В этом видео описывается радиочастотная идентификация (RFID) и методы записи видео, чувствительные к движению, для мониторинга поведения шмелей при выборе.
Method Article
В этом видео описывается радиочастотная идентификация (RFID) и методы записи видео, чувствительные к движению, для мониторинга поведения шмелей при выборе.
Мы представляем два способа наблюдения шмель выбор поведения в закрытом тестировании пространстве. Первый способ состоит из радиочастотной идентификации (RFID) читателей, встроенных в искусственных цветов, которые отображают различные визуальные подсказки, и радиочастотных меток (т.е. пассивных транспондеров), приклеенных к грудной клетке шмеля работников. Новинка в нашем реализации является то, что читатели RFID встроены непосредственно в искусственных цветов, которые способен отображать несколько различных визуальных свойств, таких как цвет, тип рисунка, пространственной частоты (например, "занятость" картины), и симметрии (пространственной частоты и симметрия не манипулировали в этом эксперименте). Кроме того, эти визуальные изображения в сочетании с автоматизированными системами способны записывать без награды и неподготовленный поведение выбор. Второй способ состоит электорального поведения записи при искусственных цветов с использованием движения чувствительных видеокамер высокой четкости. Bumblebees имеют номерные теги приклеены к их thoraces для уникальной идентификации. Преимущество в этом осуществлении над RFID является то, что в дополнение к соблюдению поведение посадки, также можно наблюдать альтернативные меры, такие как предпочтение зависания и antennation. Оба метода автоматизации увеличить экспериментального контроля и внутреннего действительность, позволяя более широкомасштабных исследований, которые учитывают индивидуальные различия. Внешняя валидность также улучшенная потому пчелы могут свободно входить и выходить из среды тестирования без ограничений, таких как доступность научного сотрудника на месте. По сравнению с человеческой наблюдения в режиме реального времени, автоматизированные способы являются более экономически эффективным и, возможно, менее подверженным ошибкам.
Ключевой проблемой в изучении невыученных поведение выбор шмелями и пчелами, что цветоводства наивно, неподготовленные работники не легко ввести тестирование пространство, где предпочтения могут быть измерены. В результате, многие исследователи опираются на менее идеальной техники: предварительно обучение работников, чтобы прокормить внутри испытательной пространстве от якобы нейтральных стимулов, исследователи сочтут, будет отличаться от экспериментальных стимулов. Тем не менее, недавние эксперименты показали, что стимулы, которые, как считалось, быть нейтральными (т.е. стимулы, которые не влияют на дальнейшее поведение выбор в испытательной сессии) повлияли предпочтения самым неожиданным образом 1. Автоматизированные системы, которые включают радиочастотной идентификации (RFID) 2 и движения чувствительных видеозаписи может предложить возможность решить эту проблему. Целью исследования была двоякой: (1) в первую очередь внести свой вклад в литературу по невыученных цветочных предпочтениях шмелями, (2) и во вторую очередь, чтобы евaluate две системы измерения выбор, как записано двумя различными автоматизированными устройствами записи.
Два автоматизированные системы 3 были реализованы в данном исследовании наблюдать невыученных поведение выбор: RFID и движения чувствительных видеозаписи. Два ключевых элементов обеих систем, что выборы не вознаграждены, и на дисплее различных визуальных подсказок можно манипулировать. Движение чувствительного видео (высокой четкости, записи в 1 резолюции МП) не только позволяет непрерывное наблюдение за свободно путешествующие работников в комнате полета, но имеет решающее значение для эффективного наблюдения относительно редких событий 4.
Исследование вопрос в эксперименте 1 относится к тому, как разные визуальные свойства взаимодействовать при отображении вместе. Это исследование стремится изучить относительную важность образов позиционирования по отношению к типу рисунка. Используя дизайн 2 х 2, радиальные (то есть, солнечных лучей) и концентрические (т.е. быка евы) Типы рисунков размещаются либо централизованно или по периферии на искусственный цветок (рисунок 1 для примеров стимулов). RFID считыватели, встроенные в этих специально разработанных искусственных цветов раздражители, и шмели получают RFID позволило теги, которые позволяют нам записывать каждую помеченную работника, который входит в искусственный цветок стимул. RFID наблюдения работает по механизму считывания (построен в искусственных цветов) посылающего сигналы на радиочастотах (13,56 МГц в данном случае), которые модулированного наличием пассивных меток. Читатель может обнаружить и записать эти сигнальные модуляций, которые слегка различаются по тегам позволяющих тегов уникальную идентификацию.
