Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Мышиной модели кишечная ишемия-реперфузии

20.1K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/53881

⸱

11 мая 2016 г.

 ,  ,  ,  , 
1Trudeau Institute, 2Engelhardt Institute of Molecular Biology, 3Departments of Medicine and Infectious Diseases and Pathology, University of Florida

В этой статье

Краткое содержание

Здесь мы опишем детальную процедуру кишечной ишемии-реперфузии у мышей, что приводит к воспроизводимым травмы без смертности для поощрения стандартизации этой техники по полю. Эта модель кишечной травмы ишемии-реперфузии может быть использован для изучения клеточных и молекулярных механизмов повреждения и регенерации.

Аннотация

Кишечная ишемия является опасным для жизни состояние, связанное с широким спектром клинических состояний, включая атеросклероз, тромбоз, гипотензия, некротический энтероколит, трансплантация кишечника, травмы и хроническое воспаление. Кишечный ишемии-реперфузии (ИК) травма является следствием острого мезентериального ишемии, вызванной недостаточным кровотоком через мезентериальных сосудов, что приводит к кишечным повреждением. Реперфузии после ишемии может еще более усугубить повреждение кишечника. Механизмы травмы ИК сложны и плохо изучены. Таким образом, экспериментальные малые животные модели имеют решающее значение для понимания патофизиологии травмы ИК и развитие новых видов лечения.

Здесь мы описываем модель мыши острой кишечной травмы IR, который обеспечивает воспроизводимый повреждение тонкой кишки без смертности. Это достигается за счет индукции ишемии в области дистальной подвздошной кишки с помощью временно occludinг периферийные и терминальные коллатеральные ветви верхней брыжеечной артерии в течение 60 мин с использованием микрососудистых клипов. Реперфузии в течение 1 ч или 2 ч после травмы результаты воспроизводимым травмы кишечника, рассмотренного гистологического анализа. Правильное положение микрососудистых клипов имеет решающее значение для данной процедуры. Поэтому ролик предоставляет подробный визуальный шаг за шагом описание этой методики. Эта модель кишечной травмы ИК могут быть использованы для изучения клеточных и молекулярных механизмов повреждения и регенерации.

Введение

Кишечник очень чувствителен к нарушению кровотока, что вызывает ишемию и повреждение эпителия. Реперфузии после ишемии обеспечивает повторное насыщение кислородом ткани, и может дополнительно способствовать патологии. Таким образом, кишечная ишемия и реперфузионное повреждение связано с широким спектром патологий, в том числе некротизирующего энтероколита, отторжение аллотрансплантата в малом трансплантации кишечника, осложнения брюшной аорты хирургии аневризм, искусственного кровообращения и воспалительных 1,2 заболевания кишечника. Кишечные ИК травмы, особенно острой брыжеечной ишемии, является опасным для жизни состояние приводит к заболеваемости и смертности 3.

Несмотря на то, плохо понимают, как полагают кишечная ишемия-реперфузия (ИК) в случае травмы, связаны с изменениями в микрофлоры кишечника, а также производство активных форм кислорода и воспалительных цитокинов и хемокинов 1,4-6. Это приводит к активации как вNate и адаптивные иммунные механизмы , которые способствуют воспаление и ткани травмы 1,7,8.

