Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Th17 Воспаление Модель орофарингеального кандидоза при иммунодефицитных мышей

9.2K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/52538

⸱

18 февраля 2015 г.

 ,  , 
1Department of Biological Sciences, School of Dental Medicine, Case Western Reserve University

В этой статье

Краткое содержание

Хотя модели инфекции Candida доступны для изучения иммунной резистентности хозяина, модель для изучения иммунопатологии, опосредованной Т-клетками, в контексте инфекции Candida отсутствует. В данной работе мы описываем метод установления иммунопатологии Th17, ассоциированной с пероральной инфекцией Candida у мышей с иммунодефицитом.

Аннотация

Орофарингеальный кандидоз (ОПК) вызывается не только отсутствием иммунной резистентности хозяина, но и отсутствием соответствующей регуляции иммунопатологии, вызванной инфекцией. Хотя клетки Th17 участвуют в противогрибковой защите, их роль в иммунопатологии неясна. В данном исследовании представлен метод установления пероральной иммунопатологии Th17, ассоциированной с кандидозной инфекцией полости рта у мышей с иммунодефицитом. Метод основан на восстановлении лимфопенных мышей с культивируемыми in vitro клетками Th17 с последующей пероральной инфекцией Candida albicans (C. albicans). Результаты показывают, что неограниченные клетки Th17 приводят к воспалению и патологии и связаны с несколькими измеримыми показателями, включая потерю веса, выработку провоспалительных цитокинов, гистопатологию языка и смертность, показывая, что эта модель может быть ценной в изучении иммунопатологии OPC. Адоптивный перенос регуляторных клеток (T-regs) контролирует и уменьшает воспалительную реакцию, показывая, что эта модель может быть использована для тестирования новых стратегий противодействия воспалению полости рта. Эта модель также может быть применима при изучении иммунопатологии полости рта Th17 в целом в контексте других заболеваний полости рта.

Введение

Инфекции и воспаления полости рта связаны с раком и сердечно-сосудистыми заболеваниями и оказывают значительное влияние на общее состояние здоровья человека2,3. Оппортунистические инфекции и воспаления, вызванные C. albicans, связаны с первичными иммунодефицитами (ВЗОМТ)4,5, воспалительными расстройствами, такими как периодонтит 6,7, синдром Шегрена и заболевание слюнных желез8,9, а также плоскоклеточным раком полости рта 10-12. C. albicans является диморфным комменсальным грибком, который колонизирует ротовую полость 60% здоровых людей бессимптомно, но является наиболее распространенным грибковым патогеном, вызывающим инфекции, когда защита хозяинаослаблена. Он вызывает рецидивирующие и хронические инфекции и воспаления у пациентов со СПИДом и ВЗОМТ, а также у других лиц с ослабленным иммунитетом. В целом, его колонизационная нагрузка связана с изменением разнообразия общего микробиома полости рта16. В качестве патогена он вызывает несколько форм кандидоза ротоглотки, таких как острый псевдомембранозный, острый атрофический, хронический атрофический, хронический гипертрофический/гиперпластический и ангулярный хейлит.

Защита от C. albicans определяется не только иммунной резистентностью хозяина, но и способностью адекватно контролировать иммунопатологию, вызванную кандидой. Хотя комменсалы, такие как C. albicans, способствуют модуляции и обострению других воспалительных состояний полости рта, механизмы, с помощью которых возникает дисбиоз при оппортунистических инфекциях, неясны. Помимо известной роли адаптивных клеток Th17 в реакции памяти на C. albicans17, их роль в инициации и сохранении патологии воспаления во время хронических инфекций остается неясной. Кроме того, воспалительные заболевания полости рта, такие как синдром Шегрена и пародонтит, связаны с Th17-опосредованной патологией. Интересно, что эти заболевания также тесно связаны с частой ОФЦ. Тем не менее, взаимодействие между клетками Th17, пероральной иммунопатологией OPC и другими воспалительными заболеваниями полости рта не изучены.

