Мы представляем хирургическую процедуру катетеризации кишечного лимфатического ствола у неонатальных свиней для сбора большого количества компонентов липидного метаболизма из эфферентной лимфы.
Методическая статья
Мы представляем хирургическую процедуру катетеризации кишечного лимфатического ствола у неонатальных свиней для сбора большого количества компонентов липидного метаболизма из эфферентной лимфы.
Катетеризация кишечного лимфатического ствола у неонатальных свиней - это метод, позволяющий в течение длительного времени собирать большое количество кишечной (центральной) эфферентной лимфы. Важно отметить, что сбор центральной лимфы из кишечника позволяет исследователям изучать как механизмы, так и состав липидов, связанных с метаболизмом липидов, воспалением кишечника и метастазированием рака, а также клетки, участвующие в иммунной функции и иммунонадзоре. Вентральный хирургический подход по средней линии обеспечивает превосходный хирургический доступ к черепной брюшной полости и относительно легкий доступ к сосуду кишечного лимфатического ствола, который находится рядом с поджелудочной железой и правым вентральным сегментом воротной вены под висцеральной стороной правой доли печени. Сосуд тщательно рассекается и освобождается от окружающей фасции, а затем расширяется с помощью швов, что позволяет вводить и впоследствии закреплять катетер в сосуде. Катетер выводится наружу, и в течение 7 дней собирается примерно 1 л/24 ч лимфы. В то время как этот метод позволяет собирать большое количество центральной лимфы в течение длительного периода времени, успех зависит от тщательного хирургического вскрытия, обработки тканей и пристального внимания к правильной хирургической технике. Это особенно важно при операциях на молодых животных, так как лимфатические сосуды могут легко разорваться, что потенциально может привести к хирургической и экспериментальной неудаче. В видеоролике демонстрируется отличная хирургическая техника забора кишечной лимфы.
Лимфатическая система является изученной областью физиологии. Доклинические модели лимфатической катетеризацией встречаются у разных видов животных 1-8 и используются фармацевтической промышленности и научно - исследовательских институтов для изучения механизмов , участвующих в липида и 8-12 метаболизма лекарственных средств, 13-15 метастазирования рака 16 с экспериментального лечения 17 и иммунной функции 18 -26. Это исследование исследует использование кишечного лимфатического ствола катетеризацию в отечественной модели свиньи для измерения компонентов метаболизма липопротеинов. Метаболизм липопротеинов участвует в производстве и секреции хиломикронов, а также изменения в связанных липидов и общего белка. Это важные соображения, как существуют значительные различия в липидного обмена между наиболее часто используемых моделях грызунов и человека, и как таковые, с использованием модели свиньи для сбора кишечных лимфы может обеспечить более сопоставимую информацию для изучения липидного меняtabolism у людей 27-31.
Несколько хирургических методов используются для сбора кишечника лимфу в крупных видов животных: черепную плечо подход (т.е. грудной проток катетеризацию) 5, боковая верхняя бочка подход 32-34 и вентральной средней линии или парамедианный подход 22,35. Это видео подробно описывает хирургическую процедуру в свиней с использованием вентральной средней линии хирургического подхода к катетеризацией кишечного лимфатического ствола. Осторожная хирургическая техника допускает этот метод лимфатической катетеризацией для сбора большого количества лимфы и его составные части в течение длительного периода времени.
Этот метод открывает множество приложений для многих дисциплин, исследующих различные физиологические функции. Приложения могут включать в себя, но не ограничиваются ими, весь липопротеина тела и липидного обмена, иммунологического, генезис и метастазирования опухолей, функции кишечника, и Разработлор и прогрессирование воспалительного заболевания кишечника.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Все процедуры на экспериментальных животных, описанных в обоих видео и рукописи были утверждены по уходу и использованию комитета Institutional животных путем и следовал руководящим принципам, установленным Канадским советом по уходу за животными.
1. хирургической анестезии и хирургических Подготовка новорожденных поросят
2. Абдоминальная хирургия и катетеризация кишечника лимфатической Магистральные
3. Послеоперационное восстановление и лимфы Коллекция
4. Количественное липопротеина ApoB48, триглицерида, холестерина и общего белка Собранные из Лимфы
5. Количественное липопротеина ApoB48, собранный из Лимфы 38
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Лимфатической катетеризацию кишечника лимфатической ствола неонатальных свиней позволяет собирать около 1 л / 24 ч центральной лимфы в течение 7 дней. Лимфы, собранные в этом эксперименте содержали компоненты липидного обмена, а именно общего белка лимфы, ApoB48 липопротеинов, триглицеридов, общего белка и холестерина. Таблица 1 Основные представительные количества этих липидных компонентов из консервированной лимфатических образцов трех свиней. Следует отметить, что лимфоток и липидные ...
