Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Лапы-Перемещение: Роман, Чувствительный анализ Mouse Test цилиндр

24.2K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/52701

⸱

29 апреля 2015 г.

 , 

В этой статье

Краткое содержание

Классический анализ передней конечности асимметрия испытания цилиндров обычно используется для оценки поведения дефицит у крыс после черепно-мозговой травмы или инсульта; Однако, это не удается обнаружить последовательные дефицита у мышей. Это исследование показывает, что поведение количественная лапы перетаскивание более чувствительны анализ мозговой травмы у мышей.

Аннотация

Тест цилиндра обычно используется для прогнозирования локальной ишемии повреждение передней конечности в моторной коре грызунов. При размещении в цилиндре, грызуны исследовать по воспитанию и касаясь стенок цилиндра с их передних конечностей лапами за постуральной поддержки. После ишемического повреждения в передней конечности сенсомоторной коры крыс в большей степени опираться на их передних конечностей незатронутой лапы для осанки поддержки, в результате меньшего количества прикосновений с их пораженной лапой которая называется передних конечностей асимметрию. В противоположность этому, фокусное ишемического повреждения головного мозга мыши терпит неудачу, чтобы привести в сопоставимых последовательных дефицитов в передних конечностей асимметрии. В то время как дефицит передней конечности асимметрия наблюдается нечасто, мыши вы продемонстрировать новый поведение после инсульта называют "лапа-перетаскивание". Лапы-перетаскивание тенденция к мыши, чтобы перетащить его пострадавшего лапу по стенке цилиндра, а не непосредственно оттолкнуться от стены, когда демонтаж от задней к четвероногим позиции. Ранее нами было показано, чтолапа перетаскивания поведение весьма чувствителен к малым корковых ишемических повреждений в передней конечности моторной коры. Здесь мы предлагаем подробный протокол для лапы перетаскиванием анализа. Мы определяем, что лапы перетаскивания и продемонстрировать, как количественно лапу перетаскивания поведение. Тест цилиндр простой и недорогой тест, чтобы управлять, и не требуют предварительной подготовки или-стратегии лишение пищи. При использовании лапки перетаскивания анализ с тестом цилиндра, он заполняет нишу для прогнозирования корковых ишемических травм, таких как фототромбоза и эндотелина-1 (ET-1), индуцированного ишемией - двух моделей, которые когда-либо увеличивающихся в популярности, и производят меньше координационные травмы чем окклюзии средней мозговой артерии. Наконец, измерения лапу перетаскивания поведение в тесте цилиндров позволит исследования функционального восстановления после травмы, используя корковой широкий когорту трансгенных линий мышей, где предыдущий анализ передней конечности асимметрия не удалось обнаружить последовательной дефицита.

Введение

Цель нейронных стратегий регенерации, чтобы продемонстрировать как восстановление тканей и функциональное восстановление. Функциональное восстановление обычно оценивается с поведенческими тестами, которые измеряют функционального дефицита, в этом случае с участием двигательных навыков, которые связаны с повреждением определенных областях головного мозга. Травматическое повреждение головного мозга или ишемическое повреждение сенсомоторной области передних конечностей коры может быть продемонстрировано с помощью ряда поведенческих тестов. Один такой тест, тест цилиндр широко используется в крыс для оценки функционального дефицита в передних конечностей деятельности

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Заявление по этике: Все эксперименты были одобрены Мемориального университета Комитета по этике ухода за животными Ньюфаундленда в соответствии с руководящими принципами Канадского совета по уходу за животными.

1. Мыши

  1. Используйте взрослых мышей. В этом исследовании были использованы взрослый мужчина FVBN мышей (п = 10) между 2-4 месяцев. Дом мышей на 12:12 часов обратного цикла свет-темнота и обеспечивают стандартный корм для грызунов и воду без ограничений.

2. Необходимые материалы для испытания цилиндров

  1. Получить таблицу с прозрачным верхом, чтобы снять тест цилиндров. Размеры таблице значен....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Ранее мы показали, что лапы перетаскивания поведение появляется после локальной ишемии повреждение передних конечностей сенсомоторной коры и является положительным показателем повреждения 4. Intra-кортикальные инъекции ET-1 в передней конечности сенсомоторной коры были использованы для индуцирования ишемического поражения (фиг.8А, В). Это исследование изучило, распространяется ли лапа перетаскивания поведение дольше, чем 14 дней после травмы для его потенциальное использование для оценки функ.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Ключевые моменты, чтобы установить, когда количественного лапу перетаскивания поведение в тесте цилиндра следующее: я) определить число лапы-тащит против общего лап штрихи для каждой лапе перед черепно-мозговой травмой, чтобы установить базовый; II) определить число лапы тащит против общего лап штрихи для каждой лапе после ишемического повреждения; и III) различать лапу-сопротивления и бокового движения лапы вдоль стенки цилиндра во время вращения боковой части туловища мыши.

Лапы-перетаскив.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторы не имеют конкурирующие финансовые интересы.

Благодарности

Мы благодарим г-на Джона Кроу и Терри Upshall их технической экспертизы и помощи с фотографией и видеосъемка. Эта работа была поддержана операционной гранты JLV из Канадского института исследований в области здравоохранения и научных исследований и разработок корпорации Ньюфаундленда и сердце и инсульта Фонда Канады канадского партнерства для хода восстановления катализатора гранта. RBR был получателем Кейт Гриффитс Мемориал сердца и инсульта Фонд Высшей стипендии.

....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
оргстеклавысотой 17,5 см, внешний диаметр 9,5 см, внутренний диаметр 8,8 см, толщина стенки 0,35 см (или 3,5 мм)
смотровой стол54x56x66,5 см (ширина х длина х высота), верх стола лист оргстекла 51x51 см.
зеркальная34x58 см зеркальная
видеокамераSonyDCR-SR42Видеокамера со встроенным накопителем, функционалом SD, 40-кратным оптическим зумом
компьютераDellOptiplex 760Процессор: Intel, 3.0 ГГц, Память 4.00GB (RAM) 
компьютерный мониторSamsungS22C350H
Excel (Microsoft Office Professional Plus)Microsoftv14.0.7106.5003
VLC Media PlayerLANv2.1.2Медиаплеер с модуляцией скорости воспроизведения и поддержкой видео
Внешний жесткий дискWesternWDBAAU0020HBK-012 ТБ
Цилиндр из видеокамера Video Digital

Ссылки

  1. Schallert, T., Fleming, S. M., Leasure, J. L., Tillerson, J. L., Bland, S. T. CNS plasticity and assessment of forelimb sensorimotor outcome in unilateral rat models of stroke, cortical ablation, parkinsonism and spinal cord injury. Neuropharmacology. 39, 777-787 (2000).
  2. Kolb, B., et al.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Больше статей

Асимметрия передних конечностеймодель инсульта у мышейфототромботическая ишемияишемиявызванная эндотелином-1видеоанализповреждение моторной корыповеденческий тестфункциональное восстановление