Методическая статья

Лечение тромбоцитов Продукты с рибофлавин и УФ света: эффективность против высокий титр бактериального загрязнения

17.3K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/52820

⸱

24 августа 2015 г.

 ,  ,  ,  , 
1Terumo BCT, Scientific Affairs

В этой статье

Краткое содержание

Условия хранения продуктов тромбоцитов создают идеальную среду для размножения бактериальных загрязнителей до опасных уровней. Цель данного исследования состояла в том, чтобы использовать колониеобразующий анализ для оценки процесса восстановления патогенов на основе рибофлавина на фоне бактериального загрязнения в продуктах тромбоцитов человека с высоким титром.

Аннотация

Загрязнение единиц тромбоцитов бактериями уже давно признан в качестве существенного риска переливания из-за условий их хранения после пожертвования. Продукты хранятся обычно при 22 ° С на шейкере с перемешивающим, условие, которое может способствовать росту бактерий. Хотя общее число бактерий, как полагают, быть введены в продукт тромбоцитов чрезвычайно низка, эти бактерии могут размножаться в очень высоким титром перед переливанием, что потенциально приводит к серьезных побочных эффектов. Целью данного исследования было оценить рибофлавин основе процесс сокращения патогенов против панели бактерий, которые были определены как общие загрязняющих веществ продуктов тромбоцитов. Эта панель включает следующие организмы: С. эпидермальный стафилококк, С., С. Mitis, С. Пирролидонилпептидаза, С. Ю. marcescens, энтероколитные, Б. neotomae, Б. CEREUS, кишечной палочки, синегнойной и K. пневмонии. Каждый блок тромбоцитов инокулировали с высокой бактериальной нагрузки и отбирали пробы бдр до и после лечения. Колония формирования анализа, используя схему разведения конечной точки, был использован для определения предварительной обработки и после лечения бактериальных титров. Снижение Войти была рассчитывается путем вычитания после лечения титр от титра до лечения. Были отмечены следующие сокращения журнала: С. эпидермальный 4,7 журнала (99,998%), золотистого стафилококка 4,8 журнала (99,998%), С. Mitis 3,7 журнала (99,98%), С. Пирролидонилпептидаза 2.6 Журнал (99,7%), С. marcescens 4,0 журнала (99,99%), Ю. энтероколитные 3.3 Журнал (99,95%), Б. neotomae 5.4 Журнал (99,9996%), Б. эхиноцереус 2.6 Журнал (99,7%), кишечная палочка ≥5.4 журнала (99,9996%), П. палочки 4,7 журнала (99,998%) и К , пневмонии 2,8 лог (99,8%). Результаты этого исследования предполагают, что процесс может помочь снизить риск серьезных побочных эффектов, связанных с переливания бактериального загрязнения.

Введение

Переливание тромбоцитов, плазмы, эритроцитарной массы и целые продукты крови играют важную роль в современной медицине и может быть использовано для лечения различных заболеваний, заменить жизненно важных жидкостей и в конечном итоге спасти жизнь. Тромбоциты сотовый продукт, который либо изолирован от цельной крови и объединяли в transfusable дозы или собраны в процессе тромбоцитов афереза. Основная роль тромбоцитов в организме, чтобы остановить кровотечение при ранении сайтов и, чтобы помочь сохранить гемостаза. Пациенты, страдающие от низкой тромбоцитов клеток (тромбоцитопения) восприимчивы к спонтанных кровотечений и переливание тромбоцитов довести их тромбоцитов клеток рассчитывать обратно в пределах нормы. Собранные тромбоциты хранятся в течение максимум 5-7 дней и хранят при 22 ± 2 ° С при при постоянном перемешивании.

Несмотря на спасательные свойства переливания тромбоцитов остается незначительную опасность для получателей переливания из-за сотрудничестваntamination из этих продуктов паразитами, бактериями и вирусами 11. Реализация вирусной тестирования нуклеиновых кислот (NAT) значительно снижает риск передачи вируса от крупных кровеносных иметь агентов, таких как вирусом гепатита С (HCV), вируса гепатита В (HBV) и вирусом человеческого иммунодефицита (ВИЧ) 5. В недавней публикации из канадских крови услуги оценивает остаточный риск для этих агентов, чтобы быть 1 за 8 миллионов пожертвований на ВИЧ, 1 за 6,7 млн пожертвований для ВГС и 1 за 1,7 млн пожертвований для ВГВ 15.

