Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Подготовка высоко пористый Координационного полимерных покрытий на макропористых полимерных монолитов для повышенного обогащения фосфопептидов

9.9K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/52926

⸱

14 июля 2015 г.

 ,  ,  ,  ,  , 
1The Molecular Foundry, E. O. Lawrence Berkeley National Laboratory, 2Institute of Chemical Sciences, Bahauddin Zakariya University, 3Department of Chemistry, University of the Balearic Islands, 4Beijing Key Lab of Bioprocess, College of Life Science and Technology, Beijing University of Chemical Technology

В этой статье

Краткое содержание

Представлена процедура приготовления пористой гибридной разделительной среды, состоящей из монолита макропористого полимера, покрытого изнутри микропористым координационным полимером с большой площадью поверхности.

Аннотация

Описываем протокол подготовки гибридных материалов на основе высокопористых координационных полимерных покрытий на внутренней поверхности макропористых полимерных монолитов. Разработанный подход основан на получении макропористого полимера, содержащего функциональные группы карбоновых кислот, и последующем поэтапном контролируемом росте слоя пористого координационного полимера на поверхности пор полимерного монолита на основе раствора. Полученный гибрид металл-органического полимера имеет высокую удельную площадь поверхности микропор. Количество сайтов железа (III) увеличивается за счет металлоорганической координации на поверхности пор функциональной полимерной основы. Увеличение количества металлических участков связано с количеством итераций процесса нанесения покрытия.

Разработанная схема подготовки легко адаптируется к формату капиллярной колонки. Функциональный пористый полимер получают в виде автономного одноблочного пористого монолита внутри капилляра, что дает проточное сепарационное устройство с отличной пропускной способностью и умеренным противодавлением. Металл-органическая полимерная гибридная колонка показала отличные результаты по обогащению фосфопептидами из расщепленных белков и их последующему детектированию с помощью матричной лазерной десорбционно-ионизационной времяпролетной масс-спектрометрии. Представленный экспериментальный протокол является весьма универсальным и может быть легко реализован на различных органических полимерных носителях и покрытиях с большим количеством пористых координационных полимеров и металлоорганических каркасов для многократной очистки и/или разделения.

Введение

Пористые координационные полимеры (PCPS) являются координационные соединения на основе металлических центров, связанных с органическими лигандами с повторяющимися координационных органов, проходящих в 1, 2 или 3 размеров, которые могут быть аморфными или кристаллическими 1-3. В последние годы этот класс пористых материалов привлекло всеобщее внимание из-за их высокой пористости, химической широкого перестройки частоты, и их стабильности. Лечащие врачи были изучены для широкого спектра приложений, включая хранение газа, разделение газа и катализ 3-6, и совсем недавно, первые аналитические приложения винтовых насосов были описаны 7.

Из-за их повышенной химической функциональности и высокой пористости винтовых насосов были направлены на их огромный потенциал для улучшения процессов очистки и хроматографического разделения, и число докладов, касающихся этой темы были опубликованы 7-13. Тем не менее, производительность винтовых насосов в настоящее время не на equivaleУровень NT с существующими хроматографических материалов вероятно из-за быстрой диффузии через большие межчастичных пустот в уплотненных слоев этих тел в связи с их, как правило, неправильной формы морфологии их частиц или кристаллов. Это распределены неравномерно упаковка приводит к более низкой, чем ожидалось, производительность, а также Подпор давления высокой колонне и нежелательных пик формы морфологии 14,15.

Для того чтобы решить проблему быстрой диффузии через пустоты между частицами и одновременно повысить производительность винтовых насосов для аналитических приложений, разработка гибридного материала на основе полимерной макропористой монолита 16, который содержит PCP на поверхности макропор будет желательно. Полимерные монолиты самодостаточны, цельные материалы, которые могут выдержать конвективный поток через их поры, что делает их одним из наиболее эффективных альтернатив бисера упаковки и успешно продаются на несколько C ompanies 17,18. Пористых полимерных монолитов, как правило, на основе полимеризации мономера и сшивающего агента в присутствии порообразователей, которые, как правило, бинарные смеси органических растворителей. Полученные монолитные материалы имеют структуру microglobular и высокую пористость и проницаемость потока.

