Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Хирургические Модели гастроэзофагеальной рефлюксной с мышами

10.6K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/53012

⸱

25 августа 2015 г.

 ,  , 

В этой статье

Краткое содержание

Эта статья демонстрирует хирургические процедуры гастроэзофагеального рефлюкса с мышами. Эти модели являются полезными инструментами для исследования механизмов и лечения болезни гастроэзофагеального рефлюкса и потенциально болезни Барретта и аденокарциномы пищевода.

Аннотация

Было сообщено о множестве хирургичесkých процедур, которые могут вызвать гастроэзофагеальную рефлюксу у животных. В данной работе мы описываем три хирургичесkých модели с мышами с целью индукции рефлюксу желудочного содержимого, содержимого двенадцатиперстной кишки или смешанного содержимого. Хирургические процедуры и общие принципы были подробно описаны. Исследователь с хирургичесским опытом должен быть в состоянии освоить технику после короткого периода практики. После операции большинство мышей могут выжить и развить рефлюкс-эзофагит, похожий на таковой у людей. Однако следует отметить, что гистологические различия между пищеводом мыши и человеческим являются присущими ограничениями этих хирургичесkých моделей. Если используются для исследования барретовского пищевода и аденокарциномы, эти процедуры могут потребовать комбинации с генетическими модификациями.

Введение

Болезнь гастроэзофагального рефлюкса (БГЭР) – это хроническое заболевание, вызываемое длительным воздействием содержимого желудка или желудочно-двенадцатиперстной кишки на дистальную часть пищевода1. Длительное воздействие этих вредных рефлюксатов нарушает внутренние защитные механизмы слизистой оболочки пищевода и, таким образом, приводит к эзофагиту2. Барретт-пищевод возникает при хроническом рефлюксе и является предраковым поражением с повышенным риском развития аденокарциномы пищевода3,4. Несмотря на клиническую важность, механизмы БГЭР, Барретт-пищевода и аденокарциномы до сих пор не полностью понятны.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Все эксперименты на животных были одобрены Комитетом по уходу и использованию животного Институциональная.

1. Подготовка Мышь

  1. Используйте мышь над ~ 20 г массы тела или выше ~ 6 недель в возрасте для хирургии.
  2. До операции, дать мышам лаборатории чау и воды вволю и поддерживать на 12:12 час свет-темнота цикла.
  3. Бритье хирургического зона с машинки для стрижки волос. Обезболить мышей внутрибрюшинным введением 80 мг / кг кетамина и 12 мг / кг ксилазина. Эта доза ставит мышей в сон в течение нескольких минут и обеспечивает достаточное обезболивание для следующих хирургических процедур.
  4. Подтверд....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Большинство мышей (> 95%) может пережить операцию. В послеоперационном периоде, ведущие причины смерти включают передозировку анестетиков, кровотечение и неизвестные причины.

Четыре недели после операции,> 90% мышей с желудочного рефлюкса или смешанной рефлюкса и> 80% мышей с двенадцатиперстной рефлюкса могут выжить. В течение этого периода, в первую очередь мышей умирают от пищевода стриктуры и невозможность поесть. Эти мыши обнаруживают признаки сильного стресса (сгорбившись позе,.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Различные хирургические модели были созданы, чтобы имитировать желудка, язва двенадцатиперстной и смешанный рефлюкс у грызунов. Эти три процедуры, описанные здесь, подходят для долгосрочных экспериментов с разумным ценам послеоперационного выживания. Исследователь с опытом хирургического должны быть в состоянии понять технику после короткого периода практики.

Кровотечение может быть результатом внутрибрюшинной инъекции анестетиков до операции, рваные раны печени во время разделения соедините.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Один из авторов (XC) получил финансирование, предоставленное компанией Takeda Pharmaceutical Company Ltd, которая поддерживает фундаментальные исследования, связанные с гастроэзофагеальной рефлюксной болезнью. Ни одно из реагентов или инструментов, использованных в этой статье, не производится этой компанией.

Благодарности

Мы зарегистрированы как организация, получающая гранты на исследования от Национального фонда естественных наук Китая (NO. 81400590), Национального института здравоохранения (U54 CA156735) и фармацевтической компании Takeda Pharmaceutical Company Ltd. (MA-NC-D-156).

....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Dumont #1 Forceps Dumostar Tip Roboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD)
Micro Clip Applying Forceps 5.5"Roboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD)
Bonn Scissors 3.5" Straight 15 mm Sharp/Sharp Tungsten Carbide BladesRoboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD)
Operating Scissors 5.5" Straight Sharp/Sharp SureCutRoboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD)
4-0 Silk Black Braid 100 Yard SpoolRoboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD)
Surgeon's Needle 1/2 Circle Cutting Edge Size 12 (25 mm Chord Length) Pack 12Roboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD)
Halsey Needle Holder 5" SmoothRoboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD)
Micro Needle Holder 5.125" Curved Lock.6 mmRoboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD)
Reflex 9 mm Wound Clip ApplierRoboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD)
Reflex 9 mm Wound Clips Box Of 100Roboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD)
PRONOVA Poly (hexafluoropropylene-VDF) Suture 8-0Ethicon US, LLC
Ringer's solutionHenry Schein, Inc.
ketamineHenry Schein, Inc.
xylazineHenry Schein, Inc.

Ссылки

  1. Kandulski, A., Malfertheiner, P. Gastroesophageal reflux disease--from reflux episodes to mucosal inflammation. Nat Rev Gastroenterol Hepatol. 9 (1), 15-22 (2012).
  2. Orlando, R. C. The integrity of the esophageal m....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Больше статей

Мышиная модельхирургическая процедурагистологический анализповреждение пищеводагастроэзофагеальный рефлюксдуоденоэзофагеальный рефлюкссмешанный рефлюксоценка эзофагитапищевод Барретта