Хотя бактерии, как правило, собрать меньше внимания в широкой общественности, частота бактериального загрязнения в продуктах тромбоцитов, по оценкам, будет выше, чем 1: 1000 7 и потому, что миллионы продуктов тромбоцитов переливается каждый год многие получатели подвергаются потенциально угрожающих жизни осложнений как сепсис 6. Исследования показывают, что бактериальная нагрузка в моментзагрязнения низкий, <100 колониеобразующих единиц (КОЕ) / продукта 2,16, однако питательная среда для хранения и температуры в помещении позволяет загрязнять бактерии размножаться опасно высокие титры перед переливанием. В настоящее время только разрешенных методов, доступных для предотвращения бактериально загрязненных продуктов от достижения получателя тромбоцит посредством использования культуры на основе систем и быстрого точки ухода испытания. Вкратце, для культивирования на основе систем продукты тромбоцитов хранятся на мешалкой при 22 ° С в течение 12-24 ч, чтобы позволить бактерии размножаться в продукте, на котором образец 4-8 мл удалены из продукта тромбоцитов и инокулировали в колбу содержащий питательные среды. Бутылка помещается в инструмент, который контролирует бутылку для роста бактерий. Если прибор обнаруживает рост бактерий в бутылку она попадает и соответствующий блок тромбоцитов отбрасывается. Хотя этот процесс является достаточно успешным на выявление быстрый GROкрыло организмов, многие из медленно растущих видов не растут на достаточно высоком титре быть обнаружен, таким образом, создавая потенциал для ложноотрицательных подразделений, которые будут выпущены для переливания 7,12,14,16,22. В отличие от культуры систем обнаружения, быстрое точка тестирования ухода, как правило, осуществляется в конце срока хранения тромбоцитов при бактериальной нагрузки значительно увеличивается. Высшие титры требуется, так как точка испытаний по уходу за менее чувствительны, чем систем на основе культуры, и только надежно обнаруживать бактерии, как только они достигают титр ≥1 х 10 3 КОЕ / мл 17. Однако такие тесты могут предоставить результаты в течение 1 часа выборки. Изменчивость в исполнении этих испытаний привели к выпуску фальшивой отрицательной продукта, в результате чего роковую септический реакцию у реципиента 9.

Альтернативный способ борьбы с вопроса о бактериального загрязнения продуктов тромбоцитов через повседневного использования восстановительной возбудитель прокESS, которые могут инактивировать бактерии загрязняющих вместо пытаться их обнаружить. Использование рибофлавина в качестве фотосенсибилизатора, в сочетании с УФ-светом, как было показано, снижают инфекционность широкого спектра патогенных переносимых кровью загрязнений, включая бактерии 3,4,8,10,19-21 .В использованием рибофлавина и УФ свет для снижения количества болезнетворных микроорганизмов является нетоксичным и не оказывает мутагенного и рибофлавин и УФ света обработке компоненты, как было показано, чтобы быть безопасным для получателей переливания, а также для тех, обработки продуктов крови 18. Вкратце, рибофлавин молекулы могут связывать с нуклеиновых кислот (ДНК и РНК) бактерий, паразитов, вирусов и любой ядросодержащих клеток (например, белые кровяные клетки). Воздействие УФ света активирует рибофлавин, вызывая химическое изменение функциональных групп нуклеиновых кислот (прежде всего гуанин оснований), таким образом предотвращая репликацию и / или транскрипцию нуклеиновой кислоты, оставляя организм инактивированный 13. Anucleated клетки, как пластиныпозволяет и эритроциты не зависит от химии рибофлавина из-за отсутствия нуклеиновой кислоты.

