Малые методы визуализации животных позволяют серийные диагностических исследований и лечебных вмешательств в естественных условиях. В последнее время сфера применения значительно расширились, и в настоящее время включает в себя оценку развития толстой опухоли, ранозаживляющим и мониторинг воспаления. Этот протокол иллюстрирует эти разнообразные возможности применения мышиного эндоскопии.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Мышиный Эндоскопия для В Vivo Мультимодальные изображений канцерогенеза и оценки кишечной заживления ран и воспаления
* These authors contributed equally
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Мышиные модели широко используются для изучения патогенеза заболеваний человека и оценить диагностические процедуры, а также терапевтические вмешательства доклинического. Тем не менее, в силе оценка патологических изменений часто требует гистологического анализа, а когда выполняется экс виво, требует гибель животного. Поэтому в обычных экспериментальных условиях, внутри отдельных последующих экзаменов редко возможно. Таким образом, развитие мышиного эндоскопии в живом мышей позволяет следователям впервые в как непосредственно визуализировать слизистую оболочку ЖКТ, а также повторить процедуры для наблюдения за изменениями. Многочисленные приложения для в естественных условиях мышиной эндоскопии существуют, в том числе изучения воспаления кишечника или заживления ран, получения слизистой биопсии неоднократно, и локально управлять диагностические или терапевтические агенты, используя миниатюрные впрыска катетеры. Совсем недавно, молекулярная визуализация расширила диагностики мо изображенийспособы воздействия, позволяющие конкретной обнаружение различных молекул-мишеней с использованием специфических photoprobes. В заключение, мышиный эндоскопия стала новой передовой технологии для диагностики экспериментальных в естественных изображений и может существенно повлиять на доклинических исследований в различных областях.
Введение
Модели на животных значительно обогатили наше понимание многочисленных кишечных патологий. Лаборатория мыши (Mus Musculus) возник как простой модели животных в биомедицинских исследованиях в связи с его обильным генетической и геномной информации и легко доступны в трансгенных и нокаут штаммов. В дополнение к повышению патогенез заболевания понимание, модели на животных также важно использовать для тестирования лекарств-кандидатов, а также доклинические диагностических или терапевтических вмешательств. Однако, несмотря на разнообразие моделей мышей, имитирующих человеческую болезнь, многие диагностические и интервенционные Варианты, которые обычно используются в уходе за больным не доступны для мышей. Соответственно, стратегии наблюдения, чтобы следить за ходом мышиного болезни или влияния терапевтических вмешательств часто ограничиваются косвенных наблюдений или посмертного анализа. В то время как неинвазивные процедуры для мышей мониторинга жизнеспособность как показателей активности заболевания, Цюйantification потери веса или усиления, крови, мочи и кала анализ, это лишь косвенные показатели и смещены в результате межэтнических индивидуальной изменчивости. Кроме того, посмертно анализирует предотвратить продольные наблюдения в повторяющихся временных точках. Сложные методы визуализации для контроля активности заболевания у мышей только недавно был введен 1,2. Хотя эти методы визуализации позволяют повторяющихся анализов, они только предоставляют наглядный и часто неточное представление о кишечнике, не позволяют визуализацию прямой слизистой или разрешить диагностические или терапевтические вмешательства, такие как приобретение биопсии или местного и intramucosal применения лекарств-кандидатов.
Недавно, эндоскопические системы высокого разрешения для использования в живых мышей были разработаны 3,4. Впервые эти эндоскопические методы позволяют непосредственно наблюдать внутрипросветных толстой патологий заболеваний, таких как заживление ран или воспаления кишечника обеспечения OBJСтатус ective, в режиме реального времени позволяет продольные исследования в той же животного на повторяющихся временных точках. Помимо позволяя повторных биопсий в отдельной мыши, эндоскопические системы также могут быть использованы для терапевтически влиять явное опухоль или локализованную воспаление, позволяя прямое применение вещества в интересующей области. Кроме того, в качестве терапевтических и контрольные вещества могут быть доставлены непосредственно в области, представляющей интерес, это может быть выполнено в той же мыши, за исключением между индивидуальной изменчивости. Эти системы уже были использованы для оценки толстой воспаления, заживления ран, лапароскопических биопсии печени и ортотопической индукции опухолей печени 8 и развития опухоли с использованием различных систем оценки, таких как мыши эндоскопического индекса тяжести колит (MEICS) 5-7. MEICS состоит из пяти параметров для оценки воспаления: утолщение стенки толстой кишки, изменения сосудистого рисунка, наличие фибрина, зернистостью MUCOSаль поверхность, и стул консистенции.
