Установка чрескожного измерения очень просто и быстро: устройство помещается на двусторонней пластыря (рисунок 1) и корректируются по размеру , если это необходимо (Рисунок 2), аккумулятор готов (Рисунок 3) и соединены (рис 4).
Этот метод для оценки функции почек было уже подтверждено у разных видов по сравнению с традиционным подходом плазменной очистки 9,11,12. После протокола подвергается здесь, Schreiber и др. продемонстрировали правильность техники в различных моделях мышей, показывая весьма сопоставимые результаты среди чрескожного измерения и плазменной очистки для всех изученных групп (таблица 1) 9. В этой работе получено т 1/2 был преобразован в СКФ с помощью мыши конкретных полуэмпирическое преобразованияфактор.
Консистенция чрескожной оценки функции почек также была доказана с использованием различных штаммов мышей. Последовательные измерения в течение 3 -х дней в том же животном показал коэффициент дисперсии 3.0-6.2% 13. В данном исследовании не было никакого преобразования в GFR , но были выражены и интерпретируются непосредственно в терминах T 1/2 результаты.
Возможность иметь результаты почти в режиме реального времени является одним из больших преимуществ этого метода. После периода записи, результаты сразу же становятся доступными для анализа и прилагающееся программное обеспечение отображает экскреции кривую FITC-sinistrin мгновенно (рисунок 6). В то же программное обеспечение Т 1/2 из FITC-sinistrin могут быть получены, которые могут быть непосредственно использованы в качестве параметра для оценки функции почек превращенного в терминах СКФ. Рисунок 7 показывает, как это выглядит FITC-sinistrin кривой экскреции измеренное транскутанно у животного с нарушением функции почек. Когда функция почек зависит, FITC-sinistrin T 1/2 увеличивается в связи с уменьшением выделения вещества и появления кривой меняется. Как правило, измеренная кривая не возвращается к уровню фона и представляет собой увеличенную площадь под кривой. В том же животном, измерения от предварительно до посттравматической может наблюдаться увеличение максимальной интенсивности флуоресценции из-за скопления маркера, вызванного его восстановленном экскреции. При наличии почечной недостаточности, транскутанно измеренная кривая FITC-sinistrin может показать устойчивое состояние в связи с тяжелыми нарушениями функции (рис 7В).
Использование миниатюрного устройства в нескольких штаммов грызунов с различным состоянием здоровья показал, что этот метод подходит и достаточно чувствительным, чтобы обнаружить изменения dвследствии почечной болезни и старения. Таблица 2 показывает краткую информацию о мышиных моделях изученных к настоящему времени с помощью этого метода.

Рисунок 1. Размещение устройства на двусторонней липкой пластыря. Устройство монтируется на позиционировании патч клеевой оптическую часть в прозрачном окне.

Рисунок 2. Корректирование пластыря для мелких грызунов. Для использования в небольших животных , рекомендуется уменьшить размер пластыря. A: Используйте устройство в качестве руководства, чтобы вырезать патч правильно. Б: Как только желаемый размер был получен, устройство может быть помещен на липкой поверхности пластыря. Рсдавать в аренду, нажмите здесь, чтобы посмотреть увеличенную версию этой фигуры.

Рисунок 3. Подготовка батареи. Чтобы подключить батарею к устройству, вырезать небольшой кусочек двусторонней клейкой патч (A и B) и поместите его на поверхности батареи (C). Пожалуйста , нажмите здесь для просмотра большая версия этой фигуры.

Рисунок 4. Подключение и размещение батареи во время измерения. (A) В мелких грызунов , таких как мыши, в связи с уменьшением пространства, батарея должна быть размещена на верхней части устройства. (В) В более крупных животных , батарея Cбыть помещены рядом с устройством. Пожалуйста , нажмите здесь , чтобы посмотреть увеличенную версию этой фигуры.

Рисунок 5. Размещение трубчатой эластичной марлевую повязку в крысу. Трубчатая повязка должна покрывать двустороннюю клейкую патч без вмешательства со свободным движением конечностей для комфорта животного. Пожалуйста , нажмите здесь , чтобы увидеть увеличенную версию эта фигура.

Рисунок 6. Представитель образ ликвидации кривой FITC-sinistrin. Сигнал , генерируемый FITC-sinistrin обнаружен transcuновременно и хранятся во внутренней памяти устройства. Когда записанные данные будут загружены на ПК, программное обеспечение формирует кривую, сравнимую с той, представленной на изображении. Y-ось показывает записанную интенсивность флуоресценции [AU], испускаемого закачиваемой FITC-sinistrin маркера, а по оси Х представляет длительность измерения во времени [мин]. Пожалуйста , нажмите здесь , чтобы посмотреть увеличенную версию этой фигуры.

Рисунок 7. Представитель образ ликвидации кривой FITC-sinistrin у животных с нарушенной функцией почек. (А) FITC-sinistrin кривая выведения у животных со сниженной функцией почек , как правило , показывает увеличенную площадь под кривой и неспособность достичь базовой линии в пределах нормальный период измерения , (Б) В сильно обесцененных животных транскутанно измеренная кривая может показать устойчивое состояние , которое указывает на почечную недостаточность. Пожалуйста , нажмите здесь , чтобы посмотреть увеличенную версию этой фигуры.

Таблица 1. Проверка чрескожного измерения путем сравнения с традиционным клиренса плазмы. Чрескожного измерения почечной функции была подтверждена в различных мышиных моделях (здоровые и в одностороннем порядке нефрэктомированных (UNX) C57BL / 6-129 С.В. мышей и мышиную модель nephronophthisis ( PCY)) по сравнению с зазором плазмы. Значения являются средние значения ± SD. СКФ, скорость клубочковой фильтрации 9.
/53767/53767table2.jpg "/>
Таблица 2. Мышиные модели изучали с помощью чрескожной измерений UNX, в одностороннем порядке нефрэктомированных. АПФ, ингибиторы ангиотензин-превращающего фермента; T gumodwt / вес, трансгенная uromodulin нокаута, SD, Спрэг Dawley крыс; ДОК, поликистоз почек.