Предыдущая работа с рибофлавин и УФ технологии оценили выберите группу бактерий, используя экспериментальную конструкцию, предназначенную для имитации продукт тромбоцитов загрязненную с клинически значимой бактериальной нагрузки (<20 КОЕ / продукта) 8. Цель данного исследования заключалась в оценке рибофлавин и УФ света процесс против высоким титром бактериального загрязнения (> 1,0 х 10 5 КОЕ / мл) в продуктах, обработанных тромбоцитов в плазме для того, измерения общего бактериального потенциала сокращения системы. Основываясь на данных, собранных из hemovigilance исследованиях 1, панель общераспространенных грамотрицательных и грамположительных микроорганизмов был выбран для оценки в этом исследовании, и включала в себя следующие виды: эпидермального стафилококка, золотистый стафилококк, стрептококк Mitis, Streptococcus Пирролидонилпептидаза, Serratia marcescens, Yersinia энтероколитные ,Brucella neotomae, Bacillus Cereus (вегетативная форма), Esherichia палочка, синегнойная палочка и клебсиелла пневмонии. Все организмы, кроме B. эхиноцереус, были получены из АТСС и приоритет был сделан на получение бактериальных штаммов, которые были определены как будучи изолированным от компонентов крови. Имени Б. эхиноцереус испытания в этом исследовании является клинической штамм, выделенный внутри от загрязненной продукции тромбоцитов.

Протокол

1. Бактерии подвески Приготовление:

  1. С прожилками культурального планшета, асептически инокуляции одну колонию в 250 мл стерильной флакон, содержащий 100 мл соответствующей ростовой среде (таблица 1) путем стерильной микробиологической петли.
  2. Поместите бутылку в орбитальном инкубаторе при встряхивании в соответствующих условиях (таблица 1) в течение 1-2 дней, периодически проверять для роста. Установите скорость шейкер до 140 оборотов в минуту.
  3. Асептических передачи бактериальной суспензии на две стерильные 50 мл конические пробирки и центрифуги трубок при 3000 х г в течение 20 мин при 23 ° С.
  4. Аспирируйте супернатант и ресуспендируют осадок каждого бактериального 15 мл стерильной воды пептон. Вихревой по мере необходимости. Объедините приостановлено бактерий культуры в одной пробирке / контейнере.
  5. Титр исходной культуры в трех экземплярах на 4 секции, чтобы определить запас культуры титр.
  6. Охладите в течение до 2 недель при 477; 2 ° С до необходимости. Повторное титра культура во время использования, см шаг 4,8.

2. Подготовка тромбоцитов продукта:

  1. Соберите стандартный продукт афереза ​​тромбоцитов человека в аккредитованной банком крови. Продукт тромбоцитов должны соответствовать следующим требованиям сбора: 90-360 мл объема и 0,8 -3.8 х 10 6 тромбоцитов / мкл концентрации.
    1. Убедитесь, что продукт тромбоцитов держалась в течение как минимум 2 ч перед обработкой для снижения количества болезнетворных микроорганизмов. Хранить продукты в 22 ± 2 ° С в инкубаторе тромбоцитов без перемешивания в течение этих 2 часов. Через два часа обеспечить продукт тромбоцитов перемешивают при 22 ± 2 ° С в инкубаторе с тромбоцитами. Используйте продукт в течение 22 ч после сбора.
  2. Использование 3 мл шприц удалить образец 2 мл для измерения рН 22с продукта тромбоцитов. Используйте анализатор газов крови, чтобы обеспечить продукт имеет рН> 6,6, Использование того же образца для измерения концентрации тромбоцитов в тромбоцитов продукта с помощью гематологического анализатора. Убедитесь, что изделие соответствует 0.80-3.8 × 10 6 тромбоцитов / мкл требование концентрации коллекция.
  3. Визуально оценку завихрение продукта тромбоцитов. Если продукт имеет "0" вихревой продукт будет отброшен.
  4. Держите сумку тромбоцитов под прямым источника белого света и сжать мешок тромбоцитов кратко. Визуально наблюдать вихревое образец образца тромбоцитов. Оценка продукта, используя следующую шкалу.
    ПРИМЕЧАНИЕ: 2 - Положительный Вихревой: Вихревой неоднородность видимый по всей сумке с сильным контрастом. 1 - средний Вихревой: Некоторые неоднородность видно, но только в нескольких местах и ​​с плохой контрастностью. 0 - Отрицательные Вихревой: Мутная однородность, оставшееся до и после сжатия мешок тромбоцитов