Хотя мышиные модели первичной и вторичной инфекции кандидоза полости рта доступны, мышиная модель для изучения воспаления Th17, связанного с кандидозной инфекцией, особенно в контексте иммунодефицита, недоступна. В этом исследовании представлен метод установления воспаления Th17 в полости рта, связанного с инфекцией Candida в полости рта у мышей. Кандидозная инфекция у мышей характеризуется грибковыми поражениями, воспалением на языке, снижением потребления пищи, потерей веса и в конечном итоге умирающим состоянием. Патология полости рта напоминает очаги хронической кандидозной инфекции, а также дисплазию эпителия в моделях рака полости рта у мышей12,18.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

ПРИМЕЧАНИЕ: эксперименты на мышах были проведены в соответствии с институциональной защиты животных комитета (IACUC) руководящих принципов.

1. О восстановлении Rag-1 - / - мышей с клетками I N Vitro Искусственный Th17 (три дня до заражения)

  1. Для установления клетки Th17, культуры CD4 + CD44low CD62Lhigh CD25- наивные Т-клетки (3 х 104) в U-образным дном 96-луночных планшетах в одиночку, или совместного культивирования их вместе с 3 х 104 CD4 + CD25 + Foxp3 + регуляторных Т-клеток в присутствии растворимых α-CD3 (1 мкг / мл), α-CD28 (2 мкг / мл) антител и антиген-представляющих клеток в условиях, Th17 (поляризованный с помощью IL-6 (25 нг / мл), TGF-β (2 нг / мл) , α-ИФН-γ (2 мкг / мл) и α -IL-4 (2 мкг / мл)) в течение трех-четырех дней.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Наивные клетки и Т-регистры были отсортированы с помощью флуоресцентной активированный сортировки клеток (FACS)d процедур выделения магнитного клеток и культивировали, как описано ранее 19-22.
  2. На 4-й день, после ресуспендирования клеток Th17 с помощью пипетки, собирать их из культур и центрифугировать их в стерильных условиях.
    1. Возьмите небольшую аликвоту этих клеток для изучения их жизнеспособности и для фенотипирования. Ресуспендируют их в 500 мкл RPMI среде, добавить пропидийиодидом (200 нг / мл) и сразу оценить их жизнеспособность с помощью проточной цитометрии. Выполните фенотипирование цитометрическим оценки IL-17A производства после повторной стимуляции (см раздел 6.3).
  3. Центрифуга и мыть основную массу клеток в стерильной PBS при 480 х г в течение 6 мин при 4 ° C на всех стадиях, если не указано иное.
  4. Используйте эти клетки для приемных передачи в 6-8-недельных CD45.2 RAG1 - / - иммунодефицитные мыши.
    1. Ресуспендируют клеток при плотности 1 х 10 7 клеток / мл клеточной использованием холодного стерильного PBS.
    2. Вводите 100 мкл клеток от intraperitoneal инъекции, используя 25 г иглы на 1 мл туберкулина шприцев, так что одна мышь получает 1 х 10 6 клеток. Некоторые мыши получают PBS или клетки Th17 только, и другие мышей получают Th17 клетки, которые были совместно культивировали с Treg клеток.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Выполните все шаги в асептических условиях.

2. Рост C. Albicans инфекции (один день до инфицирования)

  1. Перед посевом разогнать пять колоний из CAF2-1 С Albicans лабораторного штамма в 100 мкл стерильной PBS суспензии и добавить суспензию стерильной бульоне.
  2. Привить 5 колоний из С Albicans в 50 мл базе дрожжей азота (YNB без аминокислот) / пептон / декстроза бульона средних и инкубировать в шейкере инкубаторе при 30 ° С в течение 15-18 ч при 130 оборотах в минуту.
  3. Монитор бульон облачности, так как это является показанием для роста грибка.

