Методическая статья

Метод оценки воздействия диапазоне длин волн и интенсивностей красный / ближней инфракрасной световой терапии на окислительного стресса In Vitro

DOI:

10.3791/52221

⸱

21 марта 2015 г.

 ,  ,  ,  ,  , 
1Experimental and Regenerative Neurosciences, School of Animal Biology, The University of Western Australia, 2School of Animal Biology and The Oceans Institute, The University of Western Australia, 3Experimental and Regenerative Neurosciences, School of Anatomy, Physiology and Human Biology, The University of Western Australia

В этой статье

Краткое содержание

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Некогерентный ксеноновый свет пропускали через узкополосные интерференционные фильтры и фильтры нейтральной плотности, чтобы доставить свет различной длины волны и интенсивности к культивируемым клеткам. Этот протокол был использован для оценки влияния терапии красным/ближним инфракрасным светом на продукцию реактивных веществ in vitro: никаких эффектов при использовании тестируемых параметров не наблюдалось.

Аннотация

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Красный / около инфракрасный свет терапия (R / NIR-LT), с которым выступил лазерном или светоизлучающий диод (LED), улучшает функциональные и морфологические результаты в диапазоне центральная система повреждений нервной в естественных условиях, возможно, за счет снижения окислительного стресса. Тем не менее, влияние R / NIR-LT на окислительный стресс, как было показано варьироваться в зависимости от длины волны и интенсивности облучения. Исследования, сравнивающие параметры лечения не хватает, из-за отсутствия коммерчески доступных устройств, которые обеспечивают несколько длин волн или интенсивности, подходящие для высокой пропускной положить в пробирке исследования оптимизации. Этот протокол описан способ доставки света в диапазоне длин волн и интенсивности для оптимизации терапевтических доз, необходимых для данной модели травмы. Мы предположили, что метод доставки света, в которых могут быть легко изменены длины волны и интенсивности параметры, может облегчить определение оптимального дозы R / NIR-LT для снижения реактивных форм кислорода(ROS) в пробирке.

Некогерентное ксеноновые фары фильтруют через узкополосных интерференционных фильтров, чтобы доставить различные длины волн (в центре длины волн 440, 550, 670 и 810nm) и флюенсы (8,5 × 10 -3 до 3,8 × 10 -1 Дж / ​​см 2) света в культивируемых клетках. Светоотдача из устройства калибруют, чтобы излучать соответствующие терапевтически, равные квантовых дозы света на каждой длине волны. Активные формы были обнаружены в глутамат подчеркнул клетки, обработанные с учетом, используя DCFH-DA и H 2 O 2 чувствительных флуоресцентных красителей.

Мы успешно доставлено свет в диапазоне физиологически и терапевтически соответствующих длин волн и интенсивностей, в культивируемых клетках, подвергшихся воздействию глутамата в качестве модели повреждения ЦНС. В то время как флюенсами R / NIR-LT, используемых в данном исследовании не оказывают влияния на ROS, генерируемого культивируемых клеток, способ доставки света применимо к другим систEMS включая изолированные митохондрии или более физиологически соответствующие органотипической модели ломтик культура, и может быть использован для оценки воздействия на целый ряд критериев исхода окислительного метаболизма.

Введение

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Активные формы кислорода (АФК) требуется для ряда сигнальных путей трансдукции и нормальных реакций клеточного метаболизма, в том числе нейропротекции 1. Однако, когда эндогенный антиоксидант механизм не в состоянии контролировать производство АФК, клетки могут поддаваться окислительным стрессом 2,3. После травмы ЦНС, что приводит к повышению в присутствии АФК и окислительного стресса, как полагают, играют существенную роль в прогрессировании повреждения 4,5. Несмотря на широкое ряда стратегий для ослабления окислительного стресса, которые были оценены, не существует в настоящее время нет полностью эффективных, клинически значимые стратегии антиоксидантные для ослабления АФК и связанного с окислительного стресса в клинической практике следующие нейротравме 6. Поэтому ослабление окислительного стресса остается важной целью для терапевтического вмешательства 7.