3. рибофлавин и ультрафиолетового света процесса:

  1. ТранSFER продукт тромбоцитов к рибофлавин и УФ освещения и хранения света мешок, используя стерильный док трубки устройства. После передачи удалить пустую блок тромбоцитов сбора мешок, используя герметик труб и выбросьте пустую сумку как с потенциально опасными отходами.
  2. Удалить 35 мл мешок 500 мкМ исходного раствора рибофлавина от его света внешней защитной пленкой. Стерильные док рибофлавин комплект на входе линии мешка обработки и хранения. Разрешить содержимое стекать в блок тромбоцитов.
  3. Повесьте рибофлавин мешок / обработки и хранения сумку набор из рибофлавина сумку и осторожно выразить остаточный воздух из мешка обработки и хранения и в рибофлавина мешок. Обеспечить небольшое количество тромбоцитов продукта также экспрессируется в рибофлавина мешочек для полоскания остаточного рибофлавина в продукт тромбоцитов. Разрешить слить рибофлавин и тромбоцитов решение в сумку обработки и хранения, а затем зажать впускной линии. Удалить пустую сумку рибофлавин намING герметик труб и выбросьте пустую сумку как с потенциально опасными отходами.
  4. Стерильные пристыковать "трубки линии 6 с внутренней шприца разъем на входе линии освещения и хранения сумку. Прикрепите 10 мл шприца (удалить поршень) на розеткой шприца.
  5. Соблюдая правила асептики, добавьте 5 мл фондовых бактерий в шприца с помощью пипетки. Откройте зажим на входе линии и позволяют бактериям стекать в тромбоцитов продукта. Промыть корпус шприца, позволяя некоторые тромбоцитов продукт стекать обратно в 10 мл шприца. Удалить 10 мл шприца.
  6. Консерванта прикрепить 30 мл шприц и промыть впускным отверстием как минимум два раза, чтобы обеспечить фондовые бактерии смешивают с продуктом тромбоцитов. После того как продукт хорошо перемешан, используйте чистый шприц 5-10 мл и 2 мл удалить образец предварительной обработки. Используя новый шприц обеспечить любой воздуха, поступающего со стадии прививки или шаг выборки будет удален.
    1. Титр образца предварительной обработки в разделе 4.
  7. Снимите впускной линии из мешка обработки и хранения, а вес продукта.
  8. Поместите продукт в иллюминатор и следуйте команды, чтобы начать стандартное лечение тромбоцитов.
    1. Введите в Operator ID.
    2. Безопасные и смонтировать мешок с Просветителя валиком.
    3. Введите Sample ID в Просветителя, используя либо считыватель штрих-кодов или клавиатуры ручного ввода.
    4. Тип сканирования продукт.
    5. Закройте кварцевый зажим.
    6. Устройство освещения автоматически доставлять 6,24 Дж / мл энергии. Типичное время лечения занимает 5-10 мин.
  9. После лечения стерильной стыковки "трубки линии с розеткой шприца на линии образец лампы лечения и мешок для хранения 6. Убедитесь, что продукт хорошо смешивают и затем прикрепить 5 мл шприц и снять пробу после лечения 2 мл.
    1. Титр после лечения СэмPLE в разделе 4.