3. CandidaЗаготовка и процедуры подсчета (в день инфекции)

  1. Соберите 10 мл Candida бульона в 15 мл пробирки. Для больших объемов, собирать Candida в 50 мл пробирки.
  2. Центрифуга бластоспоры в 1900 мкг в течение 5 мин при комнатной температуре на всех стадиях, если не указано иное. Гранул бластоспоры центрифугированием, с последующим удалением надосадочной жидкости.
  3. Если есть больше, чем одна трубка, объединить бластоспоры Candida из нескольких трубок, добавлением стерильной PBS на гранулы и ресуспендируйте их в 10 мл PBS для подсчета.
  4. Взять 20 мкл бластоспоры в 1,5 мл микроцентрифужных пробирках, добавить 20 мкл 2X параформальдегида и инкубировать при комнатной температуре в течение 15-20 мин. Количество фиксированных бластоспоры помощью гемоцитометра под микроскопом.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Параформальдегид является канцерогенным. Откройте в неразбавленном решение только в вытяжном шкафу.
  5. В то же время, повторить мытье бластоспоры по меньшей мере, в два раза, т центрифугированиемподол в PBS, и гранулирования в бластоспоры. Держите гранул в 15 мл пробирки при комнатной температуре, в капюшоне ABSL1, готовы к инфицированию.
  6. Оставьте немного стерильной PBS при комнатной температуре ресуспендированием бластоспоры для инфекции.
  7. После подсчета, добавить стерильный PBS к осадку blastospore отрегулировать число дрожжевых клеток с blastospore 2 x10 8 дрожжевых клеток / мл. Это blastospore подвеска, которая будет использоваться, чтобы заразить мышей.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Выполните все шаги в асептических условиях.

4. Мыши инфекции (через 3-5 дней после клеточной передаче)

ПРИМЕЧАНИЕ: Основная процедура инфекция проводили, как описано ранее 19,23-25.

  1. Взвесьте Rag-1 - / - мышей, получавших PBS или клетки на три дня раньше.
  2. Рассчитать дозу анестетиков, используя их вес тела. Обезболить мышей при введении кетамина / ксилазина смеси (16,1 мг / мл и 1,6 мг / мл), с использованием 25 г игл на 1 мл туберкулина шприцев, с помощью INTRaperitoneal инъекции.
    1. Администрирование 50 мкл на 10 г веса тела. (То есть, 0,8 мг кетамина и 0,08 мг / ксилазина 10 г массы тела или 80 мг кетамина и 8 мг ксилазина на кг веса тела, соответственно). Соблюдайте для ответа ног щепотку каждые 15 мин после анестезии.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Эта доза вызовет 60-90 мин анестезии, которая достаточно для процедуры заражения.
    2. Применить глазной смазки мазь в глаза мышей, чтобы предотвратить роговицы от высыхания. Как глаз смазка может высыхать, повторите офтальмологических смазки следует каждые 45 мин.
  3. Вводят 1 мл физиологического раствора (0,9% NaCl) подкожно на спине рядом с передней лапы, чтобы помочь регидратацию мышей при анестезии.
  4. Получить новую, чистую клетку. Следуйте инфекции процедура одну мышь в то время, помещая каждую мышь в новую клетку После заражения. Выполните PBS / фальшивую инфекции, а затем приступить к инфекции ОПО Candidaups.
  5. Возьмите наркозом мышь и открыть рот широкий, чтобы показать основание языка.
    1. Поместите 3 мм в диаметре ватный тампон, насыщенный 50 мкл PBS или blastospore суспензии, сублингвально в полости рта в течение 90 мин. Флип мышей через 15 мин спереди и сзади для предотвращения легких заторов, убедившись, что ватные шарики не двигаются.
  6. Установить таймер для каждого мышь, чтобы обеспечить 90 мин Sham или Candida инокуляции в полости рта.
  7. Храните их в клетке под лампой тепло (4 футов), и каждой мыши на тепло гелевыми вкладышами.
  8. Убедитесь, что язык изымается внутри и от зубов, чтобы избежать зубы разрывая язык.
  9. В конце 90 мин, снять ватным тампоном из уст мыши. Следите за любой мыши, которые могут оправиться от наркоза быстрее, чем 75 минут. В таком случае, анестезию их снова кетамином (40 мг / кг) только.