В этом протоколе, мы описали использование жесткой эндоскопии в мышиных моделях заживления ран кишечника, воспаление и рак толстой кишки. Во-первых, мы демонстрируем эндоскопическую оценку заживления ран и толстой воспаления, а также продольную оценку колит деятельности и изучение канцерогенеза в мышиной толстой кишки. Помимо описательной использования мыши эндоскопии, мы предоставляем подробные инструкции по использованию эндоскопической аппаратуры для получения биопсии, и актуальным и intramucosal применение различных компонентов интерес (например, лекарств-кандидатов или опухолевых клеток). Наконец, мы демонстрируем использование мышиного флуоресценции эндоскопии, в которой работает сложные методы молекулярной визуализации, в обстановке толстого кишечника.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
Все эксперименты на животных были утверждены Landesamt für Natur, Umwelt унд Verbraucherschutz (LANUV) в соответствии с немецким Законом о защите животных.
Материалы 1 и Экспериментальная установка
- Уход за животными
- Используйте женщина или мужчина мышей из любого штамма весом от 20 до 25 г и размещения их в соответствии с местным законодательством по уходу за животными.
- Поток мышей с особой чау для грызунов и применять люцерны без чау по крайней мере, за три дня до флуоресценции экзамены, чтобы минимизировать Эндолюминальная автофлуоресценции.
- Обеспечить в автоклаве питьевой воды вволю.
- Индукционная острого DSS-индуцированной колит
- Приготовьте 3% (вес / объем) сульфат декстрана натрия (DSS, молекулярная масса: 36,000-50,000 Da) раствор путем растворения 3 г DSS в 100 мл воды в автоклаве. Предложение это решение в качестве эксклюзивного питьевой водой мыши свободном и расчета 5 мл DSS-решения на мышь / день. Поток продолжениерол мышей с автоклавного воды без DSS вволю 9.
- Индукционная колоректального рака
- Растворите мутагенного azoxymethane (ОСО) (ВНИМАНИЕ! Может вызывать рак и генетические нарушения!) В стерильном изотоническом растворе до получения конечной концентрации 1 мг / мл. Нанесите одну дозу 10 мг ОСО за кг массы тела внутрибрюшинно с использованием 1 мл шприц (30 г) 10.
- Вызов мыши (за исключением контрольных мышей) с повторяющимися циклами 3% (м / о) DSS от дня 0 до 7, 14 дней до 21, днем от 28 до 35 и день 42 до 49, чтобы вызвать воспалительный приводом колоректального канцерогенеза. Поток мышей с автоклавного воды только в промежутке между этими проблемами (см рисунок 4А для детальный график). Поток контрольных мышей с автоклавного воды в течение всего эксперимента.
- Подготовка флуоресценции эндоскопии (FE)
- Использование флуоресцеин-Isothiocyanat (FITC) - декстран (молекулярная масса 70000 Да; ФИТЦ: Глюкоза = 1: 250) для Deteводств толстой аденомы путем визуального повышения дисплазии связанные узором сосудистой.
- Администрирование 60 мг FITC-конъюгированного декстран разбавленный в 100 мкл PBS внутривенно 5 мин до флуоресценции эндоскопического обследования.
- Анестезия
- Обеспечить непрерывную подачу изофлуран для анестезии (1,5 LO 2 / мин; 1,5-2 объемных% изофлуран [2-хлор-2-(дифторметокси) -1,1,1-трифтор-этан]). Используйте специальный ветеринарный анестезиологического оборудования с маску жестко контролировать анестезии.
- Подготовка клизмы
- Закапывание 2 мл клизмы жидкости (содержание: гидрофосфата натрия 1,5% (вес / объем) и дигидрофосфат натрия 11% (вес / объем)) в толстую кишку, если значительное фекальные загрузки есть подозрение, что может скрывать вид.