Улучшения следоватьчисле R / NIR-LT были зарегистрированы в широком диапазоне повреждений и заболеваний, включая сокращение размера инфаркта сердечной, почечной и печеночной осложнений во время диабета, дегенерации сетчатки, травмы ЦНС и инсульта 8, возможно, снижая окислительный стресс. Что касается непосредственно повреждения ЦНС, доклинические исследования эффективности 670 нм света показали хорошие эффекты в моделях дегенерации сетчатки 9-11, повреждение спинного мозга 12, гибели нейронов 13. Клинические испытания были проведены для сухой возрастной макулярной дегенерации и в настоящее время инсульта 14, однако результаты этих исследований не выглядят многообещающими, возможно, из-за сбоя использовать эффективное лечение параметров 15. Таким образом, R / NIR-LT не были широко приняты как часть обычной клинической практике в нейротравме, несмотря на то, легка в управлении, неинвазивный и относительно недорогое лечение. Барьеры на пути к клинической перевода включают в себя отсутствие в клраннего понимать механизм действия и отсутствие стандартизованной эффективного 16,17 протокол лечения. Текущий литература о световой терапии показывает множество вариаций в параметрах лечения по отношению к источникам облучения (LED или лазером), длины волны (например, 630, 670, 780, 810, 830, 880, 904nm), общая доза (Дж облучения / на единицу площади), продолжительность (время экспозиции), сроки (до или после оскорблять), частота лечения и способ родоразрешения (импульсный или непрерывный) 8. Изменчивость параметров обработки между исследованиями делает сравнение трудным и внесла свой ​​вклад в скептицизм в отношении эффективности 16.

Таким образом, оптимизация R / NIR-LT Очевидно, что необходимо, с систем клеточных культур, способных обеспечивать механизм высокопроизводительного скрининга необходимо сравнить несколько переменных. Однако есть несколько коммерчески доступных осветительные системы, которые могут обеспечить достаточную гибкость и контроль над ваvelength и интенсивность выполнять такие эксперименты по оптимизации. Коммерчески доступные устройства СИД, как правило, не способны доставить несколько длин волн или интенсивности, в результате чего исследователей, использующих несколько светодиодных устройств от разных производителей, которые могут меняться не только в интенсивности, но и спектр волны излучаемого света. Мы решили эту проблему путем использования широкополосного ксеноновые источник света фильтруют через узкополосный интерференционных фильтров, тем самым создавая диапазоне длин волн и флюенсах света, что позволяет близко, точный контроль параметров R / NIR-LT.

Важно отметить, что терапевтическая доза лечения определяется число фотонов, взаимодействующих с photoacceptor (хромофора), который, в случае R / NIR-LT является предполагаемым быть цитохром с оксидазы (COX) 18. Энергия фотона доставлен изменяется с длиной волны; это означает, равные дозы энергии на различных длинах волн будет комценится из различного числа фотонов. Таким образом, свет, испускаемый из устройства калибруют, чтобы излучать одинаковое количество фотонов для каждого из выбранных длин волн для тестирования. Мы разработали систему, которая может быть использована для доставки R / NIR-LT в диапазоне длин волн и интенсивностей в клетки в пробирке и продемонстрировал способность измерять воздействие при поставке R / NIR-LT на продукции АФК в клетках, подвергнутых глутамат стресс.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. Оптический Калибровка: Измерение светового выхода