4. Бактериальный титр

  1. Оцените титр образцов предварительной обработки и пост-обработки и подготовки соответствующего количества 5 мл разбавления труб, необходимых для выполнения конечной точки серийное разведение каждого образца. Соблюдая правила асептики, заполните необходимые трубки с 1,8 мл пептон воды.
  2. Титр каждый образец с помощью схемы последовательного разбавления 10-кратное. Асептических передачи 0,2 мл из неразведенном образце к первой трубке (разбавления 10 -1). Вихревой Это разбавление трубки и передача 0,2 мл на следующий разбавления трубки. Продолжить серийное разведение с помощью необходимого количества разведений.
    1. Асептических передача 100 мкл каждого разбавления быть покрытием на соответствующий агаром (Таблица 1).
  3. С помощью стерильной распределитель клеток, равномерно распределить пробу на каждый агаром.
  4. Обратить и инкубировать пластин при соответствующих условиях ( Таблица 1) в течение 1-2 дней периодически проверяя для роста.
  5. Граф пластины с 30-300 колоний. Плиты, содержащие больше, чем 300 колоний считаются слишком много, чтобы считать (TNTC). Плиты, содержащие менее 30 колоний считаются ниже предела количественного определения (ПКО).
  6. Рассчитать титр каждого испытуемого образца и записывать результаты как КОЕ / мл.
    1. Используйте следующую формулу для расчета КОЕ / мл:
      figure-protocol-1
    2. Если нет колоний на самой низкой разбавления пластины, используйте следующее уравнение для расчета предела обнаружения (LOD):
      figure-protocol-2
      и
      figure-protocol-3
      Где:
      N = наименьшее количество частиц (КОЕ) в рRoduct, которые могут быть обнаружены с уверенностью.
      Р = вероятность того, что микроорганизм будет незамеченными; для 95% доверия детектирования микроорганизма, Р = .05.
      V = общий объем в мл продукта
      v = объем покрытием (мл) х уровень разбавления пластины
  7. Отрицательный контроль, пластины 0,5 мл пептон воды, используемой для серийных разведений на каждый из двух чашек с агаром. Используйте тот же тип пластины, как образцы для тестирования. Обратить и инкубировать пластину в соответствующих условиях в течение 1-2 дней периодически проверять для роста.
    1. Если рост наблюдается по обе чашки с агаром, бутылка пептон воды, используемой должны быть уничтожены; Результаты исследования также недействительным.
  8. Для положительного контроля, повторной титра фондовый культуры бактерий, который был использован. Обратить и инкубировать пластин при соответствующих условиях в течение 1-2 дней периодически проверять для роста. Титр составляет ± 1,0 войти КОЕ / мл записиред складе титр (смотрите раздел 1.5) для исследования, которое будет считаться действительным.

Результаты

Снижение одиннадцати различных видов бактерий оценивали с помощью основе рибофлавин и УФ-излучения процесс PRT. Эти агенты представляют некоторые из наиболее распространенных загрязняющих веществ продуктов тромбоцитов и включают в себя пять грамположительных и грамотрицательных шесть организмов. По меньшей мере шесть тромбоцитов оценивали продукты в организме, и каждый продукт инокулируют достаточно бактерий для получения> 1,0 х 10 5 КОЕ / мл окончательного титр бактерий в продукте тромбоцитов. Перед обработкой образец был удален, чтобы определить предварительной обработки титр, после чего продукт был быстро тромбоцитов, обработанных рибофлавина и ультрафиолетового процесса. После лечения продукции тромбоцитов были замечены следующие сокращения журнала: С. эпидермальный 4,7 журнала (99,998%), золотистого стафилококка 4,8 журнала (99,998%), С. Mitis 3,7 журнала (99,98%), С. Пирролидонилпептидаза 2.6 Журнал (99,7%), С. marcescens 4,0 журнала (99,99%), Ю. энтероколитные 3.3 Журнал (99,95%), Б.neotomae 5.4 Журнал (99,9996%), Б. эхиноцереус 2.6 Журнал (99,7%), кишечная палочка ≥ 5,4 журнала (99,9996%), Р. палочки 4,7 журнала (99,998%) и К. пневмонии 2,8 журнала (99,8%) (рис 2). Все блоки отвечают спецификации системы, как указано выше, для рибофлавина и ультрафиолетового процесса. Дополнительное тестирование снижение проводили с S. Пирролидонилпептидаза использованием Баффи пальто, полученные тромбоциты. Нет существенной разницы не наблюдалось в сокращении S. Пирролидонилпептидаза в светлого сгустка, полученных пластинок в сравнении афереза ​​тромбоцитов (данные не показаны).