5. Сообщение Procedurе Мониторинг (во время 90 мин анестезии)

  1. Используйте тепло гелевыми вкладышами и в течение 90 мин анестезии.
    1. Для поддержания температуры тела и предотвращения удушья, не позволяют мышей, чтобы восстановить на регулярной кукурузы початка мыши постельные принадлежности.
  2. После выхода из наркоза, вводить дополнительные 1 мл стерильного 0,9% NaCl подкожно в двух местах на задней.
  3. Держите до пяти PBS (мнимого), привитых мышей в клетке. Дом только 1-2 мышей, инфицированных в клетке.
  4. Заполните процедуру карты с инициалами каждый день после процедуры, чтобы записать изменения в массе тела, уход привычки и общее состояние здоровья.

6. Оценка воспаления

6.1) Потеря веса

  1. Взвесьте мышей каждый день в течение инфекции, начиная со дня до процедуры заражения.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Как правило, иммунодефицитные мыши, которым вводили клетки Th17 и без каких-либо Т-регуляторными поддаваться 20-30% Потеря веса за счет роста грибковой нагрузки 19 и усугубляется воспаление.

6.2) Гистология забил языка

  1. Жертвоприношение мышей СО 2 удушья с последующим смещением шейных позвонков.
  2. Откройте челюсти и рассекать из языка с ножницами и щипцами. Используйте тупые щипцы провести языком, и с помощью ножниц дотянуться до задней части рта, чтобы надрезать заднюю часть языка.
  3. Для иммуногистохимического гематоксилином и эозином (Н & Е) окрашивания языка тканей, промыть язык тканей ледяным PBS. Добавить 5 мл 10% -ного формалина на 2-3 языках, и исправить их O / N в 15 мл пробирки.
    1. На следующий день, удалить формалина и погрузиться ткани в 5 мл 70% этанола, чтобы предотвратить гипер-фиксацию. Отправить их на коммерческой службы, чтобы продолжить парафин, срезы и окрашивание парафиновых срезов.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Коммерческая гистология служба используется для выполнения этих шагов.
  4. После того, как слайды назад от коммерческой эксплуатации гистологии, сорт воспаление при соблюдении срезах тканей под световым микроскопом.
    1. Результат от 0 до 5, где 0 не быть никакого воспаления, а 5 является наиболее сильное воспаление. Оценка воспаления с помощью таблицы 1.

6.3) производство цитокинов Th17 клеток

Примечание: Чрезмерное производство TNF-α является одним из показаний для чрезмерного иммунопатологии. При мышей адаптивно переносили с Th17 клеток только, это вызывает иммунопатологии, связанный с избыточной продукцией ФНО-α в Th17-клеток.

  1. Сбор клеточной суспензии из селезенки, лимфатических узлов, подмышечных лимфатических узлов и языка, с помощью ранее описанных методов 19,26.
  2. Рестимулировать клетки с форболмиристатацетата (РМА) (50 нг / мл) и иономицином (500 нг / мл) в течение 4 ч с брефелдин А (10 мкг / мл) в лАСТ 2 ч. Вымойте клеток с PBS и исправить их с помощью коммерческого набора Фиксация / пермеабилизирующего в соответствии с инструкциями изготовителя.
  3. Выполните внутрирегиональной окрашивание сотовой цитокинов с помощью Флуорохром сопряженных анти-ФНО-α, анти-IL-17A и ROR-сетей Y't антител, как описано выше 19.
  4. Вкратце, клетки вновь суспендируют в пермеабилизации буфера 1X с коктейлем из анти-ФНО-α, анти-IL-17A и ROR-сетей Y't антител, каждого антитела на 2 - 3 мкг / мл, конечная концентрация.
  5. Инкубируйте клетки в течение 1 ч при комнатной температуре.
  6. После инкубации, мыть клетки с 1X пермеабилизации буфера.
  7. Ресуспендируют осадок клеток в 500 мкл PBS с 0,5% бычьего сывороточного альбумина для проточной цитометрии.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