Простой подход, чтобы объединить эти материалы для подготовки полимера монолит, содержащий PCP основан на непосредственном добавлении синтезированного винтовых насосов в полимеризации смеси монолита. Этот подход привел к винтовых насосов основном похоронен в полимерной эшафот, а не быть активным для дальнейшего применения конечного материала 14,15. Отличается синтетический подход очевидно, что необходимо для того, чтобы, например, разработать единые фильмы винтовых насосов или кристаллических металлоорганических структур (MOFs), где большинство пор, содержащихся в кристалле доступны из макропор полимера монолит.

т "> В этом сообщается простой протокол для подготовки металлической-органический полимер гибридного материала (MOPH) на основе макропористого полимерного носителя с подходящими функциональными группами для крепления винтовых насосов, которые могут быть легко реализованы как автономные одного -piece полимер монолит в формате колонки с оптимальными свойствами для проточных применений. Процедура синтеза полимера с последующим просто комнатной температуры раствор на основе   Способ расти PCP покрытие на внутренней поверхности поры монолита 19-20. В качестве первого примера мы опишем приготовление железа (III), benzenetricarboxylate (FeBTC) координация полимерной пленки в течение макропористый поли (стирол-дивинилбензола и метакриловой кислоты) монолита. Этот метод эффективен для приготовления сыпучих порошков, а также капиллярных колонок и описано протокол легко осуществимыми с другими винтовых насосов. В качестве примера потенциала MOPHs как функциональных материалов для потока-throuGH приложения, мы применили разработанный FeBTC MOPH который содержит плотное покрытие Fe (III) центры по обогащению фосфопептиды из сброженных белковых смесей эксплуататорских сродство связывания фосфопептидов Fe (III). Разработан протокол 21 включает в себя три основные части: подготовка макропористом поддержки органического полимера монолит; Рост PCP покрытия на поверхности поры монолита; Приложение для обогащения фосфопептидов.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

ПРИМЕЧАНИЕ: Перед началом, проверьте все соответствующие Паспорта (MSDS). Несколько химических веществ, используемых в процедурах синтетических и прикладных являются токсичными. Пожалуйста, соблюдайте все соответствующие практики безопасности и использовать соответствующие защитные средства (халат, полнометражные брюки, закрытые ботинки пальца ноги, защитные очки, перчатки). При обращении с жидким азотом для измерений адсорбции азота (изолирующие перчатки, лицо щит) Пожалуйста, используйте все криогенного индивидуальной защиты.

1. пористых полимерных Монолит Подготовка в массовых и капиллярный формат столбца