2 Технически оборудование
- Используйте ветеринарный станцию эндоскопическое, что разработана и утверждена для использования малых животных эндоскопии. Подключите гореrkstation к блок камеры, ксеноновой источника света, воздушного насоса и с обычным монитором ПК для белого света эндоскопии. Затем подключите камеру и миниатюрный жесткий телескоп (1,9 мм внешний диаметр, 10 см длины; рисунок 5).
- Используйте эндоскопа оболочку с работы канала (рисунок 5D) для применения щипцы для биопсии или трубкой инжекции. Используйте оболочку, не работая канал для диагностического колоноскопии.
- Настройте параметры источника света для флуоресцентной эндоскопии для возбуждения подержанные индикаторов (например, 490 нм для FITC-конъюгированного декстрана). Кроме того, интегрировать соответствующий полосовой фильтр между телескопом и камерой (например, 525 нм для FITC-конъюгированного декстрана).
- Вставьте гибкие щипцы биопсии (3 Чарр., 28 см) через рабочий канал эндоскопа, чтобы получить биопсии.
- Введение гибкой трубки впрыска (0,96 мм) через рабочий канал для местного, intramucosal или внутрипросветногоТ О диагностических или терапевтических агентов.
- Используйте нагреваемый стол экспертизы с температурой 42 ° С. Это предотвращает мышей становится гипотермия во время обследования.
3 Анестезия животных
- Поместите мышь в небольшом, но герметичной коробки и управлять изофлуран (100% (объем / объем), 5% по объему, 3 л / мин). Подождите, пока мышь не теряет сознание.
- Трансфер мыши на гинекологическое кресло для эндоскопии. Продолжить ИФ вдыхания через маску с дозы 100% объем / объем, 1,5% об, 1,5 л / мин. Всегда наносите глазную мазь, чтобы предотвратить сухость глаза в то время как под наркозом.
- Оценивать эффективность анестезии, проверять рефлексы. Проверьте 'оборот вокруг рефлекс': если достаточно анестезии, мыши укладки на спине не должно развернуться. Проверьте 'пальцы рефлекс': когда анестезия является адекватной, мягкий щипать в между пальцами животного не должно приводить к выводу ноги (стадиихирургическое толерантность).
4 колоноскопия
- Положите под наркозом мыши склонны / на спине на гинекологическое кресло.
- Администрирование 2 мл клизмы через застегнутой канюли в прямую кишку, если значительная фекально загрузка подозревал, что может скрывать вид. Подождите мышей к дефекации после введения клизмы. Вставьте эндоскопа очень тщательно, чтобы избежать перфорации.
- Открыть оба клапана оболочки с одним из них соединен с воздушным насосом. Уплотнение другой клапан указательным пальцем обойтись воздух. Накачайте толстой кишки с воздухом, медленно и осторожно, особенно в случае биопсии или инъекции.
- Авансовые эндоскоп лишь постольку, поскольку правой ободочной изгиба, чтобы избежать перфорации (4-5 см от заднего прохода).
- Диагностический колоноскопия
- Осмотрите слизистую оболочку для воспалительных или злокачественных изменений, потянув назад эндоскоп. Медленно нажать назад, чтобы оценить всей окружности кишки. Оценка внутрипросветный годовыхthologies использующие соответствующие установленным системы скоринга по мере необходимости.
- Чтобы гарантировать одинаковую эндоскопическое положение для получения изображения во время повторяющихся визуализации раневых областях, обратите внимание на расстояние между мышиного анусом и поражения слизистой оболочки. Кроме того, использование кончика щипцы для биопсии в качестве спейсера для достижения идентичного расстояние между эндоскопом и области раны во время захвата изображения. Размер раны связана с размером эндоскопа оболочкой, которая включает 3 мм.
ПРИМЕЧАНИЕ: Место эндоскоп в одинаковом положении с помощью оптической сравнению с фото документации предыдущих экзаменов. Мера поражения в том же углу и расстоянию в каждом следить эндоскопическое исследование.
- Биопсия процедура
- Возьмите биопсии с помощью двух следователей. Введем биопсийных щипцов тщательно через рабочий канал, пока кончик пинцетом не видно на мониторе на второй следователя. Открытие и закрытие щипцы тщательнонедействительными перфорация.