Вопросы эксперименте 2 являются втрое. Во-первых, это цветок-запись, если судить по RFID, и посадки, если судить по видеозаписям эквивалентные критерии выбора? Выбор измеряется в разных точках (посадки для видео, и запись цветок для RFID), которые могут перевести в различных мерпредпочтения. Во-вторых, то, что это эффект центральный против периферийного расположения? Не известно, является ли работники будут выбирать центральную картину, если были представлены комбинация, состоящая из двух радиальных моделей в разных положениях (рис 4б). В-третьих, то, что относительная важность позиции шаблона против типа образов? Иными словами, будет шмели приземлиться на моделях предпочтительного типа образов, или предпочтительного позиции шаблона? Пчелы могут предпочесть центрально-радиальной к периферийному-концентрической модели, но предпочтение может быть связано с типом рисунка или его центрального расположения. В этом эксперименте, две переменные были друг против друга 5 (рис 4в, г).
В эксперименте 2, мы использовали движения чувствительных видеозаписи на цветочных, как раздражители. Искусственные цветы были размещены внутри полета клетке, и движения чувствительных видеокамер высокой четкости были указал на эти цветы из Фронт и верхний. Более конкретно, два видеокамеры были расположены таким образом, чтобы захватить вид спереди каждого из двух раздражителей в пространстве тестирования. Дополнительным видеокамера была расположена между стимулами для записи зависания поведение сверху, и захватили поведение с обеих искусственных цветов. Шмели были определены с помощью цифровых меток, которые могут быть прочитаны на высокой четкости видео клипов. Зависание, наблюдались antennation и посадочные поведения.
Уход Комитет животных из Университета Оттавы одобрил наш экспериментальный протокол, который очерчивает меры безопасности для персонала, работающего с пчелами.
1. Тестирование окружающей среды Подготовка

Рисунок 1. RFID Искусственные цветы Дизайн. Принципиальная схема RFID-включен искусственный цветок, используемой в эксперименте 1. читателя RFID отдыхал на вершине открытого цилиндра через центр цветка. Стимулов узоры и должности:. периферической концентрические, б. Центрально-концентрические, с. периферической радиальная и d. Центрально-радиальная. Эта цифра была изменена с Орбана и др. 11.

Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть увеличенную версию этой фигуры.
2. Шмель колонии Подготовка
3. Подготовка к наблюдению по Радиочастотная идентификация
4. Искусственные цветы Подготовка к RFID сканеры
5. Подготовка к наблюдению по Motion-чувствительной видеозаписи

7. Статистический анализ
8. Стимулы Презентация Последовательность
9. Изучение Прекращение
Эксперимент 1: RFID данных
Все 375 работников колонии были RFID меткой, и 318 из этих работников (85%) вошли в летные клетку в какой-то момент во время исследования. В общей сложности 197 (62% пчел, которые покинули колонию) посетил хотя бы один из четырех искусственных цветов раздражители.
Определение выбора
Выбор был определен в качестве работника, входящего в искусственный цветок (рисунок 1). Мы назвали этот поведение как "цветочный разведки." Это определение выбора является более строгим, чем те, которые используются в литературе, которые, в зависимости от исследования, используют некоторую комбинацию зависания, antennation или посадки. Цветочные разведка является строже определение выбора, потому что он требует, чтобы пчелы посещают не только стимулом при наведении, antennating, и посадка на него, но и исследовать его.
Управление данными
Резюме эксперимента
Четыре-воспроизведены степень согласия тесты проводились на всех вариантов, из пчел "наивного сессии", чтобы сравнить выбор рroportions к теоретической стоимости случайно 7. Наивно сессия пчелы относится к первому условию тестирования, в котором пчела "участие". В G-тесты показывают предпочтение центральной позиционирования (таблица 1) и радиального типа рисунка. Рисунок 4b показывает, что предпочтение картина меняется на противоположную, концентрические модель устанавливается по центру и радиальная картина позиционируется периферии. Тем не менее, если позиционирование должно быть одинаковым, а на фиг.4а и D, предпочтение шаблон к радиальным образом. Рисунок 4 показывает, что относительные пропорции первого выбора для каждого образца для каждой комбинации были сравнимы с пропорциях, показанных для всех вариантов.

