Разнообразие стимулов были использованы в качестве безусловного раздражителя (UCS), чтобы вызвать условные ответов на новых запахов (условный раздражитель, CS) в новорожденных, в том числе гнездования сред....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Sprague Dawley крыс (Charles River) щенки обоих полов используются. Пометы отсеиваются до 12 на ПК1 (рождение будучи Pd0). Плотины ведутся на 12 ч цикле свет / темнота с свободном доступе к пище и воде. Экспериментальные процедуры были одобрены институционального комитета по уходу за животными Мемориального университета путем.

1 Нос зажигания Строительство

ПРИМЕЧАНИЕ:. Эта процедура была адаптирована и редактировался Каммингс соавт (1997) 35.

  1. Aquire полиэтиленовой трубы-20 и 3-0 шелковой нитью нить.
  2. Отрежьте небольшой кусочек полиэтилена-20 трубки прим....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Здесь мы рассмотрим некоторые из ранее установленных результатов 24, чтобы продемонстрировать эффективность NARIS окклюзии в изоляции вход запаха и обучение одного полушария, и обратимость этого метода.

Одноместный Нарис окклюзия в начале обучения предпочтение запаха приводит к латерализованные запаха памяти 24. Память приурочено к пощадил ноздри (рисунок 3). Когда щенки проходят тестирование на предпочтения запаха с той же ноздри окклюзии как во время .......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Латерализованные запах обучения и памяти модель в крысят в критическом временного окна была впервые установлена ​​зале и коллег. В серии исследований 33,34,36, они показали, что предпочтения памяти запах может быть латерализованные по запаху + молока пар в одной ноздри в PD 6 в крысят. Предпочтение память была надежной, когда же Нарис был открыт во время обучения и тестирования, но не наблюдается, когда окклюзии Нарис был разблокирован и испытания. Тем не менее, в PD 12, когда передние спаечные соединения от .......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторам нечего раскрывать.

Благодарности

Эта работа была поддержана грантом CIHR (MOP-102624) для Q. Y. Мы благодарим доктора Кэролин Харли за полезные обсуждения на протяжении всего исследования, доктора Циньлун Хоу, Амина Шахавата и Андреа Дарби-Кинг за техническую поддержку.

....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Политилен 20трубка Intramedic427406Нерентгеноконтрастный, Нетоксичный
3-0 Шелковая шовная нитьSynetureSofsilkНеабсорбирующая
силиконовая смазкаWarner Instrument64-0378Без запаха
2% Ксилокаиновый гельAstraZenecaProd. No 061Лидокаина гидрохлоридный желе, приобретенный в местной аптеке
Кисть для рисованияDynasty206RПохожий размер/другие бренды тоже работают
Экстракт мяты перечнойSigma-AldrichW284807Другие бренды тоже должны быть в порядке
Тренировочная коробкаИзготовленная на заказН/ДАкриловая коробка (20 x 20 x 5 см3), см. Рисунок 2A. Параметры и материал для короба не критичны и могут быть изменены. Используемый материал не должен иметь запаха и не впитывать запахи
Испытательная камераИзготовленная на заказН/ДНержавеющая сталь (30 x 20 x 18 см3), см. Рисунок 2B. Параметры и материал для камеры не критичны и могут быть изменены. Например, в акриловой камере вместо нержавеющей стали может быть использовано
антитело pCREBCell Signaling9198Ser 133 (87G3) Rabbit mAb
Chloral HydrateSigma-AldrichC8383N/A
ParaformaldehypeSigma-AldrichP6148N/A
SucroseSigma-AldrichS9378N/A

Ссылки

  1. Gregory, E. H., Pfaff, D. W. Development of olfactory-guided behavior in infant rats. Physiol Behav. 6, 573-576 (1971).
  2. Alberts, J. R., May, B. Nonnutritive, thermotactile induction of filial huddling in rat pups. Dev Psychobiol. 17, 161-181 (1984).
  3. ....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Теги

Односторонняя окклюзия ноздриизготовление носовых пробокобучение с использованием ароматизированного наполнителятест с выбором из двух вариантовиммуногистохимический анализдетекция фосфорилированного CREBактивация обонятельной луковицыпередняя часть грушевидной коры