figure-results-1
Таблица 1: условия роста бактериальных видов оценивали с помощью рибофлавина и ультрафиолетового света. Панель обоих грамотрицательных и грамположительных бактерий, которые, как было показано загрязнять продукты тромбоцитов были выбраны для этого исследования. Условия роста (температура и СМИ типа), используемые для распространения и Титег организмы показаны.

figure-results-2
Рисунок 1: рибофлавин и УФ процесс сокращения свет патоген. Рибофлавин растворяли в 0,9% физиологического раствора при номинальном концентрации 500 мкМ. Решение было стерильно подключен и сливают в каждой тромбоцитов продукта. Бактерии был добавлен в асептических к каждой единице тромбоцитов, а затем обрабатывают 6,2 Дж / мл УФ энергии (примерно 6-10 мин). В этом в пробирке изучение блок тромбоцитов после лечения был выбран, чтобы определить окончательную бактериальной титр.

figure-results-3
Рисунок 2: Снижение различных видов бактерий при обработке рибофлавина и ультрафиолетового света рибофлавин и УФ свет используется для уменьшения бактериальной нагрузки общих бактериальных загрязнений продуктов тромбоцитов.. Снижение журнала 10 разницамежду средней титра до лечения и среднего титра после лечения. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Обсуждение

Бактериальный скрининга стало обычной практикой в ​​учреждениях банков крови и в течение многих местах это служит в качестве основного метода, чтобы предотвратить переливание бактериально загрязненных тромбоцитов. Хотя бактериальный скрининг, как правило, запретов большинство быстрорастущих грамотрицательных бактерий, таких как S. marcescens, Е. палочка и Е. клоаки, она изо всех сил, чтобы обнаружить медленно растущие грамположительные бактерии, такие как S. стафилококк, стрептококки. и С. эпидермальный 8. К сожалению, эти три грамположительных бактерий вовлечены в свыше 50% всех зараженных единиц тромбоцитов и переливание продуктов, содержащих тромбоцитов эти три организмов привело к смертности пациентов 1.

Бактериальный скрининга зависит от бактериальной титра в тромбоцитов продукта, чтобы быть достаточно достаточно высокой, так что по крайней мере один организм содержится внутри типичного 4-8 мл пробы скрининга, Если бактериальная титр не достаточно высока для бактерия быть захвачены в объеме образца 4-8 мл, устройство неправильно помечен как отрицательный и он будет выпущен для переливания. Альтернативный подход к бактериальной скрининга может быть использовать активную процесс, который может быть выполнен на всех тромбоцитов единиц, и это может оказать загрязняющих организмов как нефункциональные.

В этом исследовании, высокие титры бактерий преднамеренно добавлены тромбоцитов единиц, чтобы проверить общую емкость снижение процесса восстановления света патогена рибофлавина и ультрафиолетового. Хотя бактериальной нагрузки испытания в этом исследовании значительно превышают те, которые обычно находятся в продуктах крови во время пожертвования, это исследование помогает продемонстрировать, что процесс рибофлавина и ультрафиолетового света может значительно снизить титр жизнеспособных бактерий в загрязненной блока тромбоцитов 2.6 до 5.4 журнал (снижение 99.7-99.9996% загрязняющих бактерий) (рис 2). Чтобы получить ACCURAте значение снижения журнала, важно, что оператор имеет хорошую технику вдоль асептического с точными навыков пипеток при выполнении бактериальных шаги титр. Неточное дозирование при выполнении серийных разведений может привести к накоплению ошибок, таким образом неточным измерением титра.

Данные, собранные в этом исследовании поддерживает предыдущую работу с рибофлавином и ультрафиолетового света, который бросил вызов систему против низкого уровня, клинически значимых бактериемия (<20 КОЕ / единицу). Предыдущий исследования был разработан, чтобы имитировать реальную клиническую событие загрязнения, и результаты показали рибофлавин и УФ-излучения был эффективен в предотвращении роста бактерий на 7-дневный срок хранения тромбоцитов. Моделирование на основе данных из предыдущего исследования предполагает, что текущие оценки риска бактериального загрязнения продуктов тромбоцитов может быть уменьшена на целых 98% от текущих уровней 8. Процесс свет рибофлавин и УФ выгодно бактериальной экранеING, которая только продемонстрировали 66% эффективность в обнаруживать бактериальные загрязняющие вещества в тромбоцитов единиц, когда оспаривается с клинически значимой бактериальной нагрузки 8.