  1. Чтобы подготовить световой аппаратурой доставки, подключения широкополосного источника света (например, ксенон или вольфрамовая лампа) к соответствующему источнику питания. Установите коллимирующей линзы перед источником света для получения коллимированного пучка света. Пропускают свет через фильтр жидкого тепла, чтобы удалить большую часть тепла от светового луча. В зависимости от применения, сфокусировать коллимированный пучок на входной апертуре жидкой световода, который обеспечивает более гибкое доставки света (например., В инкубаторе).
  2. На другом конце световода жидкости, положение второй коллимирующей линзы, а затем держатель для интерференции и фильтры нейтральной плотности. Убедитесь, что это устройство производит равномерно освещенного пятна света от желаемого диапазона длин волн и интенсивности.
    Примечание: расстояние между концом световода и плоскости образца может потребоваться варьироваться в зависимости отобласть, которая должна быть освещена, но помните, что по мере удаления от конца световода возрастает, интенсивность света уменьшается. В настоящем исследовании, это расстояние 14 см и производит поперечное сечение пучка, который равномерно освещает область также 3x3 на 96-луночный планшет с.
  3. Убедитесь, что рассеянный свет от лампы и связанных с ними оптических компонентов не может достичь образца.
  4. Включите охладитель воды для фильтра жидкого тепла и обеспечить происходит обмен воды через рубашку фильтра. Включите источник питания лампы и подождите не менее 5 мин для широкополосного источника света для стабилизации. Примечание: использование кулера необходимо для предотвращения перегрева устройства.
  5. Выберите фильтр узкополосных помех (обычно описывается их длины волны центра, пик пропускания и Полуширина (FWHM) пропускной способности) для создания нужной полосы освещения. Примечание: узкополосного интерференционных фильтров, используемых в данном исследовании были 442 нм, 550 нм, 671 нм и 810 нм.
  6. Измерьте свет, излучаемый лампой в плоскости, где образец должен быть расположен во время лечения. Измерьте свет с помощью калиброванного освещенности датчик (косинус коллектор) соединен с подходящей спектрорадиометра, используя соответствующее программное обеспечение в соответствии с инструкциями изготовителя.
  7. Используйте нейтральные фильтры, чтобы регулировать интенсивность света, пока не будет получен желаемый результат. Примечание: В настоящем исследовании, интенсивность света, прошедшего от каждого фильтра помех регулируется, чтобы дать равные квантовых выход на каждом из четырех диапазонах обработки. Важно проверить калибровку регулярно, как выход лампы могут быть изменены.
    Примечание: В соответствии с настроить устройства, клетки готовы для освещения Рисунок 1 является представлением света устройства доставки, используемого в данном исследовании..

figure-protocol-1

Рисунок 1. Изображение световой аппаратурой доставки. Проиллюстрированы свет источник питания, ксеноновая лампа с жильем, коллимирующей линзы, фильтр для воды, входного отверстия, жидкого световода, второй коллимирующей линзы, держателем фильтров, рамы лечения и матовой черной картой. Следует отметить, что узкополосные длин волн и интенсивность фильтрации, не показаны.

2. Сотовый Подготовка

  1. Описанный R / NIR-LT способ доставки может быть применен к любому типу клеток или в пробирке модельной системы; поскольку такие следующие описания клеточной культуре являются общими, с использованием хорошо зарекомендовавших себя методов культуры феохромоцитома (PC12), Мюллер (RMC1) и первичных смешанных клеток сетчатки.
  2. До посева клеток для легкой обработки и окислительного стресса анализа, культуры увековечены клетки в их соответствующих питательных сред, содержащих соответствующие добавки (например,., FB, антибиотики) в Т75 FLASKS до 70-80% вырожденная.
  3. Отделить иммортализованных клеток из колбы Т75, используя метод, соответствующий типу клеток для тестирования напр., Трипсин. При необходимости, прежде чем приступить к высева клеток в 96-луночные планшеты для анализа, покрытие анализа планшетов с 10 мкг / мл поли-L-лизина в течение 1 часа (например., Для клетках PC12) или 10 мкг / мл поли-L-лизина для 1ч сопровождается O / N инкубации с 10 мкг / мл ламинин (например., для смешанных клеток сетчатки).
  4. Центрифуга клетки, чтобы собрать как необходимо (например., 3 мин при 405 мкг в течение РС12 клеток или 10 мин при 218 мкг в течение RMC1 клеток), удалить супернатант и ресуспендируют в 8 мл соответствующего культивирования клеток.
  5. Если смешанные клетки сетчатки, которые будут использоваться, готовят из P0-5 новорожденных крысят путем ферментативного пищеварения (папаин) в соответствии с установленными процедурами 19
  6. Подсчитайте число жизнеспособных клеток, за исключением 0,4% (вес / объем) трипанового синего красителя, с помощью гемоцитометра.
  7. Отрегулируйте плотность клеток SUCч, что клетки будут примерно 70-80% сливной после 24 или 48 часов в культуре. (Для клеток РС12 плотность посева является 4,0 × 10 5 жизнеспособных клеток / мл, по RMC1 клеток, то есть 2,5 х 10 5 жизнеспособных клеток / мл и для смешанных клеток сетчатки это 8 х 10 5 жизнеспособных клеток / мл). После добавления клетки либо прозрачный или черный 96-луночные планшеты (используемые для H 2 O 2 или DCFH-DA анализа соответственно), в 100 мкл соответствующей среде роста, позволяют пластины, чтобы сидеть на ровной поверхности на 37 ° С, 5 % CO 2 (или любой другой надлежащих условий для конкретного типа клеток), по крайней мере 24 часа, чтобы дать сотовый приверженность.
  8. Культуры клеток в среде для выращивания в соответствующих 96-лотков, пока они не 70-80% сливной (24h для PC12 и RMC1 клеток, 48h для смешанных клеток сетчатки).