  1. Массовая Полимер Монолит для характеризации
    1. Очищают стирол, дивинилбензол и метакриловой кислоты через колонку основного оксида алюминия, для удаления ингибиторов полимеризации. Поместите 10 г основного оксида алюминия в 25 мл одноразовой пластиковой шприц с пробкой из стекловаты волокна упакованы в наконечнике шприца. Просачиваются примерно 10 мл мономера через колонку.
    2. Загрузка мономеров (50 мг стирола, 100 мг дивинилбензола и 50 мг метакриловой кислоты) и агентов, образующих поры (300 мг толуола и 300 мг изооктана) в стекл нный сосудик на 1 мл. Добавить инициатор полимеризации, 4 мг 2,2'-азобисизобутиронитрил (AIBN, 1% по отношению к мономерам).
    3. Однородный обработкой ультразвуком в течение 10 мин. Удалить растворенного кислорода барботированием азота через жидкость в течение 10 мин. Уплотнение флакон крышкой с парафиновой пленки и поместите его в водяной бане при 60 ° С в течение 6 ч, чтобы полимеризации смеси.
    4. Охлаждают до комнатной температуры и осторожно разорвать флакон. Перевести полимерной монолит в добычу целлюлозы наперсток. Поместите экстракционную гильзу в аппарате Сокслета камеры экстракции и собрать его в круглодонную колбу, которая содержит объем метанола, который является, по крайней мере в три раза объем экстракционной камеры. Собирают конденсатор в верхней части экстракционной камеры. Выполните извлечение Сокслета кипячением метанолав течение 16 ч, обеспечивая полное удаление непрореагировавших мономеров и агентов, образующих порового.
    5. Сухой течение ночи в вакуумной печи при 60 ° С. Подтвердить наличие функциональных групп карбоновых прикрепить РСР преобразования Фурье с помощью инфракрасной спектроскопии (FT-IR). Измерьте площадь поверхности по адсорбции азота порометрией.
  2. Функционализация кремнезема капилляров для подготовки монолитных колонн
    1. Вырезать 2 м полиимидной покрытием 100 мкм идентификатора кварцевого капилляра. Подключите его к стеклянным шприцем 0,25-0,50 мл и мыть капилляр с ацетоном. Удаления ацетона путем промывки водой капилляр.
    2. Для того чтобы активировать внутренний кремнеземного покрыти капилляра, использовать шприцевой насос, чтобы течь в 0,2 М водный раствор NaOH в 0,25 мкл / мин в течение 30 мин. Промыть водой, пока эффлюент не станет нейтральным.
    3. Используйте рН бумаги полоски, чтобы проверить стоков рН. Для того, чтобы протонирования силанольных групп капилляра, насос 0,2 М aqueoраствора HCl связь через капилляр в 0,25 мкл / мин в течение 30 мин. Промыть водой, пока эффлюент не станет нейтральным. Промыть этанола.
    4. Насос 20% (вес / вес) этанола раствор 3- (триметоксисилил) пропил метакрилат (рН 5 доводили уксусной кислотой) на уровне 0,25 мкл / мин в течение 1 часа. На этом этапе, кремнезем капилляр функционализированный виниловых групп для того, чтобы прикрепить полимера монолит с капиллярной внутренней поверхности.
    5. Промывают ацетоном, сушат в токе азота, и оставить при комнатной температуре на ночь перед использованием. Вырезать капилляр в более короткие куски длиной 20 см.
  3. Подготовка Монолитные капиллярных колонок
    1. Подготовьте идентичную полимеризационной смеси, что и для объемной полимерной монолита (раздел 1.1) в стекл нный сосудик на 1 мл с резиновой пробкой. Добавить инициатора AIBN 1% по отношению к мономерам. Однородный обработкой ультразвуком в течение 10 мин.
    2. Очистите смесь полимеризации азотом путем сочетания без функционализированного кремнезема капиллярв токе азота.
      1. Вставьте токе азота капилляр через резиновую мембрану флакона и погружают ее в полимеризационной смеси, так что пузырьки азота через жидкость. Оставьте флакон крышкой слегка свободно, чтобы избежать избыточного давления. Очистите в течение 10 мин.
      2. Извлеките токе азота капилляр, из полимеризационной смеси в свободном пространстве флакона, и закрыть крышку плотно. Вставка функционализированный капилляр через перегородку в полимеризационной смеси. Избыток давления, создаваемого в капилляр через азота, введенного в свободном пространстве перекачивает полимеризационной смеси посредством функционализированного капилляра.
      3. Собирают несколько капель полимеризации смеси из потока, вытекающего из капилляра, чтобы она полностью заполнена и закрыть его с резиновой пробкой. Возьмем капилляр из флакона очень тщательно и закрыть отверстие капилляра с резиновой пробкой.
    3. Полимеризации смесиры, содержащиеся в капилляре на водяной бане при 60 ° С в течение 6 ч. Охлаждают при комнатной температуре и вырезать несколько миллиметров обоих концах капилляра. Удалить непрореагировавших мономеров и агентов, образующих поры с помощью промывки колонки ацетонитрила с использованием ВЭЖХ насоса на 3 мкл / мин в течение 30 мин. Проверьте противодавление в капиллярной колонки.

2. Рост Железного benzenetrycarboxylate (FeBTC) PCP-

  1. Рост FeBTC МОРН на массовых Polymer Монолит для характеризации
    1. Измельчить предварительно высушенного монолит, используя ступку и пестик.
    2. Погружают 100 мг монолита порошка в 5 мл 2 мМ FeCl 3 · 6H 2 O в этаноле в течение 15 мин. Вакуумный фильтр, использующий нейлоновый фильтр (0,22 мкм) и промывки порошка с этанолом. Погружают монолит порошок в 5 мл 2 мМ 1,3,5-бензолтрикарбоновой кислоты (BTC) в этаноле в течение 15 мин. Вакуумный фильтр, использующий нейлоновый фильтр (0,22 мкм) и промывки порошка с этанолом.
    3. Повторите шаг номер 2, как требуется. Рост конечного металлоорганического покрытия будет определяться числом прикладных циклов. Как правило, выполняются от 10 до 30 циклов. Подтвердите наличие новых пор по адсорбции азота порометрией. Измерить количество дополнительных металлических объектов с помощью термогравиметрического анализа (ТГА).
  2. Рост FeBTC МОРН на капиллярной колонке монолитного для обогащения фосфопептидов
    1. Используя шприцевой насос. Промойте капилляров монолит с 2 мм FeCl 3 · 6H 2 O в этаноле в течение 15 мин при 2 мкл / мин. Промыть этаноле в течение 15 мин при 2 мкл / мин. Промойте капилляров монолит с 2 мм БТД в этаноле в течение 15 мин при 2 мкл / мин. Промыть этаноле в течение 15 мин при 2 мкл / мин.
    2. Повторите шаг 1, как требуется. Рост конечного металлоорганического покрытия будет определяться числом циклов, выполненных.