Рисунок 4. RFID Экспериментальные результаты. Выбор частоты в тон четыре различные комбинации цветов в эксперименте 1. Темно-коричневые гистограммы показать все варианты от наивного сессии пчелы (левобережная ось у), а светло-коричневые полоски показывают первый выбор каждого работника (правая сторона ось у ). "Все варианты" показать сопоставимые модели на "первым выбором", но с большей статистической мощности. Гистограммы показывают, что позиционирование моделей является более важным, чем тип узора. Центрально помещается образец предпочитали даже если тип модели отображается в противном случае менее предпочтительный концентрической схеме. Звездочки указывают на выбор долю, которая значительно отличается от случая. Заметка. * Р <0,05, ** р <0,01, *** р <0,001. Эта цифра была изменена с Орбана и др. 11.
| Условиям | Pooled | Гетерогенность | |||||
| Врач общей практики | DF | р | Gh | DF | р | ||
| Центрально-радиальная против Центрально-Концентрические | 3.96 | 1 | 0,047 | 197,55 | 41 | 0.000 | |
| Периферийное-Radial против Центрально-Концентрические | 33.77 | 1 | 0.000 | 210,81 | 42 | 0.000 | |
| Центрально-радиальная против периферийных-Концентрические | 508,31 | 1 | 0.000 | 345,78 | 30 | 0.000 | |
| Периферийное-Radial против периферийных-Концентрические | 7,42 | 1 | 0.000 | 84,06 | 24 | 0.000 | |
Таблица 1. выведенный Статистика RFID данных. Эксперимент 1. Эта таблица была изменена с Орбана и др. (2013) 11. G р относится к значительному отклонению группового пропорции от случайно, и G ч относится к испытаниям на индивидуальных различий ( то есть, неоднородность). Пожалуйста, обратитесь к рукописи для более подробной информации о статистических тестов.
Эксперимент 2: Видео Data
В общей сложности 264 вариантов были записаны в четырех условий в течение трех испытательных сессий. Таблица 2 показывает количество работников и выбора вклад от каждой колонии.
Определение выбора
Данные видео позволяет записывать трех типов электорального поведения: зависания, antennation и посадки. Хотя можно наблюдать все три типа поведения, зависания и antennation являются difficuл связать с рядом тега из-за быстрых движений, что видеокамеры с низким разрешением, или низкой скорости не могут записывать. Это имеет решающее значение для использования видеокамеры высокой четкости (хотя это не было доступно для нас, в идеале ставка видеокамера высокого рамки должны быть использованы для снижения размытости), чтобы обеспечить количество тегов, которые могут появиться только на небольшом количестве кадров можно читать , Этот метод также используется для сравнения выбор моделей с техникой RFID, который обнаруживает цветочный разведку.
Соображения чувствительность движения
Одним из ключевых вопросов в производстве успешный эксперимент является конфигурация видеокамер движения чувствительных. Видеокамера, что слишком чувствителен запишет слишком много данных, что является нецелесообразным и может стать очень дорогим, чтобы обработать. Например, первоначально наша видеокамера была вызвана регулярных колебаний в здании (например, люди, проходящие мимо по коридору, кондиционер и т.д.), в результате которой 1R11; 2 действительные точки данных на каждые 150-200 записанных видеоклипов. С другой стороны, еще более серьезной ошибки является низкая чувствительность конфигурации, которые может пропустить данные ключа. Это имеет решающее значение, чтобы настроить все видеокамеры таким же образом, в противном случае, ошибки выборки может исказить результаты.
Резюме эксперимента
Четыре воспроизведены степень согласия тестов обнаружили три группы масштабов, что значительно отклонился от случайно, и один без существенного общую численность (таблица 3 и рисунок 5). (1) Образец важно: значительное предпочтение центральной радиальной-над центральной концентрической-узор был найден (таблица 3). (2) Положение радиальном картины менее важен: презентация Центрально-лучевой и периферической радиальной комбинации не показали существенное отличие от случая. (3) Центральная-радиальная и периферической концентрические сочетание привело к сильным предпочтением кS Центрально-радиальная картина. Центральный-концентрические и радиальные периферической комбинации вызывали значительное преимущество по отношению к периферийной-радиальная рисунком. Шаблон переиграла место. Индивидуальные различия были не-значительным во всех четырех комбинаций (таблица 3).

