Мы представляем хирургическую процедуру катетеризации кишечного лимфатического ствола у неонатальных свиней для сбора большого количества компонентов липидного метаболизма из эфферентной лимфы.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Мы представляем хирургическую процедуру катетеризации кишечного лимфатического ствола у неонатальных свиней для сбора большого количества компонентов липидного метаболизма из эфферентной лимфы.
Катетеризация кишечного лимфатического ствола у неонатальных свиней - это метод, позволяющий в течение длительного времени собирать большое количество кишечной (центральной) эфферентной лимфы. Важно отметить, что сбор центральной лимфы из кишечника позволяет исследователям изучать как механизмы, так и состав липидов, связанных с метаболизмом липидов, воспалением кишечника и метастазированием рака, а также клетки, участвующие в иммунной функции и иммунонадзоре. Вентральный хирургический подход по средней линии обеспечивает превосходный хирургический доступ к черепной брюшной полости и относительно легкий доступ к сосуду кишечного лимфатического ствола, который находится рядом с поджелудочной железой и правым вентральным сегментом воротной вены под висцеральной стороной правой доли печени. Сосуд тщательно рассекается и освобождается от окружающей фасции, а затем расширяется с помощью швов, что позволяет вводить и впоследствии закреплять катетер в сосуде. Катетер выводится наружу, и в течение 7 дней собирается примерно 1 л/24 ч лимфы. В то время как этот метод позволяет собирать большое количество центральной лимфы в течение длительного периода времени, успех зависит от тщательного хирургического вскрытия, обработки тканей и пристального внимания к правильной хирургической технике. Это особенно важно при операциях на молодых животных, так как лимфатические сосуды могут легко разорваться, что потенциально может привести к хирургической и экспериментальной неудаче. В видеоролике демонстрируется отличная хирургическая техника забора кишечной лимфы.
Лимфатическая система является изученной областью физиологии. Доклинические модели лимфатической катетеризацией встречаются у разных видов животных 1-8 и используются фармацевтической промышленности и научно - исследовательских институтов для изучения механизмов , участвующих в липида и 8-12 метаболизма лекарственных средств, 13-15 метастазирования рака 16 с экспериментального лечения 17 и иммунной функции 18 -26. Это исследование исследует использование кишечного лимфатического ствола катетеризацию в отечественной модели свиньи для измерения компонентов метаболизма липопротеинов. Метаболизм липопротеинов участвует в производстве и секреции хиломикронов, а также изменения в связанных липидов и общего белка. Это важные соображения, как существуют значительные различия в липидного обмена между наиболее часто используемых моделях грызунов и человека, и как таковые, с использованием модели свиньи для сбора кишечных лимфы может обеспечить более сопоставимую информацию для изучения липидного меняtabolism у людей 27-31.
Несколько хирургических методов используются для сбора кишечника лимфу в крупных видов животных: черепную плечо подход (т.е. грудной проток катетеризацию) 5, боковая верхняя бочка подход 32-34 и вентральной средней линии или парамедианный подход 22,35. Это видео подробно описывает хирургическую процедуру в свиней с использованием вентральной средней линии хирургического подхода к катетеризацией кишечного лимфатического ствола. Осторожная хирургическая техника допускает этот метод лимфатической катетеризацией для сбора большого количества лимфы и его составные части в течение длительного периода времени.
Этот метод открывает множество приложений для многих дисциплин, исследующих различные физиологические функции. Приложения могут включать в себя, но не ограничиваются ими, весь липопротеина тела и липидного обмена, иммунологического, генезис и метастазирования опухолей, функции кишечника, и Разработлор и прогрессирование воспалительного заболевания кишечника.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Все процедуры на экспериментальных животных, описанных в обоих видео и рукописи были утверждены по уходу и использованию комитета Institutional животных путем и следовал руководящим принципам, установленным Канадским советом по уходу за животными.
1. хирургической анестезии и хирургических Подготовка новорожденных поросят
2. Абдоминальная хирургия и катетеризация кишечника лимфатической Магистральные
3. Послеоперационное восстановление и лимфы Коллекция
4. Количественное липопротеина ApoB48, триглицерида, холестерина и общего белка Собранные из Лимфы
5. Количественное липопротеина ApoB48, собранный из Лимфы 38
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Лимфатической катетеризацию кишечника лимфатической ствола неонатальных свиней позволяет собирать около 1 л / 24 ч центральной лимфы в течение 7 дней. Лимфы, собранные в этом эксперименте содержали компоненты липидного обмена, а именно общего белка лимфы, ApoB48 липопротеинов, триглицеридов, общего белка и холестерина. Таблица 1 Основные представительные количества этих липидных компонентов из консервированной лимфатических образцов трех свиней. Следует отметить, что лимфоток и лип...