3. Добавление глутамата стрессора клеток

  1. Подготовка L-глутаминовой кислоты мононатриева концентрации соли гидрат СТРЕССОР на 0-10 мм в соответствующем полной растутго культура СМИ.
  2. Удалить носитель из клеток и осторожно мыть клетки 3 раза ЗФР (PC12) или HBSS (RMC1 и смешанных клеток сетчатки). После промывки, добавления глутамата-содержащий носитель в общем объеме 100 мкл / лунку.

4. Сначала Дозы Лечение светом

  1. Сразу же после того глутамата или стресс выбора, подвергать клетки к свету лечения в нужных длин волн и интенсивностей, поместив его под подготовленную аппарата свет доставки. Будьте уверены, чтобы изменить квантовых выход светового пучка с помощью установленных комбинации фильтров нейтральной плотности в зависимости от длины волны вводимого.
    Примечание: В нынешних экспериментов, подвергать клетки легкого лечения в течение 3 мин поддержания температуры, отдыхая хорошо пластины 96 на 37 ° С тепла площадку. Время обработки может изменяться в соответствии с требованиями.
    1. Поместите матовую черную карту под клетках, чтобы предотвратить света, отражающегося в соседних скважин в 96-вэйл лоток предназначен для других параметров обработки.
  2. Если лечение желательно в течение более длительных периодов времени, добавление 25 мМ Hepes буфера для поддержания рН среды для культивирования клеток или, в идеале, разместить устройства и обработки пластин в инкубаторе с CO 2 концентрацией доводитс до 5% CO 2, или условия, которые являются оптимальными для конкретного типа клеток.
  3. После завершения светолечение, поместите клеток на ровной поверхности и инкубировать при 37 ° С и 5% CO 2 (или любые условия, являются оптимальными для данного типа клеток) в течение 24 часов.
    Примечание: Дополнительные дозы R / NIR-LT можно вводить, как описано выше, по желанию.