Как и во всех технологиях, PRT лечение продуктов тромбоцитов, чтобы предотвратить осложнения, связанные с бактериально загрязненных единиц тромбоцитов имеет свои ограничения. Системы PRT не эффективны против бактериальных спор и не инактивируют эндотоксин, таким образом, даже если система PRT могут инактивировать высокие титры грамотрицательных бактерий остальные эндотоксина еще может вызвать септический шок у реципиента. PRT лучше всего проводить рано во время хранения, прежде чем бактерии могут распространяться с высокими титрами.

В заключение, как показано с помощью комбинации этих двух исследований, процесс рибофлавина и ультрафиолетового света является эффективным при снижении бактериальной нагрузки обеих грамотрицательных и грамположительных организмов и может предложить реальную альтернативу скрининга бактериальных. Регулярно treatinг тромбоцитов продукты с рибофлавином и УФ-света также имеет дополнительное преимущество снижения потенциальную передачу других передающихся через кровь агентов, таких как вирусы и паразиты.

Раскрытие информации

Все авторы этой статьи в настоящее время работают по Terumo BCT, разработчик и производитель системы Mirasol PRT. Публикация плата за это видео-статьи были оплачены Terumo BCT.

Благодарности

У авторов нет благодарностей.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Mirasol IlluminatorTerumo BCTN/A
Mirasol Сумка для лечения/храненияTerumo BCTN/A
Гематологический анализаторBeckman-CoulterAc• T diff 
Анализатор газов кровиSiemensRapidLab 1265 
Стерильное док-устройствоTerumoBCT TSCD
Тромбоцитарный инкубаторHelmerPC2200
Орбитальный инкубаторШейкер Lab-Line4628
Сухой инкубаторFisherIso-temp
Class II A/B3 Шкаф биобезопасностиТермо-форма1286
Трубка ГерметикSebraSmart Sealer II
Настольная центрифугаIECCentra GP8R
10 мл ШприцBD309604
30 мл ШприцBD309650
мл Разводящая пробиркаVWR211-0058
50 мл Коническая пробиркаCorning430290
МикропипеткаGilsonP-200
МикропипеткаRaininR-200
Repeat PipetteEppendorf4780
1-200 µ l Фильтрующий наконечникCostar4810
25 мл Одноразовая серрологическая пипеткаCostar4489
5 мл Одноразовая серрологическая пипеткаCostar4487
35 мл 500 &; M RiboflavinTerumo BCT35 мл 500 &; М 
Бруцелла-агар с 5% лошадиной кровиBBL221547
инфузия мозга сердцаTeknovaB9993
Пептонная водаBD257087
триптиказой Соевый бульонBD299113
триптиказой соевого агараRemelR01917
Термоинактивированная лошадиная сывороткаGibco26050
5