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Сбор кишечника лимфы является отличным методом для изучения механизмов , участвующих в липида 8-12 и наркотиков 13-15 метаболизма, метастаз рака 16,17, незаконный оборот клеток и иммунной функции 18-26, в различных экспериментальных моделях на животных. Действительно, способность собирать большие количества либо периферического (афферентную) и центральный (эфферентные и большие магистральные сосуды) лимфы в течение длительного периода было особенно важным для понимания временн...
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Авторам нечего раскрывать.
Работа была частично поддержана финансированием от Агентства по животноводству и мясу Альберты и гранта Совета по естественным наукам и исследованиям Discovery для С. Д. Проктора.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Лезвие ларингоскопа Miller | Welch Allyn | 68044 | длина 182 мм |
| Surgivet advisor: Монитор жизненно важных показателей | Surgivet | V9203 | |
| Ректальный датчик температуры | Surgivet | V3417 | |
| Монополярный электрохирургический генератор | Valley Lab | ||
| Metzenbaum ножницы | Fine Science | 14518-18 | |
| Ретрактор Таффье | Stevens | 162-11-676 | |
| Щипцы от комаров | Stevens | 162-7-10 | |
| Щипцы Kelly изогнутые (14см) | Stevens | 162-7-38 | |
| Щипцы для тканей Allis | Stevens | 162-7-38 | |
| Щипцы для перевязочного глаза (10,2см) | Stevens | 162-18-780 | |
| Щипцы для повязки - Adison (12,1см) | Stevens | 162-17-2510 | |
| Игольные отвертки | Stevens | 162-V98-42 | |
| Ириновые ножницы | Fine science | 14058-11 | |
| Циркуляционный водяной насос | Jorvet | J-783X | |
| Maxitherm-Vinyl одеяло | Jorvet | J-784C | |
| Q наконечники аппликаторы | Fisher Scientific | 22-037-960 | |
| Катетеризация трубки (4,06 OD X 2,31 ID) | Braintree Scientific Inc. | MRE-160 | Микро-Ренетановая трубка для имплантации |
| 2-0 шелковый шов | Ethicon | LA556 | |
| 2-0 полиглактиновый шов | Ethicon | J443H | 2-0 викрил |
| Большая куртка для животных | Lomir Biomedical Inc. | SSJ2YC | |
| Полипропиленовые бутылки для стирки | Fisher Scientific | 03-409-22C | 500 мл |
| Пенициллин-стрептомицин | Sigma Aldrich | D4333 | |
| EDTA | Sigma Aldrich | 60-00-4 | |
| Амфотерицин B | Sigma Aldrich | A2411 | |
| Азаперон | Elanco Animal Health | Stresnil | |
| Дексмедетомидина гидрохлорид | Zoetis | 6295 | Дексдомитор |
| Изофлуран | Abbott Animal Health | 05260-5 | IsoFlo |
| Кетамина гидрохлорид | Zoetis | 2626 | Кетасет |
| Бупенорфина гидрохлорид | Чемпион Alstoe Animal Health | DIN:02347510 | |
| 6 мм Эндотрахеальная трубка | Jorvet | J-165d | |
| 10% Лидокаин спрей | AstraZeneca | DIN:02003767 | |
| 4 % Хлоргексидин хирургический скраб | Partnar Animal Health | PCH-011 | Разбавленный: 2,0% раствор |
| 3М Хирургическая стери- драпировка | 3M Health Care | 1040 | |
| SDS страница гель | Invitrogen | EA0375BOX | 3-8 % трис ацетат |
| Поливинилиденфторид мембрана | Millipore | IPVH00010 | 0,45 мкм; m размер пор |
| ApoB антитело | EMD Millipore | AB742 | 1:4000 разбавление |
| Donkey anti-goat IgG-HRP | Santa Cruz Biotechnology | Sc-2304 | |
| ECL Prime Western Blotting Reagent | GE Healthcare LifeSciences | RPN2232 | |
| Набор триглицеридов | Wako Pure Chemicals | 998-40391/994-40491 | |
| Набор общего холестерина | Wako Pure Chemicals | 439-17501 | |
| Общий белок | Пирс | 23225 | Анализ бицинхониновой кислоты |
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.