5. Окончательный Дозировка Лечение светом и обнаружения АФК

  1. Перед выполнением заключительного тура светолечение, подготовить реагенты, которые будут использоваться для обнаружения ROS. Подготовка 50 мМ цитрат буфер (pH6.0), Тритон X100 и H 2 O 2 реагент обнаружения работырешение (1: 2: 97 Соотношение 10мм H 2 O 2 обнаружения реагента раствора; 10 ед / мл пероксидазы хрена; 50 мМ цитрат натрия (рН 6,0)). Подготовка DCFH-DA в конечной концентрации 100 мкМ в соответствующих средствах массовой информации.
    Примечание: DCFH-DA реагент для клеток РС12 в среде RPMI СМИ, DCFH-DA реагент для RMC1 клеток в DMEM средств массовой информации. Следует отметить, что коммерчески доступные реагенты для детекции имеют дифференциальные чувствительности к конкретному АФК и реагенты должны быть выбраны тщательно, чтобы предоставить информацию, требуемую для индивидуального применения.
  2. Администрирование светолечение к клеткам, как описано в стадии 4.1-4.1.2. Убедитесь, что клетки лечат с желаемыми флюенсы / длин волн света.
  3. Сразу же после светолечение, удалите глутамата средах, содержащих и мыть два раза с соответствующим буферным раствором (для клеток РС12, PBS используется и для RMC1 клеток, HBSS используется). Выполнение анализов ROS на клетках следующим образом:
    1. H 2 O 2 2 в течение 15 мин. Добавить 50 мкл H 2 O 2 рабочего раствора обнаружения и инкубировать в течение 30 мин при комнатной температуре. Измерьте флуоресценции с использованием планшет-ридер с длиной волны возбуждения 530 нм и длине волны эмиссии 480nm.
    2. ДДП анализа: добавьте 100 мкл 100 мкМ раствора DCFH-DA в каждую лунку и инкубируют в течение 30 мин при 37 ° С и 5% СО 2. Извлеките носитель, содержащий 100 мкМ DCFH-DA и промывают соответствующим буферным раствором (как описано выше) в два раза. Добавить 90 мкл буферного раствора и 10 мкл Тритона X100, чтобы каждый из скважин и осторожно встряхнуть на орбитальном шейкере в течение 30 секунд до 15 мин инкубации при 37 ° С. Измерьте DCF, полученную флуоресценцию с помощью планшет-ридер с длиной волны возбуждения 480nm и Вавель выбросовength из 530 нм.
    3. Экспресс РОС значения по отношению к концентрации белка клеток, оставшихся в лунках, с использованием колориметрического набора для количественного определения концентрации белка в соответствии с инструкциями производителя, со ссылкой на стандартной кривой для расчета мг белка.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Выход света доставлен на длине волны 670 нм была откалибрована с помощью фильтры нейтральной плотности, чтобы облучать клетки с диапазоном плотности энергии, охватывающих дозу 670 нм света было показано ранее, полезными в естественных условиях (0,3 Дж / ​​см 2) 20. По мере увеличения числа нейтральных фильтров плотности перед источником света увеличивается, интенсивность (Вт / м 2) уменьшается, следовательно, меньше света проходит в целевую область. В таблице 1 представлены данные калибров...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Мы успешно приспособлены точное и калиброванного системы доставки света, чтобы обеспечить механизм для изучения оптимизации R / NIR-LT в пробирке. Длина волны и интенсивность параметры R / NIR-LT могут манипулировать точно и эффективно использовать эту систему. Мы установили, что светолечение клеток не приводит к гибели клеток, хотя ROS не были сокращены на длинах волн и дозировках, поставляемых в клеточных типов испытания. Максимальные интенсивности, достигнутые нынешней системы на 670 нм (20.11W / м 2),<...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Авторы заявляют, что у них нет конкурирующих финансовых интересов.