Животные модели имеют решающее значение для понимания механизмов травмы ИК, так как они позволяют легко и амплитудно с потерей функции генетических экспериментов. Несколько моделей животных ИК были разработаны , которые включают в себя полную закупорку сосудов, низкий ишемию потока, и сегментирован окклюзии сосудов (суммированы в недавнем всеобъемлющем обзоре 9). Кишечная ишемия , вызванная полным сосудистой окклюзии верхней брыжеечной артерии (SMA) представляет собой простой и широко используется модель IR у крупных животных и грызунов 9-11. Тем не менее, различные участки кишечника имеют разную восприимчивость к травмам. Кроме того, разнообразный спектр анестетиков, анальгетиков, техник окклюзии артерии, а также несоответствие продолжительности ишемического повреждения и восстановления в результате различной степени травмы оправдав наше понимание биологии ИК по нескольким Studies. Таблица 1 демонстрирует эти несоответствия в мышиных ИК - исследований. Самый большой недостаток с использованием коротких ишемических раза (30-45 мин) нацеливает окно восстановления, на котором можно наблюдать заметные различия между случаями и контролем. Мягкий повреждение эпителия может быть решена через час после реперфузии, поэтому специализированная патологические показатели могут потребоваться, чтобы найти различия в эпителиальной реституции. В противоположность этому, чрезмерный ущерб, как это видно на 100 мин ишемического повреждения могут привести к полному denudement эпителия, где реституция не больше невозможна, увеличивая уровень смертности, а также время восстановления. Таким образом, здесь мы описываем детальную процедуру кишечника IR у мышей, что приводит к воспроизводимым травмы без смертности для поощрения стандартизации этой техники по всей нашей области. Эта модель кишечной травмы ИК могут быть использованы для изучения клеточных и молекулярных механизмов повреждения и регенерации.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Исследования на животных были проведены в соответствии с Национальным институтом здравоохранения и руководящих принципов были одобрены Институциональные уходу и использованию животных комитет Трюдо института. 8-12 недельных мышей C57BL / 6 мышей использовали для исследования.

1. Подготовка к хирургии

  1. Подготовить и стерилизовать хирургические инструменты.
  2. Подготовка изофлуран на основе системы анестезии с конусообразной и подогреваемым площадку. Убедитесь, что накладка нагревается не перегревается (<39 ° С).
  3. Убедитесь, что изофлуран газа продувка адсорбера расположен правильно, чтобы обеспечить выпускные отверстия в нижней части контейнера не были заблокированы или окклюзия каким-либо образом. Взвесьте газа продувкой канистру до процедуры и веса документа на канистре. Выбросьте канистру, когда вес превышает канистра 50 г накопленной массы (~ 12 ч).

2. Анестезия

  1. Обезболить мышь с 3% изофлуран в индукционной камере (1 л / минO 2).
    1. Оценка глубины анестезии неспособностью оставаться в вертикальном положении, потеря целенаправленного добровольного движения, потеря мигательного рефлекса, расслабление мышц и потеря реакции на рефлекторную стимуляцию (палец ноги или хвост щепотку с давлением фирмы).
    2. Оценка частоты дыхания и рисунок, наблюдая стенки грудной клетки и брюшной движения. Под оптимальной анестезии, частота дыхания должна быть ~ 55-65 вдохов в минуту.
    3. Удалить мышь из индукции камеры и быстро брить область живота мыши.
  2. Для того, чтобы предотвратить высыхание роговицы, поместите мягкий глазной мази в глаза.
  3. Поместите курсор на нагретом площадку и подключить его через нос конуса к системе анестезии. Убедитесь, что мембрана конус латекса нос плотно надевается на голову мыши и нет утечки изофлуран.
  4. Снижение изофлуран ставки до 1,5%, и вводят бупренорфин (0,1 мг / кг) и кетамина (10 мг / кг) подкожно, чтобы предотвратить скручивание болевого кадной.
  5. Wipe-ее кожа области работы с стерильным ватным тампоном, смоченным раствором Бетадин хирургическим последующим 70% этанола.