. Рисунок 5. Движение-Sensitive Видео Результаты частот выбор в четырех различных комбинаций цветов в эксперименте 2. Результаты показывают важность типа рисунка над рисунком позиционирования: предпочтение было отдано даже если узоры были расположены по периферии радиальные узоры. Значения указывают количество вариантов отображаемого рисунка. Звездочки указывают на выбор долю, которая значительно отличается от случая. Заметка. ** Р <0,01, *** р <0,001. Эта цифра была изменена с Орбана 11.
Таблица 2. Описательная статистика Motion-Sensitive видеоданных. Общее количество вариантов, записанных на искусственных цветов в эксперименте 2 для каждой колонии, а число рабочих делая этот выбор. Эта таблица была изменена с Орбана и др. 11. Пожалуйста, обратитесь к рукописидля получения полной информации.
| Условиям | Объединенный | Гетерогенность | ||||
| Врач общей практики | DF | р | Gh | DF | р | |
| Центрально-радиальная против Центрально-Концентрические | 17.98 | 1 | 0.000 | 40.72 | 29 | 0,073 |
| Центрально-радиальная против периферийными радиальными | 1.85 | 1 | 0,173 | 53,63 | 39 | 0.060 |
| Периферийное Radial против центральной концентрической | 6.57 | 1 | 0,010 | 26.31 | 27 | 0.500 |
| Центральный Radial против периферийных Concentric | 18.18 | 1 | 0.000 | 41.92 | 37 | 0,256 |
Таблица 3. выведенный Статистика Motion-Sensitive видеоданных. Эксперимент 2. Эта таблица была изменена с Орбана и др. 11. G р относится к значительному отклонению группового пропорции от случайности, и G ч относится к испытаниям на индивидуальных различий ( то есть, неоднородность). Пожалуйста, обратитесь к рукописи для более подробной информации о статистических тестов.
Технология RFID позволяет обучающимся сотни отдельных работников с легкостью и высокой точностью, но характеристики записанного поведения отличается от наблюдений людей и видеозаписей. Выбор поведение записаны RFID могут быть описаны как цветочные разведки. Это очень строгий критерий предпочтения по сравнению с критериями, используемыми в других исследованиях, таких как подход 8, вход в лабиринт-руку 9,10, усиков реакции 8 или посадки на рисунком 11,12. Для того чтобы сравнить действительность определений выбор поведения, и для проверки нового метода RFID для награды поведения, видеозаписи посадки наблюдались в эксперименте 2. Все выбор меры не равны: критерий RFID как измеряется цветочным вступления, указал, что визуальный собственностью шаблон позиционирования важнее пчелы выбора, в то время как видео данные показали, что зрительная собственностью типа рисунка важнее пчелы выбора.
Одна из общих проблем в изучении невыученных поведение выбор в том, что это очень трудно привлечь цветок наивно, необученных пчел в искусственных цветов, которые не предлагают каких-либо пыльцу или нектар. В самом деле, многие из предыдущих экспериментов прибегали к обучению пчел в среде тестирования на раздражители, которые, как считается, не имеет отношения к выбору поведения на испытательных раздражители. RFID и движения чувствительных видеозаписи преодолеть это препятствие, позволяя непрерывную запись, 24 ч в день, без постоянного надзора исследователя, и за счет увеличения размера пробы от 15-20 пчел до нескольких сотен пчел. В то время как без награды выбора необученным пчел остаются редким явлением, эти новые экспериментальные проектные параметры делают возможным наблюдение.
Другие улучшения, предлагаемые этими двумя методами включают устранение предвзятости образца, улучшение внешнего действия, и отслеживание индивидуальных различий. SAMPLе смещения могут быть введены при только изучение дюжину пчел в колонии. Существуют значительные различия в поведенческих особенностей по отдельным работникам даже в пределах одной и той же колонии, что, вероятно, пропустил, потому что только те работники, которые отметили, что произойдет с "сотрудничать" с исследователем в данный момент времени. Изучение 15-20 пчел в колонии 300 или более пчел, представляет всего лишь 5% от общего колонии, в которой смещения выборки случай может быть значительным. Пометка и наблюдая за поведением всех работников устраняет эту проблему в целом. Количество одновременных выборов стимулов также можно манипулировать. Мы предложили бинарные варианты в нашем эксперименте по техническим причинам, но один выбор или несколько конструкций выбор также возможны.