В этой модели, оба -infected мышей Candida и неинфицированных мышей в RAG-1 - / - иммунодефицитные фон были адаптивно переданы с Th17 клеток 3-5 дней до заражения. В общей сложности 10-12 мышей были использованы в экспериментах с 2 мышей в каждой Sham инфицированных групп и 4-5 в каждой из групп зараженных Candida. Наивные клетки были получены из конгенных Thy1.1 или CD45.1 мышей, поэтому введенные клетки Th17 были записаны в естественных условиях с использованием Thy1.1 или CD45.1 ...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Эта модель основана на индукции устные С Albicans инфекции зависит Th17 воспаление. Из-за отсутствия Т-регистры, Th17 клеток индуцируется воспаление безудержный и приводит к плохо разрешенных иммунопатологии. В пробирке происходит наивных CD4 клеток поляризованным клетки Th17 были использованы для приемных передачи. 40 - 50% от культивируемых клеток CD4 + показать детектируемого выражение IL-17A вокруг 3-й день (клетки Th17), и, следовательно, были использованы для инъекции в мышей. Основным...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторы заявляют, что у них нет конкурирующих финансовых интересов.

Благодарности

Мы благодарим доктора Хелену Бернштейн за предоставленный нам доступ к ее проточному цитометру. Мы также благодарим установку проточной цитометрии CFAR за услуги проточной цитометрии. Этот проект был частично поддержан финансированием CTSC и грантом корпорации STERIS/Университетских больниц - Отдела инфекционных заболеваний для PP.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
CAF-2Университет Питтсбурга (Сара Гаффен)-Культура Candida
U-bottom 96 луночных планшетов Fisher055588Используется для клеточной культуры
a-CD3 eBiosciences16-0031-85Поляризация клеток к условиям Th17
a-CD28 eBiosciences16-0281-85Поляризация клеток в условиях
Th17 m-IL-6Bio BasicRC232Поляризация клеток в условиях Th17
h-TGF-b НИР D240-BПоляризация клеток к условиям Th17
a-IFN-g eBiosciences16-7311-85Поляризация клеток в условиях Th17
a-IL-4 eBiosciences16-7041-85Поляризация клеток в условиях Th17
α-IL17A ef660eBiosciences50-7177-82Используется для клеточной культуры - 1:50
&-TNFa-PE-Cy7eBiosciences25-7423-41Используется для клеточной культуры - 1:100
&-RORgt PE eBiosciences12-6981-82Используется для клеточной культуры - 1:50
YNB без аминокислот) / Пептон/Декстроза Бульонная среда Био БейсикS507. РАЗМЕРМедиум для роста кандидоза
Шейкер инкубатор Нью-Брансуик ScientificInnova 4300Инкубационный рост для кандиды
15 мл пробиркиBio BasicBT888-SYИспользуется для клеточной культуры и роста кандиды
50 мл пробиркиBio BasicCT 788-YSИспользуется для культивирования клеток и роста кандиды
Настольная центрифугаVWR International LLC82017-654Для гранулирования кандиды -900 г
ЦентрифугаAllegraBeckman Coulter392302Клеточная культура - 480 г
1,5 мл пробирки eppendorfBio BasicBT620-NSПолучение конечной концентрации кандиды
2x параформальдегидаЭлектронная микроскопия Sciences15710Фиксация кандиды для подсчета
ГемоцитометрVWR International LLC15170-172Подсчет клеток
PBS - Фосфат буферизованный физиологический растворBio BasicPD8117Получение буферов
кетамин/ксилазин Университет Кейс Вестерн Резерв - Ресурсный центр для животных-Получен от ARC утвержденный протокол анестезии
Офтальмологическая смазка мазь Мазь Allergan-Eyeдля животных для предотвращения сухости
Физиологический раствор (0,9% NaCl)G Biosciences786-561Вводится животным для предотвращения обезвоживания
Ватный тампон диаметром 3 мм VWR International LLCBP76033 мм шарики от кандидозной инфекции
Нагревательные гелевые подушечкиCase Western Reserve University - Animal Resource Center-для поддержания температуры организма и быстрого восстановления
Окрашивание гематоксилином и эозиномHistoserv - MD-Гистология тканей
10% формалин Электронная микроскопия НаукаJC1111/MCГистология тканей
70% этанола VWR International LLC97064-490Цель стерилизации
PMA - Phorbol 12-myristate 13-ацетатSigma-AldrichP1585-1MGРестимуляция клеток
ИономицинLife Technologies124222 1мгРестимуляция клеток
Набор для фиксации пермеабилизацииeBiosciencesE16913-106Фиксация клеток для проточной цитометрии
Туберкулиновые шприцыBD Biosciences309659мышам инъекция
25 г x 3/8 иглыBD Biosciences309626мышам инъекция
Rag1 -/- мышиJackson laboratoriesАртикул: 002216Реципиент
мыши CD45.1 конгенные мышиJackson laboratoriesАртикул: 002014 Донорские клетки Th17
CB17-SCID мышиJackson laboratoriesАртикул: 001303Реципиентные мыши
Balb/c мышиJackson laboratoriesАртикул: 000651Донорские клетки Th17