3. хирургия

  1. Сделать см лапаротомии средней линии 3-5 с операционными ножницами. Зона работы Крышка с стерильной неприлипающими площадки, смоченным физиологическим раствором. Изолировать слепую кишку и подвздошную и подвергать брыжеечной артерии с помощью ватного тампона, смоченные в физиологическом растворе.
  2. Чтобы облегчить зажим претендуете, сделать небольшие зарубки в брыжейки окружающих брыжеечной артерии с использованием тонких ирис scissors.To сделать это, осторожно поднимите кишечник с гардеробными пинцетом и разрезать брыжейки на обеих сторонах верхней брыжеечной артерии в месте желаемого клипа (рис 1А). Затем добавляют несколько капель стерильного физиологического раствора в области нужное положение клипа перед нанесением клипов.
    Примечание: Для выполнения операции фиктивный, выполните хирургическую процедуру до шага 3.2. Не применять зажимы. Вместо этого, поддерживать ткань влажной теплой добавленнием сЭлин, как описано в 3.6 в течение 1 часа. После этого переходите к шагу 4.1,
  3. Закупоривать первые ветви порядка верхней брыжеечной артерии с микрососудистых зажимами (70 г) с использованием силы клип для наложения для создания 5-7 см область ишемического подвздошной прилегающих к слепой кишке (рис 1В). Хотя позиция судов является консервативным, могут быть небольшие различия между мышами (см примеры на рисунке 1). Таким образом, 2 или 3 ролика, как правило , требуется (см расположение зажимов на рисунке 1А, D, E, черные стрелки).
    Примечание: Используйте зажимы высокого качества судов. клипы высокого давления могут повредить сосуды и предотвратить регенерацию, тогда как низкие клипами давления (<30 г) не может полностью блокировать кровоток.
  4. Блок коллатерального кровотока через кишечник с помощью двух микрососудистых клипов через сосуды (40 г) силы, демаркации области ишемического кишечника (рис 1). Закупорка коллатеральных сосудов требуетсяпредотвратить приток крови от соседних кровеносных сосудов (см расположение зажимов на рисунке 1А, D, E, зеленые стрелки).
  5. Дополнительно: Добавить раствор гепарина (6 USP единиц / мл), чтобы предотвратить свертывание крови. По каплям добавляют 0,5 мл раствора гепарина с изолированной кишки.
  6. Влажные стерильные без клейкий коврик деликатных вытирает физиологическим раствором, предварительно нагретый до 37 ° С и применяются к хирургической области. Убедитесь, что влажные салфетки остается влажным в течение всей процедуры.
  7. Поддерживать ишемия в течение 60 мин с использованием 1-1,5% изофлуран анестезии во всем. Если процедура ишемия выполнена правильно, ишемическая область изменится вина красного цвета примерно 30 мин. Обратите внимание , что кровеносные сосуды дистальных к положению зажима в увеличенном масштабе при ишемии (рис 1, правая панели) , свидетельствующего об успешном прикус.
  8. Внимательно следить за мышь во время стадии ишемии. Продолжать применять физиологический раствор в неприлипающими площадку, охватывающей участок хирургии.
  9. отметкакрая ишемизированной области пипеткой 20 мкл Gill`s 3 гематоксилином на ткани для облегчения уборки ишемизированной ткани и прилегающей здоровой ткани от той же мыши для сравнения (рис 1E, правая панель).

4. Реперфузии этап

  1. В конце ишемией добавить несколько капель физиологического раствора на площади клипа и аккуратно удалить микрососудистых зажимы с зажимом для наложения. Затем, осторожно надавите кишечника обратно в брюшную полость с помощью солевых смачивают советы хлопка. Удалить неприлипающими площадку и закрыть брюшной стенки и кожи, используя 9 мм зажимы навитые из нержавеющей стали. Если реперфузии выполняется дольше, чем 3 ч, используют рассасывающиеся викрил швом, чтобы закрыть брюшной стенки перед нанесением раны клипов на коже.
  2. Поддерживать мышей в чистую клетку, нагреваемой в течение желаемого промежутка времени (30 мин, 60 мин, 120 мин, или 180 мин) для фазы реперфузии.
  3. Проверьте животных по крайней мере, каждые 30 минут, чтобы обеспечивающих стабильность.
5. Вскрытие и сбор урожая тонкой кишки