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Сбор кишечника лимфы является отличным методом для изучения механизмов , участвующих в липида 8-12 и наркотиков 13-15 метаболизма, метастаз рака 16,17, незаконный оборот клеток и иммунной функции 18-26, в различных экспериментальных моделях на животных. Действительно, способность собирать большие количества либо периферического (афферентную) и центральный (эфферентные и большие магистральные сосуды) лимфы в течение длительного периода было особенно важным для понимания временн...
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Авторам нечего раскрывать.
Работа была частично поддержана финансированием от Агентства по животноводству и мясу Альберты и гранта Совета по естественным наукам и исследованиям Discovery для С. Д. Проктора.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Лезвие ларингоскопа Miller | Welch Allyn | 68044 | длина 182 мм |
| Surgivet advisor: Монитор жизненно важных показателей | Surgivet | V9203 | |
| Ректальный датчик температуры | Surgivet | V3417 | |
| Монополярный электрохирургический генератор | Valley Lab | ||
| Metzenbaum ножницы | Fine Science | 14518-18 | |
| Ретрактор Таффье | Stevens | 162-11-676 | |
| Щипцы от комаров | Stevens | 162-7-10 | |
| Щипцы Kelly изогнутые (14см) | Stevens | 162-7-38 | |
| Щипцы для тканей Allis | Stevens | 162-7-38 | |
| Щипцы для перевязочного глаза (10,2см) | Stevens | 162-18-780 | |
| Щипцы для повязки - Adison (12,1см) | Stevens | 162-17-2510 | |
| Игольные отвертки | Stevens | 162-V98-42 | |
| Ириновые ножницы | Fine science | 14058-11 | |
| Циркуляционный водяной насос | Jorvet | J-783X | |
| Maxitherm-Vinyl одеяло | Jorvet | J-784C | |
| Q наконечники аппликаторы | Fisher Scientific | 22-037-960 | |
| Катетеризация трубки (4,06 OD X 2,31 ID) | Braintree Scientific Inc. | MRE-160 | Микро-Ренетановая трубка для имплантации |
| 2-0 шелковый шов | Ethicon | LA556 | |
| 2-0 полиглактиновый шов | Ethicon | J443H | 2-0 викрил |
| Большая куртка для животных | Lomir Biomedical Inc. | SSJ2YC | |
| Полипропиленовые бутылки для стирки | Fisher Scientific | 03-409-22C | 500 мл |
| Пенициллин-стрептомицин | Sigma Aldrich | D4333 | |
| EDTA | Sigma Aldrich | 60-00-4 | |
| Амфотерицин B | Sigma Aldrich | A2411 | |
| Азаперон | Elanco Animal Health | Stresnil | |
| Дексмедетомидина гидрохлорид | Zoetis | 6295 | Дексдомитор |
| Изофлуран | Abbott Animal Health | 05260-5 | IsoFlo |
| Кетамина гидрохлорид | Zoetis | 2626 | Кетасет |
| Бупенорфина гидрохлорид | Чемпион Alstoe Animal Health | DIN:02347510 | |
| 6 мм Эндотрахеальная трубка | Jorvet | J-165d | |
| 10% Лидокаин спрей | AstraZeneca | DIN:02003767 | |
| 4 % Хлоргексидин хирургический скраб | Partnar Animal Health | PCH-011 | Разбавленный: 2,0% раствор |
| 3М Хирургическая стери- драпировка | 3M Health Care | 1040 | |
| SDS страница гель | Invitrogen | EA0375BOX | 3-8 % трис ацетат |
| Поливинилиденфторид мембрана | Millipore | IPVH00010 | 0,45 мкм; m размер пор |
| ApoB антитело | EMD Millipore | AB742 | 1:4000 разбавление |
| Donkey anti-goat IgG-HRP | Santa Cruz Biotechnology | Sc-2304 | |
| ECL Prime Western Blotting Reagent | GE Healthcare LifeSciences | RPN2232 | |
| Набор триглицеридов | Wako Pure Chemicals | 998-40391/994-40491 | |
| Набор общего холестерина | Wako Pure Chemicals | 439-17501 | |
| Общий белок | Пирс | 23225 | Анализ бицинхониновой кислоты |
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE
Запросить разрешение