Ссылки

  1. Allam, J. P., et al. IL-23-producing CD68(+) macrophage-like cells predominate within an IL-17-polarized infiltrate in chronic periodontitis lesions. Journal of Clinical Periodontology. 38 (10), 879-886 (2011).
  2. Loesche, W. J. Periodontal disease: link to cardiovascular disease. Compendium Of Continuing Education In Dentistry. 21 (6), 463-466 (2000).
  3. Sfyroeras, G. S., Roussas, N., Saleptsis, V. G., Argyriou, C., Giannoukas, A. D. Association between periodontal disease and stroke. Journal Of Vascular Surgery. 55 (4), 1178-1184 (2012).
  4. Huppler, A. R., Bishu, S., Gaffen, S. L. Mucocutaneous candidiasis: the IL-17 pathway and implications for targeted immunotherapy. Arthritis Research & Therapy. 14 (4), 217(2012).
  5. Sitheeque, M. A., Samaranayake, L. P. Chronic hyperplastic candidosis/candidiasis (candidal leukoplakia). Critical Reviews In. Oral Biology And Medicine : An Official Publication Of The American Association Of Oral Biologists. 14 (4), 253-267 (2003).
  6. Canabarro, A., et al. Association of subgingival colonization of Candida albicans and other yeasts with severity of chronic periodontitis. Journal Of Periodontal Research. 48 (4), 428-432 (2013).
  7. Urzua, B., et al. Yeast diversity in the oral microbiota of subjects with periodontitis: Candida albicans and Candida dubliniensis colonize the periodontal pockets. Medical Mycology. 46 (8), 783-793 (2008).
  8. Ergun, S., et al. Oral status and Candida colonization in patients with Sjogren's Syndrome. Medicina Oral, Patologia Oral Y Cirugia Bucal. 15 (2), e310-e315 (2010).
  9. Hernandez, Y. L., Daniels, T. E. Oral candidiasis in Sjogren's syndrome: prevalence, clinical correlations, and treatment. Oral Surgery, Oral Medicine, And Oral Pathology. 68 (3), 324-329 (1989).
  10. Gall, F., et al. Candida spp. in oral cancer and oral precancerous lesions. The New Microbiologica. 36 (3), 283-288 (2013).
  11. Grady, J. F., Reade, P. C. Candida albicans as a promoter of oral mucosal neoplasia. Carcinogenesis. 13 (5), 783-786 (1992).
  12. Dwivedi, P. P., Mallya, S., Dongari-Bagtzoglou, A. A novel immunocompetent murine model for Candida albicans-promoted oral epithelial dysplasia. Medical Mycology. 47 (2), 157-167 (2009).
  13. Cheng, S. C., Joosten, L. A., Kullberg, B. J., Netea, M. G. Interplay between Candida albicans and the mammalian innate host defense. Infection and Immunity. 80 (4), 1304-1313 (2012).
  14. Marodi, L., Johnston, R. B. Invasive Candida species disease in infants and children: occurrence, risk factors, management, and innate host defense mechanisms. Current Opinion In Pediatrics. 19 (6), 693-697 (2007).
  15. Kumamoto, C. A. Inflammation and gastrointestinal Candida colonization. Current Opinion In. Microbiology. 14 (4), 386-391 (2011).
  16. Kraneveld, E. A., et al. The relation between oral Candida load and bacterial microbiome profiles in Dutch older adults. PloS One. 7 (8), e42770(2012).