  1. Эвтаназии мышей СО 2 передозировку с последующим смещением шейных позвонков в заданное время после реперфузии.
  2. Открыть брюшной полости и собирать ишемическую кишечной ткани для дальнейшего анализа. Урожай здоровой нормальная ткань прилегающих к поврежденной ткани в качестве внутреннего контроля для учета любой системной реакции на травму.
    Примечание: Этот элемент управления является более подходящим, чем ложнооперированных контрольных мышей, потому что ложнооперированных мышей не подвергаются системной реакции на ИК-индуцированного повреждения.
  3. Промойте кишечного содержимого с помощью 30 мл шприц с прикрепленной иглой зондового заполненной физиологическим раствором, а затем разрезается кишечник в продольном направлении. Если образец кишечника необходим для анализа экспрессии генов, вырезать фрагмент 1,5 мм в продольном направлении, и использовать оставшуюся часть для гистологического анализа.
  4. Для гистологического анализа, подготовить рулет с помощью пары щипцов катать INTESTине.
  5. Для поддержания свернутую форму, поместите кусочки кишечника между биопсии пенопластовых прокладок в кассетах ткани (рисунок 2). Поместите кассеты в 10% забуференном формалине.
  6. Закрепить ткани в формалине в течение по крайней мере 24 часов. Заменить формалин с 70% этанола в течение еще 24 ч. Магазин ткани в 70% этаноле до бесконечности при комнатной температуре.
  7. Вставить в парафин, вырезать секции 5 мкм и пятна с гематоксилином и эозином с использованием стандартного протокола (рисунок 3).

6. Подсчет очков

  1. Оценка мышиный травмы ишемии-реперфузии , как в таблице 2. Выберите подходящий метод подсчета очков.
  2. Дополнительно: Разделить поле зрения на четыре секции, так как тяжесть травмы изменяется по всему разрезу.
  3. Вычислить средний балл каждой секции из баллов, полученных вслепую.
  4. Сравните степень поврежденной ткани между случаями и контролем, а также гое неповрежденной ткани с использованием теста Крускала-Уоллиса, а затем несколькими тестовыми сравнений Данна.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Мы оптимизировали экспериментальный протокол ИК хирургии, чтобы получить воспроизводимое ИК-индуцированного повреждения подвздошной кишки у мышей. Представитель результаты демонстрируются в этом разделе.

На рисунке 1 показаны примеры позиции микрососудистых клипы , чтобы вызвать ишемию подвздошной. Черные стрелки показывают положение главных зажимов окклюзии ветви первого порядка верхней брыжеечной артерии. Зе...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Разработка моделей мышей кишечной травмы ИК значительно улучшили понимание механизмов повреждения тканей и помогли в развитии потенциальных терапевтических стратегий для сведения к минимуму повреждения тканей 7,9,11,34. Критические шаги этого протокола правильное позиционирование микрососудистых клипов, правильно сроки ишемии и надлежащей гистологической оценкой травмы ИК.

Продолжительность ишемии имеет решающее значение для последующего повреждения эпителия. Типичное время, необх...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов

Благодарности

Эта работа была поддержана научным фондом Российской, грант №. 14-50-00060 и ООО RUSCHEMBIO. Эта работа также была поддержана Фондом Crohn`s и колитах Америки грант 294083 (для AVT) и НИЗ грант RO1 DK47700 (до CJ).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Подогреватель SunbeamE12107-819Альтернатива: Braintree Scientific Подогреватель
Настольный исследовательский наркозный аппаратVascoUCAP 0001-0000171Альтернатива: Parkland Scientific, V3000PS
Носовой конусParkland ScientificARES500
Канистра для сбора мусора и сменный картриджParkland Scientific80000, 80120
Индукционная камераSurgivetV711802
изофлураномпирамалом для здравоохраненияNDC 66794-013-10Контролируемое вещество, свяжитесь с IACUC
Animal clipper Остер Остер Голден А5 078005-050-003
Офтальмологическая мазьWebster8804604
БупренорфинMcKesson562766Контролируемое вещество, свяжитесь с IACUC
Кетасет (Кетамин HCl)PfizerNADA 45-290Контролируемое вещество, свяжитесь с IACUC
Ватные наконечникиПуританские медицинские изделия806-WCАвтоклав перед применением
BetadinePurdue Products67618-150-1710% Повидон-йод
Стерильный физиологический растворAspen46066-807-60Отрегулируйте до комнатной температуры перед использованием
инфракрасный термометр для грызуновBIOSEBBIO-IRB153
Микрососудистые зажимы, 70 гRoboz Surgical RS5424, RS5435Альтернатива: WPI 14121, для микрососудистых зажимов для окклюзии СМА
, 40 гRoboz Surgical RS6472Альтернатива: WPI 14120, для окклюзии коллатеральных сосудов
Зажим с применением щипцовWorld Precision Instruments14189Альтернатива: Roboz #RS-5410 или  #RS-5440
Gill's 3 гематоксилинThermo Scientific14-390-17
Хирургические скобы, рефлектор 9 ммCell Point Scientific201-1000
Аппликатор AutoclipBeckton Dickinson427630
Byopsy поролоновая салфеткаSimportM476-1
Тканевая кассетаFisher Healthcare15182701AHistosette II комбинированная крышка и основание
10% буферный формалинFisher Scientific245-684
Хирургические ножницы для радужной оболочкиглаза World Precision Instruments501263-G SCАльтернатива: Roboz RS6816
Операционные ножницыWorld Precision Instruments501219-GАльтернатива: Roboz RS6814
Перевязочные щипцыRoboz Surgical RS-5228, RS-8122Альтернатива: World Precision Instruments 1519-G
Гепарин, без эндотоксина, 300 единиц USP / флакон, 50 мгSigma2106
Рефлекторный зажим для удаления ранRoboz Surgical RS-9263Альтернатива: World Precision Instruments: мыши-500347
мыши C57BL/6J Jackson LaboratoryStock No 0664
Повязки Telfa неадгезивные, 3 x 4, стерильныеCoviden1050
Fisherbrand переносные пипеткиFischer Scientific13-711-5AMИспользуйте пипетки для капельного добавления физиологического раствора