- Перемещение щипцы на сайт патологии.
- Процедура инъекций
- Выполните процедуру впрыска с помощью двух следователей. Предварительно заполнения гибкой трубки впрыска (0,96 мм) полностью с агентом для введения. Нажмите трубку через рабочий канал до тех пор, канюлю (30 г) не видна на экране монитора до второго исследователя. Подготовьте тонкую шприц и аккуратно управлять требуемое количество диагностического или терапевтического средства. Объемы инъекций следует 50 мкл максимум.
- Вставьте иглу в submocosa под углом 15-30 градусов. Лицо скос в направлении слизистой. Слизистая показывает характерный подъема знак после успешной инъекции.
- Флуоресценции эндоскопии (FE)
- Администрирование 60 мг FITC-конъюгированного декстран разбавленный в 100 мкл PBS внутривенно до флуоресценции эндоскопическое исследование.
- Проверьте оптимальную точку времени между инъекциейВаш флуоресцентного меченного атома и процесс создания образа, который зависит от индикаторного фармакологии. Настройка параметров системы полосового фильтра согласно возбуждения и длине волны излучения трейсера используется. Выполнение флуоресценции эндоскопии для неспецифических индикаторов объема крови (например, FITC) сразу после внутривенной инъекции флуоресцентного красителя для оценки сосудистого рисунка на поверхности слизистой оболочки.
- Рассмотрим визуализации через несколько часов после индикаторного применения в случае целевых индикаторов или «умных датчиков" для обеспечения лучшего персонажа к фона соотношении.
- Выполните Структура и документирование результатов.
5 после колоноскопии
- Отделите мышь в свободном клетке и положить его на бумажное полотенце, чтобы защитить мышь от аспирации мусор. Теплый мышь с квартала красных лампы для предотвращения переохлаждения. Соблюдайте мышь и не оставляйте без присмотра, пока он не пришел в достаточносознание поддерживать грудины лежачее положение. После того, как в полном сознании, поместите курсор обратно в соответствующей клетке.
- В конце эксперимента, место мыши в небольшом, но герметичной коробки и управлять CO 2 (100% (об / об), 100% по объему, 3 л / мин). Подождите, пока мышь не теряет полную сознание и перестает дышать. Отправка мыши на шее перелома. Выполните животе лапаротомии и эксплантата двоеточие. Откройте двоеточие продольно и промойте его для дальнейшего гистологического или молекулярной оценки.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
В естественных условиях мониторинга кишечной заживления ран
Во время рутинной эндоскопии, слизистой раны были вызваны механическим миниатюрными щипцы для биопсии с диаметром 3-французски (равна 1 мм; Рисунок 1А). Впоследствии, ранозаживляющее контролировали ежедневных эндоскопических обследований и количественно измерения площади остаточной раны, используя программное обеспечение для редактирования изображений, например, ImageJ (Рисунок 1В). Индив...
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
Эпителиальные заживление ран представляет собой непрерывный процесс. Непрерывная физиологическая отшелушивание поверхностных клеток в слизистой желудка происходит требуя частой регенерации эпителиальных клеток 16. Следовательно, нарушение заживления ран имеет огромное влияние на несколько заболеваний, включая желудочно-кишечных язв и утечки 17 анастомоза 18. Оценка молекулярной фоне, а также потенциальные кандидаты наркотиков, чтобы стимулировать эпителиальных исцеление может быть полнос...
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
Авторы не имеют ничего раскрывать.