3. Белки Пищеварение и Еnrichment фосфопептидов

  1. Белок Пищеварение
    1. Растворите 0,5 мл обезжиренного молока в 1 мл воды и разделить его на 200 мкл фракций.
    2. Для переваривания белков добавить 160 мкл 1 М бикарбонат аммония и 50 мкл 45 мМ дитиотреитола к каждой фракции, для того, чтобы расщеплять дисульфидные связи. Выдержите при 50 ° С в термомиксере в течение 15 мин.
    3. Добавить постепенно добавляли 50 мкл водного раствора 100 мМ иодацетамида, в то время как раствор охлаждают до комнатной температуры. Йодацетамид будет препятствовать образованию новых дисульфидных связей.
    4. Инкубируют в темноте в течение 15 мин при комнатной температуре. Добавить 1 мл деионизированной воды. Добавить 2 мкг трипсина и переварить белки в термомиксер при 37 ° С в течение 14 ч.
    5. Завершить пищеварение подкислением с 10 мкл 1% трифторуксусной кислоты, и размещение его в термосмеситель в течение 5 мин при комнатной температуре. Храните усваивается белки при -20 ° С.
  2. Обогащение фосфопептидов использованием капиллярной колонки MOPH.
    1. Промыть колонку с 100 мкл 4: 1 смеси ацетонитрила, содержащего 0,1% трифторуксусной кислоты в течение 10 мин при скорости потока 1 мкл / мин. Насос переваривание белка через колонку 2 мкл / мин в течение 30 мин.
    2. Промыть нефосфорилированный пептиды снова с 4: 1 смеси ацетонитрила, содержащего 0,1% трифторуксусной кислоты в течение 10 мин при скорости потока 1 мкл / мин. Промыть водой в течение 10 мин при скорости потока 1 мкл / мин.
    3. Элюции с использованием фосфопептидов 250 мМ рН 7 фосфатный буферный раствор закачивают в 1 мкл / мин в течение 15 мин. Собирают элюент во флаконе и обессоливания раствора с использованием стандартного протокола 19. Приготовьте 2 мг / мл 2,5-диоксибензойной кислоты, чтобы использовать его в качестве матрицы для матрицы лазерной десорбцией / ионизацией времени пролета масс-спектрометрии (MALDI-TOF-MS). Обращается 2 мкл 2,5-дигидроксибензойной кислоты в наконечник для элюирования phosphopeptides и определить их непосредственно на MALDI пластины.
    4. Анализ пятна от MALDI-TOF-MS и регенерировать путем тщательного промывания водой, а затем метанолом колонку.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Схематическое изображение роста PCP на поверхности пор органического полимерного монолита показано на рисунке 1. На этом рисунке, мы проиллюстрируем начальное Fe (III) атомы удерживаются на поверхности пор исходного полимера монолит согласованной с функциональными группами карбоновых , Использование протокола описаны дополнительный органический лиганд и Fe (III) ионы добавлен к поверхности, формируя пористый координации сети в полимерной монолита. Фиг.1 также схематически показано испол...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Оригинальный полимера монолит содержит карбоксильные функциональные группы, способные связываться с металлами. Координация исходного металла сайты на оригинальном материале, мы можем расти PCP покрытие (рис 1А), включающий ряд дополнительных металлических сайтов, формирующих микропористой сети. Это делает представленные материалы MOPH привлекательные для добычи или очистки процедур, в которых участвуют металлические видов, таких как иммобилизованные металл-ионный аффинной хроматографии (IMAC) техники. О...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторам нечего раскрывать.