Ссылки

  1. Eltzschig, H. K., Eckle, T. Ischemia and reperfusion--from mechanism to translation. Nat Med. 17, 1391-1401 (2011).
  2. Lenaerts, K., et al. New insights in intestinal ischemia-reperfusion injury: implications for intestinal transplantation. Curr Opin Organ Transplant. 18, 298-303 (2013).
  3. Yasuhara, H. Acute mesenteric ischemia: the challenge of gastroenterology. Surg Today. 35, 185-195 (2005).
  4. Perez-Chanona, E., Muhlbauer, M., Jobin, C. The microbiota protects against ischemia/reperfusion-induced intestinal injury through nucleotide-binding oligomerization domain-containing protein 2 (NOD2) signaling. Am J Pathol. 184, 2965-2975 (2014).
  5. Lee, H., et al. Delineating the relationships among the formation of reactive oxygen species, cell membrane instability and innate autoimmunity in intestinal reperfusion injury. Mol Immunol. 58, 151-159 (2014).
  6. Yoshiya, K., et al. Depletion of gut commensal bacteria attenuates intestinal ischemia/reperfusion injury. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 301, G1020-G1030 (2011).
  7. Wu, M. C., et al. The receptor for complement component C3a mediates protection from intestinal ischemia-reperfusion injuries by inhibiting neutrophil mobilization. Proc Natl Acad Sci U S A. 110, 9439-9444 (2013).
  8. Muhlbauer, M., Perez-Chanona, E., Jobin, C. Epithelial cell-specific MyD88 signaling mediates ischemia/reperfusion-induced intestinal injury independent of microbial status. Inflamm Bowel Dis. 19, 2857-2866 (2013).
  9. Gonzalez, L. M., Moeser, A. J., Blikslager, A. T. Animal models of ischemia-reperfusion-induced intestinal injury: progress and promise for translational research. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 308, G63-G75 (2015).
  10. Megison, S. M., Horton, J. W., Chao, H., Walker, P. B. A new model for intestinal ischemia in the rat. J Surg Res. 49, 168-173 (1990).
  11. Goldsmith, J. R., et al. Intestinal epithelial cell-derived mu-opioid signaling protects against ischemia reperfusion injury through PI3K signaling. Am J Pathol. 182, 776-785 (2013).
  12. Cuzzocrea, S., et al. Glycogen synthase kinase-3beta inhibition attenuates the development of ischaemia/reperfusion injury of the gut. Intensive Care Med. 33, 880-893 (2007).
  13. Farber, A., et al. A specific inhibitor of apoptosis decreases tissue injury after intestinal ischemia-reperfusion in mice. J Vasc Surg. 30, 752-760 (1999).
  14. Ben, D. F., et al. TLR4 mediates lung injury and inflammation in intestinal ischemia-reperfusion. J Surg Res. 174, 326-333 (2012).
  15. Watson, M. J., et al. Intestinal ischemia/reperfusion injury triggers activation of innate toll-like receptor 4 and adaptive chemokine programs. Transplant Proc. 40, 3339-3341 (2008).
  16. Watanabe, T., et al. Activation of the MyD88 signaling pathway inhibits ischemia-reperfusion injury in the small intestine. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 303, G324-G334 (2012).
  17. Murayama, T., et al. JNK (c-Jun NH2 terminal kinase) and p38 during ischemia reperfusion injury in the small intestine. Transplantation. 81, 1325-1330 (2006).
  18. Park, P. O., Haglund, U., Bulkley, G. B., Falt, K. The sequence of development of intestinal tissue injury after strangulation ischemia and reperfusion. Surgery. 107, 574-580 (1990).
  19. Jilling, T., Lu, J., Jackson, M., Caplan, M. S. Intestinal epithelial apoptosis initiates gross bowel necrosis in an experimental rat model of neonatal necrotizing enterocolitis. Pediatr Res. 55, 622-629 (2004).
  20. Aprahamian, C. J., Lorenz, R. G., Harmon, C. M., Dimmit, R. A. Toll-like receptor 2 is protective of ischemia-reperfusion-mediated small-bowel injury in a murine model. Pediatr Crit Care Med. 9, 105-109 (2008).
  21. Tatum, P. M., Harmon, C. M., Lorenz, R. G., Dimmitt, R. A. Toll-like receptor 4 is protective against neonatal murine ischemia-reperfusion intestinal injury. J Pediatr Surg. 45, 1246-1255 (2010).
  22. Fleming, S. D., et al. Anti-phospholipid antibodies restore mesenteric ischemia/reperfusion-induced injury in complement receptor 2/complement receptor 1-deficient mice. J. Immunol. 173, 7055-7061 (2004).
  23. Fleming, S. D., et al. Mice deficient in complement receptors 1 and 2 lack a tissue injury-inducing subset of the natural antibody repertoire. J. Immunol. 169, 2126-2133 (2002).