С точки зрения внешнего действия, изучение пчел в лабораторных условиях традиционно высокой искусственной, которая препятствует обобщения результатов. Например, исследователи должны были быть прESENT для сбора данных, пчелы были добывать в среде тестирования по одному, и тестирование было ограничено небольшим временным окном. Новые методы, описанные в этой статье, удалить эти искусственные ограничения, сделав замечание без присмотра и без ограничений. Наконец, индивидуальные различия поведения могут быть задокументированы, потому что мы можем констатировать, были ли они повторяются выбор одной пчелы или несколькими пчелами.
Движение чувствительного, высокие пространственно-видеокамер разрешением имеют преимущество над методами RFID с точки зрения гибкости стимулов конструкций: появление зрительных стимулов может быть практически любой формы или формы, пока идентификация субъекта могут быть захвачены, по крайней мере несколько кадров. Обработка видео немного больше времени, чем обработка данных RFID, так как идентификация должна быть прочитана исследователем, который требует ручной проверки каждого видеоклипа. Если визуальный дизайн стимул может удовлетворить ограничениям RЧитатель FID (т.е. RFID метки на пчел должны прийти, по крайней мере 3-4 мм читателя RFID), то технология RFID имеет преимущество над автоматизированного сбора данных масштабного. Качественные исследования, скорее всего, по-прежнему благоприятствует видеоанализа. Как показано в этом эксперименте, читатели RFID может накопить очень больших наборов данных, что не требует ручного кодирования. В слегка различные преимущества, связанные с каждой техники предположить, что в дальнейшем они могут быть использованы в дополнительной образом.
Будущее обеих технологий может лежать в точной оценке редко встречающихся поведения. Например, одна явная возможность для будущих применений является применение этих методов в теплицах и других более натуралистических средах. Сочетание натурализма и экспериментального контроля позволит решить вопросы, которые не были возможны ответить раньше. Вообще говоря, эти методы предлагают два новых способов наблюдения за поведением в строгом ай эффективным способом. RFID и движения чувствительных видео являются значительным шагом вперед не только для исследователей, изучающих опылителей и насекомых, но эти методы могут также обратиться к другим поведенческих ученых.
У авторов нет конкурирующих финансовых интересов.
Эксперименты были поддержаны грантом от Совета по естественным наукам и инженерным исследованиям Канады для CMSP. Мы благодарим Koppert Canada за их пожертвования в виде колонии шмелей. Части этой рукописи, включая некоторые рисунки и таблицы, были опубликованы в журнале Naturwissenschaften11 и воспроизводятся здесь с разрешения издательства Springer.
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
|---|---|---|---|
| Миниатюрные метки mic3 | Microsensys | mic3 TAG 64 бит RO | RFID метки для приклеивания к пчеле |
| RFID-считыватель 2k6 головка | Microsensys | 2k6 | RFID-считыватели встроенные в искусственные цветы |
| IP-видеокамеры | Vivotek | IP8161 | Чувствительные к движению видеорегистраторы |
| Opalith Plattchen и нетоксичный клей | Beeworks.com | н/д | Цифровые метки для клея пчел |
| Колония шмелей для исследований | Копперт Канада | ||
| Искусственные цветы | Н/Д | Разработано биологическим магазином кампуса | |
| Стенд для искусственных цветов | Н/Д | Разработано биологическим магазином кампуса | |
| Летный зал | Н/Д | Разработано биологическим магазином кампуса | |
| Ноутбук с Windows | Универсальное оборудование / программное обеспечение | Microsoft | Используется для загрузки данных RFID |
| RS 232 в USB конвертер | Generic | Подключите RFID-считыватель к компьютеру | |
| Настольный компьютер | IBM | Используется для передачи видеоданных | |
| Вторая сетевая карта | Generic | 10/100M NIC PCI | Используется для передачи видеоданных |
| Сетевой концентратор | Generic | 4-port | Используется для передачи видеоданных |
| Высокоточный пинцет | SPI | Используется для приклеивания номеров и RFID-меток к пчелам | |
| Сахар | Дженерик | Используется для смешивания с водой для создания сахара-воды | |
| Пыльца | Любой местный пасека | Скармливает шмелям | |
| Маркировка клетки с помощью плунжера | Beeworks.com | Помогает процессу маркировки | |
| Мед | Дженерик | Используется для смешивания с водой для создания пыльцевой пасты | |
| Выпечка глины | Sculpey | Stimulus for RFID | |
| Инструменты для придания формы глине | Generic | Stimulus for RFID | |
| Белая бумага | Generic | Stimulus for | |
| Video Laser printer | Generic | Stimulus for Video | |
| Wood | Generic | Stimulus for Video -- зажим для крепления |
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request Permission