Благодарности

Эта работа была выполнена в Молекулярном литейном заводе, Национальной лаборатории Лоуренса Беркли и поддержана Управлением науки, Управлением фундаментальных энергетических наук, Отделом научных пользовательских средств Министерства энергетики США, в соответствии с контрактом No. ДЭ-АС02–05Ч11231. Выражаем благодарность за финансовую поддержку F.M. в виде стипендии ME-Fulbright и A.S. от Комиссии по высшему образованию Пакистана.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Капилляры с полиимидным покрытиемPolymicro TechnologiesTSP100375100μ М И.Д.
3-(триметоксисилил)пропилметакрилат, 98%Сигма-Олдрич440159
стирола, 99%Сигма-ОлдричW323306Технический
дивинилбензол, 80%Сигма-Олдрич414565
метакриловой кислотой, 98%МаллинкродтMK150659
толуол, ≥ 99,5%EMDхимикатыMTX0735-6
изооктан, ≥ 99,5%Sigma-Aldrich650439
2,2'-азобизобутиронитрил, 98%Sigma-Aldrich441090
Оксид алюминия (основной глинозем)Sigma-Aldrich199443
Железа (III) хлорид гексагидрат, 97%Sigma-Aldrich236489
1,3,5-бензолтрикарбоновая кислота, 95%Sigma-Aldrich482749
Ацетонитрил, ≥ 99,5%Сигма-Олдрич360457
бикарбонат аммония, ≥ 99,5%Sigma-Aldrich9830
трифторуксусная кислота, ≥ 99%Sigma-Aldrich302031
этанол, ≥ 99,8%Сигма-Олдрич2854
Йодоацетамид, ≥ 99%Sigma-AldrichI1149
Dithiothreitol, ≥ 99%Sigma-Aldrich43819
Одноосновной дигидрат фосфата натрия, ≥ 99%Sigma-Aldrich71505
Дигидрат двухосновного фосфата натрия, ≥ 99%Sigma-Aldrich71643
Фосфорная кислота, ≥ 85%Sigma-Aldrich438081
2,5-дигидроксибензойная кислота, ≥ 99%Sigma-Aldrich85707
ТрипсинSigma-AldrichT8003Поджелудочная железа крупного рогатого скота
&бета;-казеинSigma-AldrichC6905Бычье молоко
Наконечники для пипеток ZipTip Наконечники для пипетокMerck MilliporeZTC18S096смола C18