Благодарности
Мы благодарим Соня Dufentester и Эльке Weber для экспертной технической помощи. Мы благодарим Faekah Gohar за корректуру рукопись и Стефан Брукнер для поддержки медицинской информатики. Эта работа была поддержана междисциплинарного гранта от Else-крон-Fresenius-Stiftung (2012_A94). Д. Bettenworth поддержали исследовательского общения с факультета медицины, Westfälische Вильгельма Universität Мюнстера. М. Брюкнер был поддержан угловое положение "Gerok" от Немецкого исследовательского (DFG SFB1009B8). Благодарим Хайке Blum для иллюстрации мышь.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Реагенты | |||
| безлюцерновой диеты | Harlan Laboritories, Мэдисон, США | 2014 | |
| Азоксиметан (AOM) | Sigma-Aldrich, Дайзенхофен, Германия | A5486 | |
| Бепантенская глазная мазь | Bayer, Леверкузен, Германия | 80469764 | |
| Декстрана сульфат натрия (DSS) | TdB Consulatancy, Уппсала, Швеция | DB001 | |
| Eosin | Sigma-Aldrich, Deisenhofen, Германия | E 4382 | |
| Этилендиаминтетрауксусная кислота (ЭДТА) | Sigma-Aldrich, Deisenhofen, Германия | E 9884 | |
| Falcon Tube 50 мл | BD Biosciences, Erembodegem, Бельгия | 352070 | |
| Florene 100 V/V | Abbott, Wiesbaden, Германия | B506 | |
| Гематоксилин | Sigma-Aldrich, Deisenhofen, Германия | HHS32-1L | |
| Изопентан (2-метилбутан) | Sigma-Aldrich, Deisenhofen, Германия | M32631-1L | |
| Метиленовый синий | Merck, Дармштадт, Германия | 1159430025 | |
| O.C.T. Tissue Tek compound | Sakura, Zoeterwonde, Нидерланды | 4583 | |
| Omnican F - canula | Braun, Мельзунген, Германия | 9161502 | |
| Фосфатный буферный физиологический раствор, PBS | Lonza, Verviers, Бельгия | 4629 | |
| Хлорид натрия 0,9% | Braun, Мельзунген, Германия | 5/12211095/0411 | |
| Стандартный рацион | Altromin, Lage, Германия | 1320 | |
| Tissue-Tek Cryomold | Sakura, Лейден, Нидерланды | 4566 | |
| Vitro – Clud | R. Langenbrinck, Teningen, Германия | 04-0002 | |
| Оборудование | |||
| AIDA | Control Karl Storz - Endoskope, Туттлинген, Германия | 20 096020 | |
| Полосовой фильтр | Semrock, Рочестер, США | HC 716/40 | |
| Полосовой фильтр | Semrock, Рочестер, США | HC 809/81 | |
| Биопсийный щипец, 3 Fr., 28 см | Karl Storz - Endoskope, Туттлинген, Германия | 61071ZJ | |
| Dell Monitor | Dell, Франкфурт-на-Майне, Германия | U2412Mb | |
| Смотровой чехол, 9 фр.Карл | Шторц - эндоскопе, Туттлинген, Германия | 61029D | |
| Смотровой тубус, 9 фр.Карл | Шторц - эндоскопе, Туттлинген, Германия | 61029C | |
| Оптоволоконный световой кабель, 3,5 мм | Karl Storz - эндоскоп, Туттлинген, Германия | 69495NL | |
| флуоресцеин синий Фильтрующая система | Karl Storz - Endoskope, Туттлинген, Германия | 20100032 | |
| Флуоресцеиновый барьерный фильтр | Karl Storz - Endoskope, Туттлинген, Германия | 20100033 | |
| Ножной переключатель | Karl Storz - Endoskope, Туттлинген, Германия | 20010430 | |
| телескоп HOPKINS, 1,9 мм, длина 10 см | Karl Storz - Endoskope, Туттлинген, Германия | 1830231 | |
| SCB D-light P | Karl Storz - Endoskope, Туттлинген, Германия | 20 133720 | |
| SCB tricam SL II | Karl Storz - Endoskope, Туттлинген, Германия | 20 2230 20 | |
| Набор трубок инструменты VETPUMP II | Karl Storz - Endoskope, Туттлинген, Германия | 69811 | |
| Tricam PDD PAL | Karl Storz - Endoskope, Туттлинген, Германия | 20221037 | |
| UniVet Porta | Groppler Medizintechnik, Деггендорф, Германия | BKGM 0451 | |
| Vetpump 2 | Karl Storz - Endoskope, Туттлинген, Германия | 69321620 |
Ссылки
- Bettenworth, D., et al. Translational 18F-FDG PET/CT imaging to monitor lesion activity in intestinal inflammation. Journal of nuclear medicine : official publication, Society of Nuclear Medicine. 54, 748-755 (2013).