Благодарности

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Эта работа была поддержана Программой исследования нейротравмы (Западная Австралия). Этот проект финансируется через Трастовый счет дорожных травм, но не отражает мнения или рекомендации Совета по безопасности дорожного движения.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
OxiSelect Набор для внутриклеточных анализов АФК (зеленая флуоресценция)Cell BiolabsSTA-342
Amplex UltraRed РеагентМолекулярные зондыA36006
300 Вт ксеноновая дуговая лампаNewport Corporation6258Очень интенсивный источник света, не смотрите прямо в лампу. Обеспечьте достаточное охлаждение лампы при ее включении
USB4000-FL Флуоресцентный спектрометрOcean Optics
CC-3-UV Корректор косинуса для сбора излученийOcean Optics
200μ m диаметр кварцевая волоконно-оптическаяOcean Optics
SpectraSuite Spectroscopy PlatformOcean Optics
2300 EnSpire Multimode Plate ReaderPerkin Elmer
Pierce BCA Protein Analysis KitThermo Scientific23225
Triton X-100Sigma-Aldrich9002-93-1Острая токсичность, при работе надевайте перчатки.
L-глутаминовая кислота Гидрат солинатрия Sigma-Aldrich142-47-2 (безводный)
Феохромоцитома крысы мозговое вещество надпочечников (PC12)Американская коллекция типовых культурCRL-2522
Мемориальный институт Розуэлл Парк (RPMI1640) MediaGibco11875-119
Фетальная сыворотка крупного рогатого скота, сертифицированная, термоинактивация, происхождениеСША Gibco10082-147Теплый до 37 градусов; C на водяной бане перед применением
Лошадиная сыворотка, новозеландского происхожденияGibco16050-122Теплая до 37 °°; C на водяной бане перед применением
GlutaMAX ДобавкаGibco35050-061Подогреть до 37 градусов; C на водяной бане перед применением
100 мМ Пируват натрияGibco11360-070Подогреть до 37 °°; С на водяной бане перед применением
Пенициллин-стрептомицин (10 000 Ед/мл)Gibco15140-122Теплый до 37 °С; C на водяной бане перед применением
100X MEM Раствор заменимых аминокислотGibco11140-050Подогреть до 37 °°; C на водяной бане перед применением
Retinal Muller (rMC1) клеткиКалифорнийского университета, Сан-Диего
Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM)Gibco11965-118Warm to 37 ° C на водяной бане перед применением
75 см2 FlasksBD BiosciencesB4-BE-353136
Poly-L-lysine hydrobromideSigma-Aldrich25988-63-0Aliquot и хранить при -20 °°; C
Hank's Balanced Salt Solution (HBSS)Gibco14025-134Warm to 37 ° C на водяной бане перед использованием
Фосфатно-солевой буфер (PBS)Gibco10010-049Нагреть до 37 °°; C на водяной бане перед применением
Laminin Mouse Protein, NaturalGibco23017-015Aliquot и хранить при -20°С; C
1X Нейробазальная средаGibco21103-049Теплая до 37 °°; C на водяной бане перед применением
Trypan Blue Solution, 0,4%Gibco15250-061
165UPapain Worthington
L-CysteineSigma-AldrichW326305
луночные пластины, прозрачное дно, черныйCorningCLS3603-48EA
Costar Clear Polystyrene 96-луночные пластины необработанные; Форма колодца: Круглая; Стерильный.Costar07-200-103
КачелиСтандартная лабораторная центрифуга
Стандартная лабораторная
фильтрующая бумага нейтральной плотности (0.3)Полосовой фильтр THORLABS
442 нм Полосовой фильтрTHORLABSFL441.6-10
550 нм Полосовой фильтрTHORLABSFB550-10
Полосовой фильтр 670 нмTHORLABSFB670-10
810 нм Полосовой фильтрTHORLABSFB810-10e
Размонтированный ø Абсорбционные фильтры нейтральной плотности 25 мм (0.1)THORLABSNE01B
Unmounted ø Абсорбционные фильтры нейтральной плотности 25 мм (0.2)THORLABSNE02B
Unmounted ø Абсорбционные фильтры нейтральной плотности 25 мм (0.3)THORLABSNE03B
в размонтированном виде ø Абсорбционные фильтры нейтральной плотности 25 мм (0,5)THORLABSNE05B
в размонтированном виде ø Абсорбционные фильтры нейтральной плотности 25 мм (0.6)THORLABSNE06B
Unmounted ø Абсорбционные фильтры нейтральной плотности 25 мм (1.0)THORLABSNE10B
Corning 96