  24. Lapchak, P. H., et al. Platelets orchestrate remote tissue damage after mesenteric ischemia-reperfusion. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 302, G888-G897 (2012).
  25. Rehrig, S., et al. Complement inhibitor, complement receptor 1-related gene/protein y-Ig attenuates intestinal damage after the onset of mesenteric ischemia/reperfusion injury in mice. J. Immunol. 167, 5921-5927 (2001).
  26. Hoffman, S. M., Wang, H., Pope, M. R., Fleming, S. D. Helicobacter infection alters MyD88 and Trif signalling in response to intestinal ischaemia-reperfusion. Exp Physiol. 96, 104-113 (2011).
  27. Moses, T., Wagner, L., Fleming, S. D. TLR4-mediated Cox-2 expression increases intestinal ischemia/reperfusion-induced damage. J Leukoc Biol. 86, 971-980 (2009).
  28. Feinman, R., et al. HIF-1 mediates pathogenic inflammatory responses to intestinal ischemia-reperfusion injury. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 299, G833-G843 (2010).
  29. Lapchak, P. H., et al. The role of platelet factor 4 in local and remote tissue damage in a mouse model of mesenteric ischemia/reperfusion injury. PloS one. 7, e39934(2012).
  30. Wen, S. H., et al. Ischemic postconditioning during reperfusion attenuates intestinal injury and mucosal cell apoptosis by inhibiting JAK/STAT signaling activation. Shock. 38, 411-419 (2012).
  31. Wang, F., et al. Temporal variations of the ileal microbiota in intestinal ischemia and reperfusion. Shock. 39, 96-103 (2013).
  32. Zou, L., Attuwaybi, B., Kone, B. C. Effects of NF-kappa B inhibition on mesenteric ischemia-reperfusion injury. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 284, G713-G721 (2003).
  33. Hassoun, H. T., et al. Alpha-melanocyte-stimulating hormone protects against mesenteric ischemia-reperfusion injury. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 282, G1059-G1068 (2002).
  34. Stallion, A., et al. Ischemia/reperfusion: a clinically relevant model of intestinal injury yielding systemic inflammation. J Pediatr Surg. 40, 470-477 (2005).
  35. Blikslager, A. T., Roberts, M. C., Rhoads, J. M., Argenzio, R. A. Is reperfusion injury an important cause of mucosal damage after porcine intestinal ischemia? Surgery. 121, 526-534 (1997).
  36. Barker, N., et al. Identification of stem cells in small intestine and colon by marker gene Lgr5. Nature. 449, 1003-1007 (2007).
  37. Victoni, T., et al. Local and remote tissue injury upon intestinal ischemia and reperfusion depends on the TLR/MyD88 signaling pathway. Med Microbiol Immunol. 199, 35-42 (2010).
  38. Watanabe, T., et al. Toll-like receptor 2 mediates ischemia-reperfusion injury of the small intestine in adult mice. PloS one. 9, e110441(2014).
  39. Pope, M. R., Fleming, S. D. TLR2 modulates antibodies required for intestinal ischemia/reperfusion-induced damage and inflammation. J. Immunol. 194, 1190-1198 (2015).
  40. Leung, F. W., Su, K. C., Passaro, E. Jr, Guth, P. H. Regional differences in gut blood flow and mucosal damage in response to ischemia and reperfusion. Am J Physiol. 263, G301-G305 (1992).
  41. Chiu, C. J., McArdle, A. H., Brown, R., Scott, H. J., Gurd, F. N. Intestinal mucosal lesion in low-flow states. I. A morphological, hemodynamic, and metabolic reappraisal. Arch Surg. 101, 478-483 (1970).
  42. Quaedackers, J. S., et al. An evaluation of methods for grading histologic injury following ischemia/reperfusion of the small bowel. Transplant Proc. 32, 1307-1310 (2000).
  43. Bianciardi, P., Scorza, R., Ghilardi, G., Samaja, M. Xanthine oxido-reductase activity in ischemic human and rat intestine. Free Radic Res. 38, 919-925 (2004).
  44. Yandza, T., et al. The pig as a preclinical model for intestinal ischemia-reperfusion and transplantation studies. J Surg Res. 178, 807-819 (2012).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Больше статей

верхняя брыжеечная артериямикрососудистые зажимыгистологический анализокрашивание гематоксилином и эозиномметод «швейцарского рулета»экспрессия ФНО-альфаИЛ-1 бетаИЛ-6хемокин Cxcl2
Мышиной модели кишечная ишемия-реперфузии
Связаться с нами
Порекомендовать библиотеке

Конфиденциальность

Условия использования

Политики

© 2026 MyJoVE Corporation. Все права защищены.