- Lewis, J. S., Achilefu, S., Garbow, J. R., Laforest, R., Welch, M. J. Small animal imaging. current technology and perspectives for oncological imaging. European journal of cancer. 38, 2173-2188 (2002).
- Huang, E. H., et al. Colonoscopy in mice. Surgical endoscopy. 16, 22-24 (2002).
- Becker, C., et al. In vivo imaging of colitis and colon cancer development in mice using high resolution chromoendoscopy. Gut. 54, 950-954 (2005).
- Becker, C., Fantini, M. C., Neurath, M. F. High resolution colonoscopy in live mice. Nature protocols. 1, 2900-2904 (2006).
- Neurath, M. F., et al. Assessment of tumor development and wound healing using endoscopic techniques in mice. Gastroenterology. 139, 1837-1843 (2010).
- Pickert, G., et al. STAT3 links IL-22 signaling in intestinal epithelial cells to mucosal wound healing. The Journal of experimental medicine. 206, 1465-1472 (2009).
- Shapira, Y., et al. Utilization of murine laparoscopy for continuous in-vivo assessment of the liver in multiple disease models. Plos one. 4, e4776(2009).
- Wirtz, S., Neufert, C., Weigmann, B., Neurath, M. F. Chemically induced mouse models of intestinal inflammation. Nature protocols. 2, 541-546 (2007).
- Neufert, C., Becker, C., Neurath, M. F. An inducible mouse model of colon carcinogenesis for the analysis of sporadic and inflammation-driven tumor progression. Nature protocols. 2, 1998-2004 (2007).
- Dieleman, L. A., et al. Chronic experimental colitis induced by dextran sulphate sodium (DSS) is characterized by Th1 and Th2 cytokines. Clinical and experimental immunology. 114, 385-391 (1998).
- Gao, Y., et al. Colitis-accelerated colorectal cancer and metabolic dysregulation in a mouse model. Carcinogenesis. 34, 1861-1869 (2013).
- Foersch, S., Neufert, C., Neurath, M. F., Waldner, M. J. Endomicroscopic Imaging of COX-2 Activity in Murine Sporadic and Colitis-Associated Colorectal Cancer. Diagnostic and therapeutic endoscopy. 2013, 250641(2013).
- Bremer, C., Ntziachristos, V., Weissleder, R. Optical-based molecular imaging: contrast agents and potential medical applications. European radiology. 13, 231-243 (2003).
- Keller, R., Winde, G., Terpe, H. J., Foerster, E. C., Domschke, W. Fluorescence endoscopy using a fluorescein-labeled monoclonal antibody against carcinoembryonic antigen in patients with colorectal carcinoma and adenoma. Endoscopy. 34, 801-807 (2002).
- Jones, M. K., Tomikawa, M., Mohajer, B., Tarnawski, A. S. Gastrointestinal mucosal regeneration: role of growth factors. Frontiers in bioscience : a journal and virtual library. 4, 303-309 (1999).
- Mertz, H. R., Walsh, J. H. Peptic ulcer pathophysiology. The Medical clinics of North America. 75, 799-814 (1991).
- Pantelis, D., et al. The effect of sealing with a fixed combination of collagen matrix-bound coagulation factors on the healing of colonic anastomoses in experimental high-risk mice models. Langenbeck's archives of surgery / Deutsche Gesellschaft fur Chirurgie. 395, 1039-1048 (2010).
- Burk, R. R. A factor from a transformed cell line that affects cell migration. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 70, 369-372 (1973).
- Msaki, A., et al. The role of RelA (p65) threonine 505 phosphorylation in the regulation of cell growth, survival, and migration. Molecular biology of the cell. 22, 3032-3040 (2011).
- Zigmond, E., et al. Utilization of murine colonoscopy for orthotopic implantation of colorectal cancer. PloS one. 6, e28858(2011).
- Foersch, S., et al. Molecular imaging of VEGF in gastrointestinal cancer in vivo using confocal laser endomicroscopy. Gut. 59, 1046-1055 (2010).
- Mitsunaga, M., et al. Fluorescence endoscopic detection of murine colitis-associated colon cancer by topically applied enzymatically rapid-activatable probe. Gut. 62, 1179-1186 (2013).
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