Ссылки

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Gutterman, D. D. Mitochondria and reactive oxygen species an evolution in function. Circulation research. 97, 302-304 (2005).
  2. Camello-Almaraz, C., Gomez-Pinilla, P. J., Pozo, M. J., Camello, P. J. Mitochondrial reactive oxygen species and Ca2+ signaling. American Journal of Physiology-Cell Physiology. 291, C1082-C1088 (2006).
  3. Kowaltowski, A. J., de Souza-Pinto, N. C., Castilho, R. F., Vercesi, A. E. Mitochondria and reactive oxygen species. Free Radical Biology and Medicine. 47, 333-343 (2009).
  4. Coyle, J. T., Puttfarcken, P. Oxidative stress, glutamate, and neurodegenerative disorders. Science. 262, 689-695 (1993).
  5. Doble, A. The role of excitotoxicity in neurodegenerative disease: implications for therapy. Pharmacology & therapeutics. 81, 163-221 (1999).
  6. Hall, E. D. Antioxidant therapies for acute spinal cord injury. Neurotherapeutics. 8, 152-167 (2011).
  7. Jia, Z., et al. Oxidative stress in spinal cord injury and antioxidant-based intervention. Spinal Cord. 50, 264-274 (2012).
  8. Fitzgerald, M., et al. Red/near-infrared irradiation therapy for treatment of central nervous system injuries and disorders. Reviews in the Neurosciences. 24, 205-226 (2013).
  9. Rutar, M., Natoli, R., Albarracin, R., Valter, K., Provis, J. 670-nm light treatment reduces complement propagation following retinal degeneration. J Neuroinflammation. 9, 257(2012).
  10. Eells, J. T., et al. Therapeutic photobiomodulation for methanol-induced retinal toxicity. Proceedings of the National Academy of Sciences. 100, 3439-3444 (2003).
  11. Begum, R., Powner, M. B., Hudson, N., Hogg, C., Jeffery, G. Treatment with 670 nm light up regulates cytochrome C oxidase expression and reduces inflammation in an age-related macular degeneration model. PloS one. 8, e57828(2013).
  12. Byrnes, K. R., et al. Light promotes regeneration and functional recovery and alters the immune response after spinal cord injury. Lasers in surgery and medicine. 36, 171-185 (2005).
  13. Liang, H. L., et al. Photobiomodulation partially rescues visual cortical neurons from cyanide-induced apoptosis. Neuroscience. 139, 639-649 (2006).
  14. Zivin, J. A., et al. Effectiveness and safety of transcranial laser therapy for acute ischemic stroke. Stroke. 40, 1359-1364 (2009).
  15. Lapchak, P. A. Transcranial near-infrared laser therapy applied to promote clinical recovery in acute and chronic neurodegenerative diseases. Expert review of medical devices. 9, 71-83 (2012).
  16. Chung, H., et al. The nuts and bolts of low-level laser (light) therapy. Annals of biomedical engineering. 40, 516-533 (2012).
  17. Wu, Q., et al. Low-Level Laser Therapy for Closed-Head Traumatic Brain Injury in Mice: Effect of Different Wavelengths. Lasers in surgery and medicine. 44, 218-226 (2012).
  18. Hashmi, J. T., et al. Role of low-level laser therapy in neurorehabilitation. PM&R. 2, S292-S305 (2010).
  19. Fitzgerald, M., et al. Metallothionein-IIA promotes neurite growth via the megalin receptor. Experimental Brain Research. 183, 171-180 (2007).
  20. Fitzgerald, M., et al. Near infrared light reduces oxidative stress and preserves function in CNS tissue vulnerable to secondary degeneration following partial transection of the optic nerve. Journal of neurotrauma. 27, 2107-2119 (2010).
  21. Ando, T., et al. Low-level laser therapy for spinal cord injury in rats: effects of polarization. Journal of biomedical. 18, 098002(2013).
  22. Lanzafame, R. J., et al. Reciprocity of exposure time and irradiance on energy density during photoradiation on wound healing in a murine pressure ulcer model. Lasers in surgery and medicine. 39, 534-542 (2007).
  23. Castano, A. P., et al. Low-level laser therapy for zymosan induced arthritis in rats: Importance of illumination time. Lasers in surgery and medicine. 39, 543-550 (2007).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE

Запросить разрешение

Теги

DCFH DAH2O2

Похожие статьи