  17. Hernandez-Santos, N., et al. Th17 cells confer long-term adaptive immunity to oral mucosal Candida albicans infections. Mucosal Immunology. 6 (5), 900-910 (2013).
  18. Hasina, R., et al. ABT-510 is an effective chemopreventive agent in the mouse 4-nitroquinoline 1-oxide model of oral carcinogenesis. Cancer Prevention Research. 2 (4), 385-393 (2009).
  19. Pandiyan, P., et al. CD4(+)CD25(+)Foxp3(+) regulatory T cells promote Th17 cells in vitro and enhance host resistance in mouse Candida albicans Th17 cell infection model. Immunity. 34 (3), 422-434 (2011).
  20. Pandiyan, P., et al. The role of IL-15 in activating STAT5 and fine-tuning IL-17A production in CD4 T lymphocytes. J Immunol. 189 (9), 4237-4246 (2012).
  21. Pandiyan, P., Lenardo, M. J. The control of CD4+CD25+Foxp3+ regulatory T cell survival. Biology Direct. 3 (6), (2008).
  22. Pandiyan, P., Zheng, L., Ishihara, S., Reed, J., Lenardo, M. J. CD4(+)CD25(+)Foxp3(+) regulatory T cells induce cytokine deprivation-mediated apoptosis of effector CD4(+) T cells. Nat Immunol. 8 (12), 1353-1362 (2007).
  23. Conti, H. R., Huppler, A. R., Whibley, N., Gaffen, S. L., et al. Animal models for candidiasis. Current Protocols In Immunology. Coligan, J. E., et al. 105, 11-19 (2014).
  24. Conti, H. R., et al. Th17 cells and IL-17 receptor signaling are essential for mucosal host defense against oral candidiasis. J Exp Med. 206 (2), 299-311 (2009).
  25. Kamai, Y., et al. New model of oropharyngeal candidiasis in mice. Antimicrobial Agents And Chemotherapy. 45 (11), 3195-3197 (2001).
  26. Pandiyan, P., Bhaskaran, N., Zhang, Y., Weinberg, A. Isolation of T cells from mouse oral tissues. Biological Procedures Online. 16 (1), 4(2014).
  27. Gladiator, A., Wangler, N., Trautwein-Weidner, K., LeibundGut-Landmann, S. Cutting edge: IL-17-secreting innate lymphoid cells are essential for host defense against fungal infection. J Immunol. 190 (2), 521-525 (2013).
  28. Leppkes, M., Roulis, M., Neurath, M. F., Kollias, G., Becker, C. Pleiotropic functions of TNF-alpha in the regulation of the intestinal epithelial response to inflammation. International Immunology. 26 (9), 509-515 (2014).
  29. Bishu, S., et al. The adaptor CARD9 is required for adaptive but not innate immunity to oral mucosal Candida albicans infections. Infection and Immunity. 82 (3), 1173-1180 (2014).
  30. Quintin, J., et al. Differential role of NK cells against Candida albicans infection in immunocompetent or immunocompromised mice. Eur J Immunol. 44 (8), 2405-2414 (2014).
  31. Ramirez-Garcia, A., et al. Candida albicans and cancer: Can this yeast induce cancer development or progression. Critical Reviews In Microbiology. , 1-13 (2014).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Теги

Candida albicansTreg
Th17 Воспаление Модель орофарингеального кандидоза при иммунодефицитных мышей
Свяжитесь с нами
Рекомендовать библиотеке

Конфиденциальность

Условия эксплуатации

Политика

Авторские права © 2026 MyJoVE Corporation. Все права защищены.