Ссылки

  1. Brecher, M. E., Hay, S. N. Bacterial contamination of blood components. Clin. Microbiol. Rev. 18 (1), 195-204 (2005).
  2. Brecher, M. E., Holland, P. V., Pineda, A. A., Tegtmeier, G. E., Yomtovian, R. Growth of bacteria in inoculated platelets: implications for bacteria detection and the extension of platelet storage. Transfusion. 40 (11), 1308-1312 (2000).
  3. Cardo, L. J., et al. Pathogen inactivation of Leishmania donovani infantum in plasma and platelet concentrates using riboflavin and ultraviolet light. Vox Sang. 90 (2), 85-91 (2006).
  4. Cardo, L. J., Salata, J., Mendez, J., Reddy, H., Goodrich, R. Pathogen inactivation of Trypanosoma cruzi in plasma and platelet concentrates using riboflavin and ultraviolet light. Transfus. Apher. Sci. 37 (2), 131-137 (2007).
  5. Dodd, R. Y. Current viral risks of blood and blood products. Ann. Med. 32 (7), 469-474 (2000).
  6. Dodd, R. Y. Bacterial contamination and transfusion safety: experience in the United States. Transfus. Clin. Biol. 10 (1), 6-9 (2003).
  7. Dumont, L. J., et al. Screening of single-donor apheresis platelets for bacterial contamination: the PASSPORT study results. Transfusion. 50 (3), 589-599 (2010).
  8. Goodrich, R. P., Gilmour, D., Hovenga, N., Keil, S. D. A laboratory comparison of pathogen reduction technology treatment and culture of platelet products for addressing bacterial contamination concerns. Transfusion. 49 (6), 1205-1216 (2009).
  9. Greco-Stewart, V. S., et al. Serratia marcescens strains implicated in adverse transfusion reactions form biofilms in platelet concentrates and demonstrate reduced detection by automated culture. Vox Sang. 102 (3), 212-220 (2012).
  10. Keil, S. D., et al. Inactivation of Plasmodium spp. in plasma and platelet concentrates using riboflavin and ultraviolet light. Transfusion. 53 (10), 2278-2286 (2013).
  11. Kleinman, S., Chan, P., Robillard, P. Risks associated with transfusion of cellular blood components in Canada. Transfus. Med Rev. 17 (2), 120-162 (2003).
  12. Larsen, C. P., Ezligini, F., Hermansen, N. O., Kjeldsen-Kragh, J. Six years' experience of using the BacT/ALERT system to screen all platelet concentrates, and additional testing of outdated platelet concentrates to estimate the frequency of false-negative results. Vox Sang. 88 (2), 93-97 (2005).
  13. Mundt, J. M., Rouse, L., Van den Bossche, J., Goodrich, R. P. Chemical and Biological Mechanisms of Pathogen Reduction Technologies. Photochem. Photobiol. , (2014).
  14. Murphy, W. G., et al. Screening platelet concentrates for bacterial contamination: low numbers of bacteria and slow growth in contaminated units mandate an alternative approach to product safety. Vox Sang. 95 (1), 13-19 (2008).
  15. Brien, S. F., et al. Current incidence and residual risk of HIV, HBV and HCV at Canadian Blood Services. Vox Sang. 103 (1), 83-86 (2012).
  16. Pearce, S., Rowe, G. P., Field, S. P. Screening of platelets for bacterial contamination at the Welsh Blood Service. Transfus. Med. 21 (1), 25-32 (2011).
  17. Ramirez-Arcos, S., Kou, Y., Perkins, H. Evaluation of a universal point-of-issue assay for bacterial detection in buffy coat platelet components. Vox Sang. 107 (2), 192-195 (2014).
  18. Reddy, H. L., et al. Toxicity testing of a novel riboflavin-based technology for pathogen reduction and white blood cell inactivation. Transfus. Med. Rev. 22 (2), 133-153 (2008).
  19. Ruane, P. H., et al. Photochemical inactivation of selected viruses and bacteria in platelet concentrates using riboflavin and light. Transfusion. 44 (6), 877-885 (2004).
  20. Tonnetti, L., Proctor, M. C., Reddy, H. L., Goodrich, R. P., Leiby, D. A. Evaluation of the Mirasol pathogen reduction technology system against Babesia microti in apheresis platelets and plasma. Transfusion. 50 (5), 1019-1027 (2010).
  21. Vanlandingham, D. L., et al. Photochemical inactivation of chikungunya virus in plasma and platelets using the Mirasol pathogen reduction technology system. Transfusion. 53 (2), 284-290 (2013).
  22. Walther-Wenke, G., et al. Monitoring bacterial contamination of blood components in Germany: effect of contamination reduction measures. Vox Sang. 100 (4), 359-366 (2011).

Перепечатки и разрешения

Теги

УФ-обработка рибофлавиномтромбоцитный концентратснижение патогенной нагрузкианализ логарифмического сниженияметод конечного разведениявоздействие УФ-излученияхранение тромбоцитовинактивация бактерийбезопасность трансфузии
Лечение тромбоцитов Продукты с рибофлавин и УФ света: эффективность против высокий титр бактериального загрязнения
Связаться с нами
Порекомендовать библиотеке

Конфиденциальность

Условия использования

Политики

© 2026 MyJoVE Corporation. Все права защищены.