Ссылки

  1. Li, H., Eddaoudi, M., O’Keeffe, M., Yaghi, O. M. Design and synthesis of an exceptionally stable and highly porous metal-organic framework. Nature. 402, 276-279 (1999).
  2. Kitagawa, S., Kitaura, R., Noro, S. i Functional porous coordination polymers. Angew. Chem. Int. Ed. 43, 2334-2375 (2004).
  3. Furukawa, H., Cordova, K. E., O’Keeffe, M., Yaghi, O. M. The chemistry and applications of metal-organic frameworks. Science. 341, 974(2013).
  4. Ma, S., Zhou, H. C. Gas storage in porous metal-organic frameworks for clean energy applications. Chem. Commun. 46, 44-53 (2010).
  5. Li, J. R., Sculley, J., Zhou, H. C. Metal-organic frameworks for separations. Chem. Rev. 112, 869-932 (2012).
  6. Lee, J., Farha, O. K., Roberts, J., Scheidt, K. A., Nguyen, S. T., Hupp, J. T. Metal-organic framework materials as catalysts. Chem. Soc. Rev. 38, 1450-1459 (2009).
  7. Gu, Z. Y., Yang, C. X., Chang, N., Yan, X. P. Metal-organic frameworks for analytical chemistry: From sample collection to chromatographic separation. Acc. Chem. Res. 45, 734-745 (2012).
  8. Ahmad, R., Wong-Foy, A. G., Matzger, A. J. Microporous coordination polymers as selective sorbents for liquid chromatography. Langmuir. 25, 11977-11979 (2009).
  9. Yang, C. X., Yan, X. P. Metal-organic framework MIL-101(Cr) for high-performance liquid chromatographic separation of substituted aromatics. Anal. Chem. 83, 7144-7150 (2011).
  10. Fu, Y. Y., Yang, C. X., Yan, X. P. Control of the coordination status of the open metal sites in metal-organic frameworks for high performance separation of polar compounds. Langmuir. 28, 6802-6810 (2012).
  11. Gu, Z. Y., Yan, X. P. Metal-organic framework MIL-101 for high-resolution gas-chromatographic separation of xylene isomers and ethylbenzene. Angew. Chem. Int. Ed. 49, 1477-1480 (2010).
  12. Chang, N., Gu, Z. Y., Yan, X. P. Zeolitic imidazolate framework-8 nanocrystal coated capillary for molecular sieving of branched alkanes from linear alkanes along with high-resolution chromatographic separation of linear alkanes. J. Am. Chem. Soc. 132, 13645-13647 (2010).
  13. Yu, L. Q., Xiong, C. X., Yan, X. P. Room temperature fabrication of post-modified zeolitic imidazolate-90 as stationary phase for open-tubular capillary electrochromatography. J. Chromatogr. A. 1343, 188-194 (2014).
  14. Fu, Y. Y., Yang, C. X., Yan, X. P. Incorporation of metal-organic framework UiO-66 into porous polymer monoliths to enhance the liquid chromatographic separation of small molecules. Chem. Commun. 49, 7162-7164 (2013).
  15. Lin, C. L., Lirio, S., Chen, Y. T., Lin, C. H., Huang, H. Y. A novel hybrid metal-organic framework-polymeric monolith for solid-phase extraction. Chem. Eur. J. 20, 3317-3321 (2014).
  16. Svec, F. Porous polymer monoliths: Amazingly wide variety of techniques enabling their preparation. J. Chromatogr. A. 1217, 902-924 (2010).
  17. Monolithic HPLC Columns. , Available from: http://www.phenomenex.com/onyx (2015).
  18. Bia Separations. , Available from: http://www.biaseparations.com/ (2015).
  19. Shekhah, O., et al. Step-by-step route for the synthesis of metal-organic frameworks. J. Am. Chem. Soc. 129, 15118-15119 (2007).
  20. Shekhah, O., Fu, L., Belmabkhout, Y., Cairns, A. J., Giannelis, E. P., Eddaoudi, M. Successful implementation of the stepwise layer-by-layer growth of MOF thin films on confined surfaces: mesoporous silica foam as a first case study. Chem. Commun. 48, 11434-11436 (2012).
  21. Saeed, A., Maya, F., Xiao, D. J., Naham-ul-Haq, M., Svec, F., Britt, D. K. Growth of a highly porous coordination polymer on a macroporous polymer monolith support for enhanced immobilized metal ion affinity chromatographic enrichment of phosphopeptides. Adv. Funct. Mater. 24, 5797-5710 (2014).
  22. Krenkova, J., Lacher, N. A., Svec, F. Control of selectivity via nanochemistry: Monolithic capillary column containing hydroxyapatite nanoparticles for separation of proteins and enrichment of phosphopeptides. Anal. Chem. 82, 8335-8341 (2010).
  23. Jabeen, F., et al. Silica-lanthanum oxide: Pioneer composite of rare-earth metal oxide in selective phosphopeptides enrichment. Anal. Chem. 84, 10180-10185 (2012).
  24. Hussain, D., et al. Functionalized diamond nanopowder for phosphopeptides enrichment from complex biological fluids. Anal. Chim. Acta. 775, 75-84 (2013).
  25. Aprilita, N. H., et al. Poly(glycidyl methacrylate/divinylbenzene)-IDA-FeIII in phosphoproteomics. J. Proteom. Res. 4, 2312-2319 (2005).
  26. Lo, C. Y., Chen, W. Y., Chen, C. T., Chen, Y. C. Rapid enrichment of phosphopeptides from tryptic digests of proteins using iron oxide nanocomposites of magnetic particles coated with zirconia as the concentrating probes. J. Proteom. Res. 6, 887-893 (2007).
  27. Aryal, U. K., Ross, A. R. S. Enrichment and analysis of phosphopeptides under different experimental conditions using titanium dioxide affinity chromatography and mass spectrometry. Rapid Commun. Mass. Spectrom. 24, 219-231 (2010).
  28. Select Iron Affinity Gel Technical Bulletin. , Available from: https://www.sigmaaldrich.com/content/dam/sigma-aldrich/docs/Sigma/Bulletin/p9740bul.pdf (2015).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Теги

Подготовка высоко пористый Координационного полимерных покрытий на макропористых полимерных монолитов для повышенного обогащения фосфопептидов
Связаться с нами
Порекомендовать библиотеке

Конфиденциальность

Условия использования

Политики

© 2026 MyJoVE Corporation. Все права защищены.